Estudo de polimorfismos no gene que codifica a proteína kelch K13, um marcador de resistência às artemisininas, em Moçambique e Angola

• Autor(a) principal: ESCOBAR, Carlos Gil
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/19837
• topic: Saúde pública; Malária; Plasmodium falciparum; OMS; Antimaláricos; Resistência a fármacos; Marcador molecular; K-13 propeller; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

A malária por Plasmodium falciparum é ainda um grave problema de saúde mundial, principalmente na África subsaariana. O aparecimento de resistência aos diversos antimaláricos tem sucessivamente minado esta luta. O Sudeste asiático é historicamente o principal foco de aparecimento e dispersão para África destas resistências. As combinações com derivados das artemisininas são eficazes e recomendadas pela Organização Mundial da Saúde como tratamento de primeira linha desde 2006. No entanto, diversos estudos apontam para vários sinais do aparecimento de resistência a estes fármacos na região do Grande Mekong desde o início da década de 2000: maior taxa de falência terapêutica e de parasitémia ao terceiro dia de tratamento e uma velocidade de eliminação parasitária inferior. No início de 2014, Ariey et al. descreveram um marcador molecular que se correlaciona com este fenótipo de resistência, mutações no gene PF3D7_1343700 que codifica a proteína kelch K13, tendo a Organização Mundial da Saúde incluído este marcador na definição de resistência parcial às artemisininas em setembro de 2014. A monitorização da dispersão de parasitas resistentes torna-se assim uma ferramenta fundamental. Pretendeu-se estudar a presença de polimorfismos no gene PF3D7_1343700, antes e depois da introdução desta classe terapêutica, em dois países africanos de língua portuguesa: Moçambique e Angola. Para este efeito, foram analisadas 200 isolados de ADN de Plasmodium falciparum que se encontravam conservadas no Instituto de Higiene e Medicina Tropical, 100 de cada país em estudo, e dentro de cada país 50 para cada grupo temporal (2003-05 e 2010-12). Os estudos originais foram aprovados pelos respetivos comités de ética. Foi otimizada uma reação em cadeia da polimerase para amplificação de um fragmento do gene em estudo que continha as mutações já descritas. Após confirmação de produto por eletroforese em gel de agarose, o produto foi purificado e enviado para sequenciação. A sequência obtida foi comparada com a estirpe de referência 3D7. A previsão de estrutura e da alteração funcional da proteína foi realizada mediante as ferramentas on line RaptorX e PROVEAN, respetivamente. Foram observados três polimorfismos da proteína kelch K13 em cinco amostras do período após a introdução das artemisininas: V494I, R575R e R471R, sendo os dois primeiros descritos pela primeira vez neste trabalho. O polimorfismo V494I, encontrado em Moçambique, situa-se no codão seguinte a uma das mutações atualmente associadas a resistência às artemisininas (Y493H) e na mesma região estrutural, mas a previsão funcional foi neutral. As mutações R575R e R471R, presentes em Angola, são sinónimas. Esta última foi reportada em outros dois países africanos, a República Democrática do Congo e no Gabão. Não foram encontrados os polimorfismos associados a resistência parcial às artemisininas, o que está de acordo com outros estudos realizados em África, sendo o presente estudo o primeiro a descrever estes resultados em Moçambique e Angola. No entanto, deverá ser mantida a vigilância epidemiológica com este marcador e com marcadores das drogas associadas às artemisininas para predizer a emergência deste fenómeno em África.