Terpenos de culturas in vitro de Duroia saccifera (Rubiaceae) e avaliação das atividades antibacteriana, antiangiogênica e antioxidante dos extratos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Lozano, Stefhania
Data de Publicação: 2020
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional do INPA
Texto Completo: https://repositorio.inpa.gov.br/handle/1/12998
http://lattes.cnpq.br/7829347515247831
Resumo: Duroia saccifera (Mart. Ex Roem. & Schult.) K. Schum. (Rubiaceae) ocorre na floresta Amazônica. Extratos de plantas in natura da espécie têm apresentado atividade antioxidante, antimicrobiana inclusive frente a Mycobacterium tuberculosis mostrando seu potencial medicinal. Com base nisso, esse trabalho teve como objetivo estudar fitoquímica e algumas atividades biológicas de extratos de culturas in vitro de D. saccifera, além de descrever diferenças envolvidas nos métodos de propagação in vitro e no tempo da indução da calogênese, baseando-se no perfil químico dos extratos hexânicos, acetato de etila (AcOEt) e metanólicos (MeOH) de plântulas, calos, e suspensões celulares. Mudas de plântulas de D. saccifera foram utilizadas para a preparação dos extratos de plântulas e como fonte de explantes para iniciar o estabelecimento dos cultivos de calos e suspensões celulares. O material vegetal foi extraído com os solventes orgânicos hexano, AcOEt e MeOH, os extratos AcOEt dos calos e MeOH das plântulas foram fracionados em coluna aberta. Todos os extratos e frações foram analisados por Cromatografia em Camada Delgada Comparativa (CCDC). Os extratos dos calos e as suspensões foram testados em ensaios antimicrobiano e antioxidante, os extratos das suspensões celulares foram testados frente a sua atividade angiogênica. Os extratos de calos e suspensões celulares apresentaram um perfil químico semelhante, sendo os extratos das plântulas notavelmente diferentes, porém, todos os extratos se mostraram ricos em terpenoides com os reveladores testados. A comparação do perfil químico dos extratos das culturas e de explantes com diferentes graus de diferenciação, possibilitou verificar a presença de iridoides somente nas culturas com células diferenciadas. Do extrato AcOEt obteve-se uma mixtura de β-sitosterol e estigmasterol e outra de ácido oleanólico e ursólico, obtidas pela primeira vez em culturas in vitro desta espécie. O fracionamento do extrato MeOH de plântulas resultou no isolamento do iridoide éster metílico de monotropeína, obtido pela primeira vez na espécie. Os extratos AcOEt dos calos e suspensões, e o extrato hexânico dos calos apresentaram atividade bacteriostática. O extrato AcOEt das suspensões celulares apresentou atividade antiangiogênica significativa. Os resultados encontrados neste trabalho demonstram o grande potencial das culturas in vitro de D. saccifera para o suprimento de metabólitos secundários ativos, principalmente terpenoides, e estimulam a continuação do fracionamento do extrato de AcOEt dos calos e MeOH das plântulas, para isolar, identificar e analisar outras possíveis substâncias ativas que podem levar à descoberta de novos medicamentos para o tratamento da tuberculose.
