Uso da associação de hidroxilamina e detc no tratamento das leishmanioses in vitro

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santos, Thaline Mabel Sousa
Data de Publicação: 2021
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/54814
Resumo: INTRODUÇÃO: As leishmanioses são um conjunto de doenças consideradas negligenciadas pela Organização Mundial da Saúde, que atingem cerca de 1 bilhão de pessoas que estão sob risco de infecção. As manifestações clínicas variam de acordo com a espécie do parasito, da resposta imune e background genético do paciente. Para o tratamento da leishmaniose os fármacos mais utilizados atualmente são os antimoniais pentavalentes. Entretanto estas drogas possuem elevada toxicidade e efeitos colaterais desconfortáveis. Neste contexto, a busca de novos fármacos com alta ação leishmanicida e reduzida toxicidade faz-se necessária. Uma alternativa interessante tem sido o uso de fármacos que atuam em mecanismos da resposta imune, pois estes têm demonstrado resultados promissores. Dentre eles, o dietilditiocarbamato (DETC) é um quelante de cobre que inibe o funcionamento da superóxido dismutase, e já foi demonstrado que ele aumenta a produção de superóxido e diminui a carga parasitária na leishmaniose tegumentar experimental. Outro fármaco, a hidroxilamina, reage com o superóxido e durante esse metabolismo promove o aumento de peróxido de nitrito, molécula capaz de destruir parasitos intracelulares. OBJETIVO: Por isto, o objetivo deste trabalho foi testar a ação in vitro da associação de Hidroxilamina e DETC contra Leishmania braziliensis, Leishmania amazonensis e Leishmania infantum.MATERIAIS E MÉTODOS: Foram realizados testes de toxicidade em Leishmania braziliensis, Leishmania amazonensis e Leishmania infantum e em macrófagos murinos derivados de medula de camundongo BALB/C. Além disso, macrófagos derivados de medula óssea foram infectados por L. amazonensis, L. braziliensis e L. infantum e tratados por 48 horas para avaliar a percentagem de infecção e número de amastigotas através de contagem em microscópio de fluorescência.
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spelling Santos, Thaline Mabel SousaCunha, Antonio Ricardo Khouri2022-09-20T12:01:15Z2022-09-20T12:01:15Z2021SANTOS, Thaline Mabel Sousa. Uso da associação de hidroxilamina e detc no tratamento das leishmanioses in vitro. 2021. 64f. Dissertação, (mestrado)-Instituto Gonçalo Moniz, Fundação Oswaldo Cruz, Salvador, 2021.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/54814INTRODUÇÃO: As leishmanioses são um conjunto de doenças consideradas negligenciadas pela Organização Mundial da Saúde, que atingem cerca de 1 bilhão de pessoas que estão sob risco de infecção. As manifestações clínicas variam de acordo com a espécie do parasito, da resposta imune e background genético do paciente. Para o tratamento da leishmaniose os fármacos mais utilizados atualmente são os antimoniais pentavalentes. Entretanto estas drogas possuem elevada toxicidade e efeitos colaterais desconfortáveis. Neste contexto, a busca de novos fármacos com alta ação leishmanicida e reduzida toxicidade faz-se necessária. Uma alternativa interessante tem sido o uso de fármacos que atuam em mecanismos da resposta imune, pois estes têm demonstrado resultados promissores. Dentre eles, o dietilditiocarbamato (DETC) é um quelante de cobre que inibe o funcionamento da superóxido dismutase, e já foi demonstrado que ele aumenta a produção de superóxido e diminui a carga parasitária na leishmaniose tegumentar experimental. Outro fármaco, a hidroxilamina, reage com o superóxido e durante esse metabolismo promove o aumento de peróxido de nitrito, molécula capaz de destruir parasitos intracelulares. OBJETIVO: Por isto, o objetivo deste trabalho foi testar a ação in vitro da associação de Hidroxilamina e DETC contra Leishmania braziliensis, Leishmania amazonensis e Leishmania infantum.MATERIAIS E MÉTODOS: Foram realizados testes de toxicidade em Leishmania braziliensis, Leishmania amazonensis e Leishmania infantum e em macrófagos murinos derivados de medula de camundongo BALB/C. Além disso, macrófagos derivados de medula óssea foram infectados por L. amazonensis, L. braziliensis e L. infantum e tratados