Carga viral do vírus da hepatite B por PCR-RT em plasma versus soro

• Autor(a) principal: Ferreira, Célia Sofia Ramalho
• Data de Publicação: 2009
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/8757
• topic: Biologia molecular; Hepatite; Doenças infecciosas

A infecção pelo vírus da hepatite B (VHB) constitui um grave problema para a saúde pública, calculando-se que mais de 2 biliões de pessoas foram infectadas e mais de 350 milhões de pessoas no mundo sejam doentes crónicos infectados pelo VHB, dos quais 20 a 30 % estão em risco de morrer de carcinoma hepatocelular ou de outros problemas hepáticos. A variabilidade genética do VHB reflecte-se nos diferentes genótipos, sendo conhecidos actualmente 8 genótipos diferentes denominados pelas letras de A a H. O conhecimento do significado clínico dos diferentes genótipos em doentes com ambas as infecções do VHB (aguda e crónica) foi aumentando ao longo dos anos. A introdução de técnicas baseadas em biologia molecular deu-nos uma ferramenta preciosa no manejo de hepatites virais, uma vez que podem ser usadas para confirmar o diagnóstico de infecção activa. Estas técnicas ajudam ainda a estabelecer um prognóstico, a seleccionar e ajustar protocolos de tratamento e avaliam a resposta viral à terapêutica, incluindo o desenvolvimento de resistências. O DNA do VHB pode ser detectado e quantificado através de tecnologias de amplificação de ácidos nucleicos como é o caso da Reacção em Cadeia da Polimerase em tempo real (PCR-RT). Esta técnica é bastante recomendada para a monitorização da hepatite B, pela sua sensibilidade, precisão e limites dinâmicos máximos, quando comparada com outros testes comerciais. O teste Cobas® AmpliPrep/Cobas® TaqMan® HBV (Roche Diagnostics) é um teste comercial de amplificação de ácidos nucleicos para a determinação da virémia baseado na química do PCR TaqMan. Este teste foi recentemente desenvolvido para poder ser usado com o protocolo do Cobas AmpliPrep (equipamento automático de extracção de DNAs ou RNAs de produtos biológicos, tal como soro e plasma). Uma vez que o teste Cobas® AmpliPrep/Cobas® TaqMan® HBV foi validado apenas para utilização de plasma humano colhido com EDTA, pretende-se com este estudo comparar a carga viral do DNA do VHB, por PCR-RT em amostras de plasma e soro. Esta comparação permitirá a validação interna dos resultados em amostras de soro. Para esta validação usaram-se amostras de 360 indivíduos com infecção pelo VHB aguda ou crónica, activa ou não. Os resultados obtidos mostram que existe uma boa correlação entre as cargas virais do plasma e as cargas virais do soro, sendo uma relação estatisticamente significativa entre as duas variáveis (p <0,05), pelo que se pode validar o uso do teste Cobas® AmpliPrep/Cobas® TaqMan® HBV em soro. Conclui-se assim que o teste foi validado para amostras de soro.