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Mudas de plântulas de D. saccifera foram utilizadas para a preparação dos extratos de plântulas e como fonte de explantes para iniciar o estabelecimento dos cultivos de calos e suspensões celulares. O material vegetal foi extraído com os solventes orgânicos hexano, AcOEt e MeOH, os extratos AcOEt dos calos e MeOH das plântulas foram fracionados em coluna aberta. Todos os extratos e frações foram analisados por Cromatografia em Camada Delgada Comparativa (CCDC). Os extratos dos calos e as suspensões foram testados em ensaios antimicrobiano e antioxidante, os extratos das suspensões celulares foram testados frente a sua atividade angiogênica. Os extratos de calos e suspensões celulares apresentaram um perfil químico semelhante, sendo os extratos das plântulas notavelmente diferentes, porém, todos os extratos se mostraram ricos em terpenoides com os reveladores testados. A comparação do perfil químico dos extratos das culturas e de explantes com diferentes graus de diferenciação, possibilitou verificar a presença de iridoides somente nas culturas com células diferenciadas. Do extrato AcOEt obteve-se uma mixtura de β-sitosterol e estigmasterol e outra de ácido oleanólico e ursólico, obtidas pela primeira vez em culturas in vitro desta espécie. O fracionamento do extrato MeOH de plântulas resultou no isolamento do iridoide éster metílico de monotropeína, obtido pela primeira vez na espécie. Os extratos AcOEt dos calos e suspensões, e o extrato hexânico dos calos apresentaram atividade bacteriostática. O extrato AcOEt das suspensões celulares apresentou atividade antiangiogênica significativa. Os resultados encontrados neste trabalho demonstram o grande potencial das culturas in vitro de D. saccifera para o suprimento de metabólitos secundários ativos, principalmente terpenoides, e estimulam a continuação do fracionamento do extrato de AcOEt dos calos e MeOH das plântulas, para isolar, identificar e analisar outras possíveis substâncias ativas que podem levar à descoberta de novos medicamentos para o tratamento da tuberculose.Duroia saccifera (Mart. Ex Roem. & Schult.) K. Schum. (Rubiaceae) occurs in the Amazon rainforest. In natura plant extracts of the species have shown antioxidant, antimicrobial even against Mycobacterium tuberculosis activity, showing their medicinal potential. Based on this, the objective of this work was to study phytochemically and some biological activities of extracts of in vitro D. saccifera cultures, as well as to describe differences involved in in vitro propagation methods and calogenesis induction time, based on the chemical profile of the extracts hexanes, ethyl acetate (EtOAc) and methanolic (MeOH) from seedlings, calli, and cell suspensions. Seedlings of D. saccifera were used to prepare seedling extracts and as a source of explants to initiate the establishment of callus and cell suspension cultures. The plant material was extracted with the organic solvents hexane, EtOAc and MeOH. Callus EtOAc and seedling MeOH extracts were fractionated in open column. All extracts and fractions were analyzed by Comparative Thin Layer Chromatography (TLC). Callus extracts and suspensions were tested in antimicrobial and antioxidant assays; cell suspension extracts were tested for angiogenic activity. Callus extracts and cell suspensions had a similar chemical profile, and the seedling extracts were remarkably different, however, all extracts were rich in terpenoids. The comparison of the chemical profile of the extracts of the cultures and explants with different degrees of differentiation made it possible to verify the presence of iridoids only in cultures with differentiated cells. A mixture of β-sitosterol, stigmasterol and oleanolic and ursolic acid were obtained from the EtOAc extract. Seedling fractionation resulted in the isolation of the iridoid monotropein methyl ester, obtained for the first time in the species. Of the extracts tested, the EtOAc extracts of callus and suspensions and hexanic callus extract showed bacteriostatic activity. EtOAc extract from cell suspensions showed significant antiagiogenic activity. The results found in this work demonstrate the great potential of D. saccifera in vitro cultures for the supply of mainly terpenoid active secondary metabolites and stimulate the continued fractionation of callus EtOAc extract and seedling MeOH to isolate, identify and analyze other possible active substances that may lead to the discovery of new drugs for the treatment of tuberculosis.porInstituto Nacional Pesquisas da Amazônia - INPABotânicaCC0 1.0 Universalhttp://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/info:eu-repo/semantics/openAccessFitoquimicaBotânica aplicadaTerpenos de culturas in vitro de Duroia saccifera (Rubiaceae) e avaliação das atividades antibacteriana, antiangiogênica e antioxidante dos extratosinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisreponame:Repositório Institucional do INPAinstname:Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA)instacron:INPAORIGINALDissertação-Stefhania versão final-2020N.pdfDissertação-Stefhania versão final-2020N.pdfDissertação-Stefhania Alzateapplication/pdf3398629https://repositorio.inpa.gov.br/bitstream/1/12998/1/Disserta%c3%a7%c3%a3o-Stefhania%20vers%c3%a3o%20final-2020N.pdf8af2414785cdb026df2f40043db22f3dMD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8701https://repositorio.inpa.gov.br/bitstream/1/12998/2/license_rdf42fd4ad1e89814f5e4a476b409eb708cMD521/129982020-03-10 10:40:55.029oai:repositorio:1/12998Repositório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.inpa.gov.br/oai/requestopendoar:2020-03-10T14:40:55Repositório Institucional do INPA - Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia (INPA)false
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