Produção e aplicação de bioherbicida obtido a partir de Trichoderma koningiopsis

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Rossetto, Vanusa
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFFS (Repositório Digital da UFFS)
Texto Completo: https://rd.uffs.edu.br/handle/prefix/2160
Resumo: O uso de herbicidas químicos para o controle de plantas daninhas tem gerado diversos problemas ao longo dos anos, como a contaminação dos ecossistemas, contaminação alimentar, a possível contaminação dos aplicadores, e ao surgimento de biótipos de plantas resistentes a diversos mecanismos de ação. Neste trabalho, buscou-se a otimização do biocomposto a base de Trichoderma koningiopsis, utilizando a estratégia sequencial de planejamento de experimentos (Plackett & Burmman e Delineamento experimental composto rotacional DCCR 2³). Assim, foram estudadas diversas variáveis (pH, glicose, extrato de levedura, peptona, sulfato de amônio, sulfato de magnésio, sulfato ferroso e sulfato de manganês) buscando condições estatisticamente significativas na produção da biomassa fúngica e nas atividades enzimáticas de amilases, peroxidases, lipases e celulases. Sendo que o extrato de levedura apresentou significância negativa para celulases e amilases, porém o mesmo apresentou significância positiva na atividade de peroxidases e biomassa. Considerando os resultados obtidos no planejamento experimental, selecionou-se os ensaios 2 (maior atividade de amilase e celulase) e 12 (maior atividade de peroxidases e rendimento de biomassa fúngica) que apresentaram melhores características para serem utilizados como bioherbicida, para serem aplicados em plantas daninhas previamente selecionadas: leiteiro (Euphorbia heterofila), picão preto (Bidens pilosa) e papuã (Urochloa plantaginea). As aplicações ocorreram quando, as plantas apresentavam duas a três folhas e as avaliações da fitotoxidade nas plantas, visivelmente, atribuindo notas de injúrias apresentadas sobre as folhas das plantas. Dentre estas plantas, o leiteiro (Euphorbia heteropylla), foi o que apresentou maior susceptibilidade, aos biocompostos, sendo que a aplicação do ensaio 2 implicou em maior efeito fitotóxico, causando danos de até 90% na área foliar quando utilizado na sua forma não filtrada. Já a aplicação do ensaio 12 implicou até 60% de danos na área foliar do leiteiro. Um estudo para a seleção de linhagens de T. koningiopsis resistentes ou tolerantes a herbicidas químicos (glifosato, glufosinato de amônio, 2,4-D e atrazina) foi realizado, utilizando esporos fúngicos, cultivados em meio BDA e discos de papel filtro embebidos em diferentes concentrações destes herbicidas já citados. O crescimento de T. koningiopsis apresentou-se resistente na maioria das concentrações, não sendo perturbado pela presença do glifosato, demosntrando-se tal fungo resistente a este herbicida químico. Em seguida T. koningiopsis tolerantes ou resistentes igualmente foram avaliados nas condições do ensaio 2, contendo agora glifosato, atrazina, 2,4-D e glufosinato de amônio. Assim pode-se perceber, que quando exposto a atrazina houve maior produção de amilases (20,65 U/mL), já na exposição com glufosinato de amônio houve maior atividade de peroxidases (69 U/mL), enquanto a atividade de lipases e celulases foram reduzidas. No que se referiu a biomassa fúngica, todos os tratamentos na presença de herbicidas químicos, apresentaram aumento micelial em relação ao controle negativo (sem herbicida). Os testes demonstram o potencial uso de T. koningiopsis como um controlador de plantas daninhas, possuindo ainda, potencial efeito sinérgico com herbicidas químicos, o que sugere sua aplicação como bioherbicida.