por 48 horas para avaliar a percentagem de infecção e número de amastigotas através de contagem em microscópio de fluorescência.INTRODUCTION: Leishmaniasis are a group of neglected diseases, according to the World Health Organization, that affects one billion of people that are at risk of infection. Clinical status vary according to the parasite species and the host immune response and genetic background. The most used drugs to the treatment of leishmaniasis are pentavalent antimonial. However, these drugs present high toxicity and uncomfortable collateral effects. In this context, it is necessary the search for new medicines with a high leishmanicidal action and reduced toxicity. An interesting alternative has been the use of drugs that act in the mechanisms of immune response as it has shown promising results. In regard of these drugs, there is the diethyldithiocarbamate, which is a copper-quelating compound that inhibits the function of the superoxide dismutase and it has been demonstrated that this compound increases the production of superoxide and decrease the parasitic load in the experimental cutaneous leishmaniasis. Another alternative drug is the hydroxylamine that reacts with the superoxide and during the metabolism promotes the increase of nitrite peroxide, a molecule capable of destroying intracellular parasites. OBJECTIVE: That being said, this study objective was to test the in vitro action of the association of Hydroxylamine and DETC against Leishmania braziliensis, Leishmania amazonensis e Leishmania infantum. MATERIALS E METHODS: It has been performed toxicity tests in Leishmania braziliensis, Leishmania amazonensis e Leishmania infantum and also in murine macrophages derived from BALB/C bone marrow. In addition, BALB/C bone marrow-derived macrophages were infected by L. amazonensis, L. braziliensis and L. infantum and treated for 48 hours to assess the percentage of infection and number of amastigotes by counting under a fluorescence microscope. RESULTS: Our results showed a reduction in the growth and viability of the parasites when treated from 2 μM onwards of DETC and at the highest concentration of hydroxylamine (5 mM). Inhibition index of 50% was 33.03 μM to hydroxylamine, 0.247 μM to DETC and 1.676 μM to the association between them against the Leishmania braziliensis. Regarding the murine macrophages the inhibition index of 50% was 237.0 μM to hydroxylamine, 11.47 μM to DETC and 67.16 μM to the association between the two drugs (DETC/Hydroxylamine=1:2.5). An antagonistic action was observed against the murine macrophages when using the combined concentration of 20 uM from DETC and 500 uM from hydroxylamine. On the other hand, these combined concentrations were highly synergistic to the L. braziliensis. The association between these concentrations was also capable of significantly reducing the infection percentage and the number of amastigotes per 100 cells. CONCLUSION: Our results demonstrated that the association of hydroxylamine and DETC has powerful antiproliferative effects in promastigotes and amastigotes from L. braziliensis, L. amazonensis e L. infantum and presents low toxicity to the murine macrophages. Key-words:Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico – CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.porUso da associação de hidroxilamina e detc no tratamento das leishmanioses in vitroUse of hydroxylamine and DETC association in the treatment of leishmaniasis in vitroinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2021Instituto Gonçalo MonizInstituto Gonçalo MonizMestrado AcadêmicoSalvadorPrograma de Pós-Graduação em PatologiaLeishmaniose CutaneaLeishmaniose VisceralLeishmania BrazilensisDietilditiocarbamatoHidroxilaminainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/54814/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINAL000251259.pdfapplication/pdf1838872https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/54814/2/000251259.pdf2ea7429038f3c6efde295c61be61d5baMD52icict/548142022-09-20 09:01:16.085oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352022-09-20T12:01:16Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
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