Determinação de aminas biogênicas em amostras de alimentos utilizando a eletroforese capilar
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Data de Publicação: | 2019 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Título da fonte: | Repositório Institucional da UFSCAR |
Texto Completo: | https://repositorio.ufscar.br/handle/ufscar/12039 |
Resumo: | Food safety issues usually relate several quality indicators, such as biogenic amines (BAs). These BAs are produced by all living organisms, possess biological activity and may be present in a variety of foods and beverages. Brazilian legislation only established maximum levels for histamine in the muscle of some fresh fish species. The development of analytical methodologies for determination of biogenic amines in foods is relevant because of their toxicological effect for consumers. The present work developed a new analytical method for separation and quantification of BAs (putrescine, cadaverine, tyramine, histamine, tryptamine and benzylamine as internal standard) in foods, using capillary electrophoresis as analytical technique. Although derivatization of amines with dansyl chloride (DNS-Cl) has been widely used for other separation techniques, there are no reports in the literature on the use of DNS-Cl for capillary electrophoresis. The main advantages of the proposed method were the simplicity of the derivatization procedure (5 min at room temperature) and rapid analysis (less than 11 min). BA-DNS adducts (with maximum absorbance at 214 nm) were separated using a voltage of 18 kV and a temperature of 23 °C. A solution of phosphoric acid 120 mmol L-1 containing 5% v/v of acetonitrile pH 2.50 adjusted with triethylamine was used as running electrolyte. Samples were injected using the hydrodynamic mode (25 mBar × 6 s). The analytical curve was linear over the range of 1.0 to 10.0 mg L-1 for each amine (R ≥ 0.997). Repeatability and intermediate precision ranged from 0.9 to 9.9 % and 5.5 and 14.9 %, respectively. The method presented satisfactory values for limit of detection (42 - 417 μg L-1) and limit of quantification (141 - 1,389 μg L-1) without preconcentration process; limit of detection ranged for 7 to 45 μg L-1 and limit of quantification ranged for 25 to 145 μg L-1 with preconcentration process. The developed method was successfully applied for evaluating foods degradation and for quantitative determination in yoghurt and white cheese samples. |
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The development of analytical methodologies for determination of biogenic amines in foods is relevant because of their toxicological effect for consumers. The present work developed a new analytical method for separation and quantification of BAs (putrescine, cadaverine, tyramine, histamine, tryptamine and benzylamine as internal standard) in foods, using capillary electrophoresis as analytical technique. Although derivatization of amines with dansyl chloride (DNS-Cl) has been widely used for other separation techniques, there are no reports in the literature on the use of DNS-Cl for capillary electrophoresis. The main advantages of the proposed method were the simplicity of the derivatization procedure (5 min at room temperature) and rapid analysis (less than 11 min). BA-DNS adducts (with maximum absorbance at 214 nm) were separated using a voltage of 18 kV and a temperature of 23 °C. A solution of phosphoric acid 120 mmol L-1 containing 5% v/v of acetonitrile pH 2.50 adjusted with triethylamine was used as running electrolyte. Samples were injected using the hydrodynamic mode (25 mBar × 6 s). The analytical curve was linear over the range of 1.0 to 10.0 mg L-1 for each amine (R ≥ 0.997). Repeatability and intermediate precision ranged from 0.9 to 9.9 % and 5.5 and 14.9 %, respectively. The method presented satisfactory values for limit of detection (42 - 417 μg L-1) and limit of quantification (141 - 1,389 μg L-1) without preconcentration process; limit of detection ranged for 7 to 45 μg L-1 and limit of quantification ranged for 25 to 145 μg L-1 with preconcentration process. The developed method was successfully applied for evaluating foods degradation and for quantitative determination in yoghurt and