Population struture, virulence and antibiotic resistance of Streptococcus agalactiae colonizing non-pregnant women

• Autor(a) principal: GUIMARÃES, António Maria Gonçalves de Mesquita
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/138210
• topic: Ciências biomédicas; Microbiologia médica; Streptococcus agalactiae; Colonização; Virulência; Resistência antimicrobiana; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

Streptococcus agalactiae (GBS) é uma bactéria comensal dos tratos gastrointestinal e urogenital que se apresenta como o principal causador de mortalidade neonatal, causando ainda doença em adultos (idosos, imunocomprometidos). Foi estabelecida uma associação entre infeção neonatal e colonização urogenital materna e, em alguns países como Portugal, as gestantes são testadas para a colonização por GBS através de uma zaragatoa vaginal e ano-rectal, às 35-37 semanas de gravidez, sendo que a maioria dos estudos incide na caracterização de isolados de colonização de grávidas ou de infeção. No entanto, o estudo da colonização por GBS em mulheres não-grávidas, com vista à compreensão da estrutura populacional, serótipos, resistência a antimicrobianos (AMR) e fatores de virulência, é essencial para uma melhor prevenção e tratamento de infeções por GBS. Esta tese teve como objetivo a caracterização molecular de isolados de GBS obtidos de mulheres não-grávidas, de forma a avaliar a sua diversidade clonal, estabilidade, perfis de virulência e AMR. Adicionalmente, avaliou-se a capacidade da espectroscopia de FT-IR ATR em diferenciar linhagens de GBS. Dois processos de amostragem (PA) foram realizados para detetar colonização por GBS usando amostras de urina e zaragatoa vaginal. No primeiro PA foram incluídas 20 mulheres saudáveis e 1 mulher com infeções urinárias recorrentes, não-grávidas e em idade reprodutiva. Decorridos dois anos e meio, o segundo PA incluiu 10 das 20 mulheres saudáveis. As amostras foram processadas em diferentes meios de cultura/condições atmosféricas e a identificação dos isolados determinada por MALDI-TOF e confirmada pela deteção do gene dltS. Um total de 188 isolados foram obtidos de 9/21 e 3/10 mulheres no primeiro e segundo PA, respetivamente. Verificou-se alteração no estado de colonização em metade das mulheres entre os PAs. Curiosamente, 4 dadoras apresentaram GBS apenas na amostra de urina, sugerindo que esta poderá ser uma amostra biológica negligenciada para o rastreio de GBS em grávidas. Foram identificados cinco serótipos (CPS, II-VI), sendo o CPS II o mais frequente, e nove Sequence Types (ST) pertencentes a cinco complexos clonais (CC) (CC1: ST1 e ST2; CC10: ST8 e ST10; CC19: ST19, ST28; CC/ST23; CC/ST314), juntamente com o singleton ST529, sendo de salientar que ST10 e ST19 foram anteriormente associados a infeção. Foram identificados vários genes de virulência, exceto o marcador de hipervirulência hvgA, tendo-se verificado uma associação entre os perfis de virulência e os CCs (CC10/bac, CC19/rib). Foi detetada resistência à eritromicina, clindamicina e tetraciclina, associada à presença dos genes erm(B), tet(M) e tet(O). Dados preliminares de FT-IR ATR permitiram elaborar um modelo de discriminação baseado em serótipos, carecendo ainda de validação. Os isolados de GBS provenientes de colonização de mulheres não-grávidas caracterizados neste estudo permitiram a identificação de linhagens e fatores de virulência previamente associados a infeção. A estabilidade clonal encontrada numa mesma dadora contrastou com a instabilidade no estado de colonização. A maior deteção de GBS em urina em comparação com zaragatoa vaginal salienta a necessidade de refletir sobre os procedimentos atuais de testagem de GBS. O conhecimento da estrutura populacional e padrões de colonização de GBS é essencial para identificar as estirpes circulantes, de forma a orientar o desenvolvimento de uma profilaxia ainda mais efetiva.