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Assim, foram estudadas diversas variáveis (pH, glicose, extrato de levedura, peptona, sulfato de amônio, sulfato de magnésio, sulfato ferroso e sulfato de manganês) buscando condições estatisticamente significativas na produção da biomassa fúngica e nas atividades enzimáticas de amilases, peroxidases, lipases e celulases. Sendo que o extrato de levedura apresentou significância negativa para celulases e amilases, porém o mesmo apresentou significância positiva na atividade de peroxidases e biomassa. Considerando os resultados obtidos no planejamento experimental, selecionou-se os ensaios 2 (maior atividade de amilase e celulase) e 12 (maior atividade de peroxidases e rendimento de biomassa fúngica) que apresentaram melhores características para serem utilizados como bioherbicida, para serem aplicados em plantas daninhas previamente selecionadas: leiteiro (Euphorbia heterofila), picão preto (Bidens pilosa) e papuã (Urochloa plantaginea). As aplicações ocorreram quando, as plantas apresentavam duas a três folhas e as avaliações da fitotoxidade nas plantas, visivelmente, atribuindo notas de injúrias apresentadas sobre as folhas das plantas. Dentre estas plantas, o leiteiro (Euphorbia heteropylla), foi o que apresentou maior susceptibilidade, aos biocompostos, sendo que a aplicação do ensaio 2 implicou em maior efeito fitotóxico, causando danos de até 90% na área foliar quando utilizado na sua forma não filtrada. Já a aplicação do ensaio 12 implicou até 60% de danos na área foliar do leiteiro. Um estudo para a seleção de linhagens de T. koningiopsis resistentes ou tolerantes a herbicidas químicos (glifosato, glufosinato de amônio, 2,4-D e atrazina) foi realizado, utilizando esporos fúngicos, cultivados em meio BDA e discos de papel filtro embebidos em diferentes concentrações destes herbicidas já citados. O crescimento de T. koningiopsis apresentou-se resistente na maioria das concentrações, não sendo perturbado pela presença do glifosato, demosntrando-se tal fungo resistente a este herbicida químico. Em seguida T. koningiopsis tolerantes ou resistentes igualmente foram avaliados nas condições do ensaio 2, contendo agora glifosato, atrazina, 2,4-D e glufosinato de amônio. Assim pode-se perceber, que quando exposto a atrazina houve maior produção de amilases (20,65 U/mL), já na exposição com glufosinato de amônio houve maior atividade de peroxidases (69 U/mL), enquanto a atividade de lipases e celulases foram reduzidas. No que se referiu a biomassa fúngica, todos os tratamentos na presença de herbicidas químicos, apresentaram aumento micelial em relação ao controle negativo (sem herbicida). Os testes demonstram o potencial uso de T. koningiopsis como um controlador de plantas daninhas, possuindo ainda, potencial efeito sinérgico com herbicidas químicos, o que sugere sua aplicação como bioherbicida.The use of chemical herbicides to control weeds has generated several problems over the years, such as the contamination of ecosystems, food contamination, possible contamination of the applicators, and the emergence of plant biotypes resistant to several mechanisms of action. In this work, the optimization of the biocomposite based on Trichoderma koningiopsis was done using the sequential strategy of experiment planning (Plackett & Burmman and Composite Experimental Rotational Design CERD 2³). Thus, several variables (pH, glucose, yeast extract, peptone, ammonium sulfate, magnesium sulfate, ferrous sulfate and manganese sulphate) were studied for statistically significant conditions in the production of fungal biomass and in the enzymatic activities of amylases, peroxidases, lipases and cellulases. As the yeast extract presented negative significance for cellulases and amylases, however, it showed a positive significance in the activity of peroxidases and biomass. Considering the results obtained in the experimental design, the trials 2 (higher amylase and cellulase activity) and 12 (higher peroxidase activity and fungal biomass yield) were selected, which presented better characteristics to be used as bioherbicide, to be applied in plants previously selected weeds: Euphorbia heterofila, Bidens pilosa and Urochloa plantaginea. The applications occurred when the plants had two to three leaves and the evaluations of plant phytotoxicity, visibly assigning notes of injuries presented on the leaves of the plants. Among these plants, Euphorbia heteropylla was the one that presented the highest susceptibility to the biocomposites, being that the application of the test 2 implied a greater phytotoxic effect, causing damages of up to 90% in the leaf area when used in its unfiltered form . However, the application of test 12 implied up to 60% of damages in the leaf area of the milkman. A study for the selection of resistant or tolerant chemical herbicide tolerant strains of T. koningiopsis (glyphosate, ammonium glufosinate, 2,4-D and atrazine) was carried out using fungal spores grown in BDA medium and filter paper disks embedded in different concentrations of these herbicides. The growth of T. koningiopsis was resistant in most concentrations, not being disturbed by the presence of glyphosate, demonstrating such fungus resistant to this chemical herbicide. Then tolerant or resistant T. koningiopsis were also evaluated under assay 2 conditions, now containing glyphosate, atrazine, 2,4-D and ammonium glufosinate. Thus, when exposed to atrazine, there was a higher amylase production (20.65 U / mL), whereas in the exposure with glufosinate ammonium there was a higher activity of peroxidases (69 U / mL), while the activity of lipases and cellulases were reduced. In terms of fungal biomass, all treatments in the presence of chemical herbicides, presented mycelial increase in relation to the negative control (without herbicide). The tests demonstrate the potential use of T. koningiopsis as a weed control, with a potential synergistic effect with chemical herbicides, which suggests its application as a bioherbicide.Submitted by Tania Ivani Rokohl (tania.rokohl@uffs.edu.br) on 2018-10-08T13:52:36Z No. of bitstreams: 1 ROSSETTO.pdf: 1425436 bytes, checksum: feeaf104bf1fed94feeee85107b7cd5e (MD5)Approved for entry into archive by Diego dos Santos Borba (dborba@uffs.edu.br) on 2018-10-08T18:12:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ROSSETTO.pdf: 1425436 bytes, checksum: feeaf104bf1fed94feeee85107b7cd5e (MD5)Made available in DSpace on 2018-10-08T18:12:10Z (GMT). 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