Estudo in vitro dos efeitos de salvinorina A na expressão hepática de genes

• Autor(a) principal: Cruz, André Miguel Martins da
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.6/6303
• topic: Células Hepáticas; Citotoxicidade; Expressão Génica; Novas Substâncias Psicoativas; Salvia Divinorum; Salvinorina A; Domínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Engenharia Química

As novas substâncias psicoativas (NPS) são, segundo a Observatório Europeu da Droga e da Toxicodependência (EMCDDA), todo e qualquer novo estupefaciente ou nova droga psicotrópica na sua forma pura, ou por preparar, que não é controlada pela Convenção Única das Nações Unidas de 1961 sobre os estupefacientes nem pela Convenção das Nações Unidas de 1971, mas que possa representar uma ameaça para a saúde pública comparativamente às substâncias listadas nessas convenções. Pelo seu crescente consumo a nível mundial e elevado desconhecimento do seus efeitos no organismo, as NPS têm-se tornado cada vez mais uma questão preocupante e, em 2012, foram adotadas medidas preventivas em Portugal relativamente às NPS, sendo que uma das substâncias que passou a integrar esta lista foi a Salvia divinorum (S. divinorum) e o seu componente bioativo, a salvinorina A (SA). A S. divinorum é uma planta que apresenta propriedades alucinogénias a qual, até meados dos anos 60, era utilizada unicamente pelos Mazatecas (região de Oaxaca, México). A substância nela presente que lhe confere estas propriedades, e que, por isso, tem despertado um grande interesse junto da comunidade científica, é o diterpeno neoclerodano SA. A SA é distinta de todos os outros alucinogénios conhecidos por possuir um mecanismo de ação único, é um agonista seletivo dos recetores kappa opióides (KOR). Apesar do alvo principal da S. divinorum, e da SA, ser o sistema nervoso central (SNC), até a data, ainda não foram pesquisados os seus potenciais efeitos a nível periférico, em particular a nível hepático, o órgão responsável pelo metabolismo de grande parte de compostos endógenos e xenobióticos. Assim, com este estudo pretendeu-se determinar in vitro a citotoxicidade e analisar a expressão relativa de certos genes relevantes no organismo resultantes da incubação de células hepáticas (Hep G2 e WRL-68) com várias concentrações de SA durante vários períodos de tempo. Os genes estudados foram: apolipoproteina B100 (Apo B100); carboxilesterase 1 (Ces 1); citocromo C (Cit. C); citocromo P450 1A2 (CYP450 1A2); citocromo P450 2D6 (CYP450 2D6); citocromo P450 3A4; glucuronosiltranferase 1A1 (UGT 1A1). Os resultados obtidos mostraram que, de modo geral, 50 µM de SA são citotóxicos para ambas as linhas celulares, sendo que 10 µM apenas mostraram diminuir a viabilidade celular das células Hep G2 após 72 h de incubação indicando que, aparentemente, as células Hep G2 são mais sensíveis à SA, comparando com as WRL-68. Pelo contrário, 0,1 e 1 µM não promoveram qualquer alteração na viabilidade celular relativa em ambas as linhas celulares. Relativamente ao efeito da exposição de células Hep G2 e WRL-68 a 1 µM de SA durante vários períodos de incubação (12, 24 e 72 h) verificou-se que, no geral, a SA tem impactos em termos de expressão relativa do mRNA de vários genes, de modo dependente quer do tempo de incubação quer da linha celular. Além disso, não foi detetada qualquer expressão do gene Ces 1 nas células WRL-68, indicando que o mesmo não é expresso nesta linha celular. Em suma, a SA aparenta ter um perfil toxicológico seguro porém em termos de regulação da expressão de genes importa salientar que, de um modo geral, pode exercer efeitos positivos ou negativos, consoante o gene em análise, o tempo de incubação com o composto e o tipo celular. Assim, e por se tratar do primeiro estudo que avaliou o potencial papel da SA na expressão hepática de certos genes, são necessárias investigações futuras para confirmar que os efeitos apresentados neste estudo são observados in vivo e diretamente devidos ao consumo de SA.