Saccharomyces cerevisiae como modelo para o estudo da radiação ultravioleta
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2019 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10400.22/15381 |
Resumo: | A radiação ionizante tem energia suficiente para remover os eletrões de valência de um átomo. As partículas alfa, beta, raios x, raios gama e energias de alto espectro ultravioleta são tipos de radiação ionizante. Esta radiação consegue provocar danos no ácido desoxirribonucleico (DNA, do inglês Deoxyribonucleic Acid) por via direta e indireta. Na via direta, as partículas carregadas causam diretamente danos no DNA; na via indireta, a radiação ioniza outras moléculas e estas causam danos celulares. A radiação ultravioleta (UV, do inglês ultraviolet) está dividida em três tipos: UVA (320-400nm), UVB (280-320nm) e UVC (100-280nm). A UVC é completamente absorvida pela camada de ozono, mas é a que provoca mais danos celulares. A levedura Saccharomyces cerevisae é um microrganismo eucariota unicelular amplamente utilizado como modelo de estudo, devido às suas características se encontrarem bem estudadas. O principal objetivo deste trabalho é avaliar os efeitos da radiação UV no modelo biológico – S. cerevisiae. As culturas de S. cerevisiae foram irradiadas com luz ultravioleta (264nm e 365nm), foram medidas as densidades óticas de cada cultura em determinados intervalos de tempos (1 hora, 3 horas, 6 horas e 24 horas) e a viabilidade celular de cada cultura foi acompanhada pelo método da gota em placa. Realizou-se, ainda, a técnica de RAPD-PCR (do inglês Random Amplification of Polymorphic DNA – Polymerase Chain Reaction) seguida de uma eletroforese em gel de agarose para as amostras recolhidas nos intervalos de tempo acima indicados. Os resultados mostram que as densidades óticas e a viabilidade celular não apresentam diferenças estatisticamente significativas, o que sugere que a radiação ultravioleta pode não afetar o crescimento e a viabilidade celular do modelo em estudo. A eletroforese das amostras após RAPD-PCR mostra, também, que não existem diferenças nos no perfil de bandas de DNA, no tempo 0, entre o controlo e amostra, no entanto verificam-se alterações no perfil de bandas de DNA, no tempo 24, entre o controlo e amostra. Palavras-chaves: radiação ultravioleta; viabilidade celular; alterações no DNA; Saccharomyces cerevisiae |
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Saccharomyces cerevisiae como modelo para o estudo da radiação ultravioletaRadiação ultravioletaDNAViabilidade celularUltraviolet radiationSaccharomyces cerevisiaeCellular viabilityA radiação ionizante tem energia suficiente para remover os eletrões de valência de um átomo. As partículas alfa, beta, raios x, raios gama e energias de alto espectro ultravioleta são tipos de radiação ionizante. Esta radiação consegue provocar danos no ácido desoxirribonucleico (DNA, do inglês Deoxyribonucleic Acid) por via direta e indireta. Na via direta, as partículas carregadas causam diretamente danos no DNA; na via indireta, a radiação ioniza outras moléculas e estas causam danos celulares. A radiação ultravioleta (UV, do inglês ultraviolet) está dividida em três tipos: UVA (320-400nm), UVB (280-320nm) e UVC (100-280nm). A UVC é completamente absorvida pela camada de ozono, mas é a que provoca mais danos celulares. A levedura Saccharomyces cerevisae é um microrganismo eucariota unicelular amplamente utilizado como modelo de estudo, devido às suas características se encontrarem bem estudadas. O principal objetivo deste trabalho é avaliar os efeitos da radiação UV no modelo biológico – S. cerevisiae. As culturas de S. cerevisiae foram irradiadas com luz ultravioleta (264nm e 365nm), foram medidas as densidades óticas de cada cultura em determinados intervalos de tempos (1 hora, 3 horas, 6 horas e 24 horas) e a viabilidade celular de cada cultura foi acompanhada pelo método da gota em placa. Realizou-se, ainda, a técnica de RAPD-PCR (do inglês Random Amplification of Polymorphic DNA – Polymerase Chain Reaction) seguida de uma eletroforese em gel de agarose para as amostras recolhidas nos intervalos de tempo acima indicados. Os resultados mostram que as densidades óticas e a viabilidade celular não apresentam diferenças estatisticamente significativas, o que sugere que a radiação ultravioleta pode não afetar o crescimento e a viabilidade celular do modelo em estudo. A eletroforese das amostras após RAPD-PCR mostra, também, que não existem diferenças nos no perfil de bandas de DNA, no tempo 0, entre o controlo e amostra, no entanto verificam-se alterações no perfil de bandas de DNA, no tempo 24, entre o controlo e amostra. Palavras-chaves: radiação ultravioleta; viabilidade celular; alterações no DNA; Saccharomyces cerevisiaeThe ionizing radiation has enough energy to remove the valence electrons from an atom. Alpha, beta, x-ray, gamma rays and ultraviolet high-spectrum energies are all types of ionizing radiation. This radiation can cause deoxyribonucleic acid (DNA) damage directly and indirectly. In the direct path, the charged particles directly cause DNA damage; in the indirect pathway, radiation ionizes other molecules, and these cause cell damage. Ultraviolet radiation (UV) is divided into three categories: UVA (320-400nm), UVB (280-320nm) and UVC (100-280nm). UVC is completely absorbed by the ozone layer, but it is the one that causes the greater cellular damages. The yeast Saccharomyces cerevisae is a unicellular eukaryotic microorganism widely used as a study model because its characteristics are well studied. The main objective of this work is to evaluate the effects of UV radiation on the biological model – S. cerevisiae. Cultures of S. cerevisiae were irradiated with UV light (264nm and 365nm), the optical densities of each culture were measured at certain time intervals (1 hour, 3 hours, 6 hours and 24 hours), and the cell viability of each culture was monitored by the drop method. The Random Amplification of Polymorphic DNA – Polymerase Chain Reaction (RAPD-PCR) technique followed by an agarose gel electrophoresis was performed for the samples collected at the time intervals abovementioned. The results show that optical densities and cell viability do not present statistically significant differences, suggesting that UV radiation may not affect the growth and cellular viability of the studied model. After RAPD-PCR, electrophoresis of the samples also shows that there are no differences in the profile of DNA bands at time 0 hours, between the control and the samples. However, changes were verified in the profile of DNA bands at time 24 hours, between the control and samples.Vieira, MónicaRepositório Científico do Instituto Politécnico do PortoVilaça, Joana Daniela Neto2020-01-24T16:58:16Z2019-032019-03-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.22/15381TID:202367916porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-03-13T12:59:19Zoai:recipp.ipp.pt:10400.22/15381Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T17:35:06.438821Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
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