Clonagem e expressão da glicoproteína transmembrana do retrovírus HTLV-1 em células de mamíferos

• Autor(a) principal: Penteado,Flora Cristina Lobo
• Data de Publicação: 2006
• Outros Autores: Medeiros,Luciene, Orellana,Maristela Delgado, Palma,Patricia, Fontes,Aparecida Maria, Takayanagui,Osvaldo Massaiti, Covas,Dimas Tadeu
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: por
• Título da fonte: Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical
• Texto Completo: http://old.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0037-86822006000200007
• topic: Glicoproteína transmembrana; HTLV-1; Clonagem; Expressão de proteínas

O retrovírus linfotrópico de células T humanas tipo 1 é o agente etiológico da leucemia das células T do adulto e da paraparesia espástica tropical/mielopatia associada ao HTLV-1. O genoma proviral é composto por 9.032 pares de bases, contendo genes estruturais e regulatórios. A glicoproteína transmembrana gp 21 é codificada pelo gene estrutural env. O desenvolvimento de metodologias para a expressão heteróloga de proteínas, assim como a obtenção de uma linhagem celular que expresse a gp 21 recombinante constitutivamente são os principais objetivos do trabalho. O fragmento codificante da gp 21 foi amplificado por Nested-PCR e clonado no vetor pCR2.1-TOPO. Posteriormente, foi realizada a subclonagem no vetor de expressão pcDNA3.1+. A transfecção da linhagem celular de mamíferos HEK 293 foi realizada de maneira transitória e permanente. A produção da gp 21 recombinante foi confirmada por citometria de fluxo e a linhagem celular produtora será utilizada em ensaios de imunogenicidade.