white cheese samples.Considerando questões de segurança alimentar, existem diversos indicadores da qualidade dos alimentos, como as aminas biogênicas (do inglês biogenic amines, BAs). As BAs são produzidas por todos os organismos vivos, possuem atividade biológica e podem estar presentes em diversos alimentos e bebidas. A legislação brasileira apenas estabelece limites máximos para a histamina no músculo de algumas espécies de peixes frescos. O desenvolvimento de metodologias de análise para a determinação das aminas biogênicas em alimentos é importante devido ao seu efeito toxicológico para os consumidores. O presente trabalho desenvolveu um novo método analítico para a separação e quantificação de BAs (putrescina, cadaverina, tiramina, histamina, triptamina e benzilamina como padrão interno) em alimentos utilizando a eletroforese capilar como técnica analítica. Cabe mencionar que a derivatização das aminas com cloreto de dansila (do inglês dansyl chloride, DNS-Cl) é amplamente empregada com outras técnicas de separação, entretanto, essa é a primeira vez que o DNS foi utilizado com eletroforese capilar. As principais vantagens foram a simplicidade do procedimento de derivatização (5 min em temperatura ambiente) e rapidez nas análises (menos de 11 min). Os adutos BA-DNS (com absorbância máxima em 214 nm) foram separados utilizando uma tensão de 18 kV e temperatura de 23 °C. Foi utilizado como eletrólito de corrida uma solução de ácido fosfórico 120 mmol L-1 contendo 5 % v/v de acetonitrila pH 2,50 ajustado com trietilamina. As amostras foram injetadas utilizando o modo hidrodinâmico (25 mBar × 6 s). A curva analítica foi linear no intervalo de 1,0 a 10,0 mg L-1 para cada amina (R ≥ 0,997). A repetibilidade e a precisão intermediária variaram de 0,9 a 9,9 % e 5,5 e 14,9 %, respectivamente. O método apresentou valores satisfatórios de limite de detecção (42 - 417 µg L-1) e limite de quantificação (141 - 1.389 µg L-1) sem processo de pré-concentração; o limite de detecção variou de 7 a 45 µg L-1 e o limite de quantificação variou de 25 a 145 µg L-1 com processo de pré-concentração. O método desenvolvido foi aplicado com sucesso para uma avaliação qualitativa em um teste de degradação e para determinação quantitativa em amostras de iogurte e queijo fresco.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)porUniversidade Federal de São CarlosCâmpus SorocabaPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia e Monitoramento Ambiental - PPGBMA-SoUFSCarAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessAminas biogênicas.Alimentos.Eletroforese capilar.Biogenic amines.Foods.Capillary electrophoresis.CIENCIAS AGRARIAS::CIENCIA E TECNOLOGIA DE ALIMENTOS::CIENCIA DE ALIMENTOS::AVALIACAO E CONTROLE DE QUALIDADE DE ALIMENTOSCIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICACIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICA::QUIMICA ANALITICA::SEPARACAOCIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICA::QUIMICA ANALITICADeterminação de aminas biogênicas em amostras de alimentos utilizando a eletroforese capilarDETERMINATION OF BIOGENIC AMINES IN FOOD SAMPLES USING CAPILLARY ELECTROPHORESISinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis600600fd03e05b-e1e8-44cc-82e5-5a90b3fa5a64reponame:Repositório Institucional da UFSCARinstname:Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR)instacron:UFSCARORIGINALDissertação final.pdfDissertação final.pdfapplication/pdf1505773https://repositorio.ufscar.br/bitstream/ufscar/12039/1/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20final.pdf0a2262eed1d3a0f0bf2e28e11d6057daMD51Carta comprovante.pdfCarta comprovante.pdfCarta comprovanteapplication/pdf616781https://repositorio.ufscar.br/bitstream/ufscar/12039/3/Carta%20comprovante.pdffb358b71955c899e48e9f6a15526d775MD53CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8811https://repositorio.ufscar.br/bitstream/ufscar/12039/4/license_rdfe39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34MD54TEXTDissertação final.pdf.txtDissertação final.pdf.txtExtracted texttext/plain151043https://repositorio.ufscar.br/bitstream/ufscar/12039/5/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20final.pdf.txt2c9dd3be4e2371f79de403afd897d1ccMD55Carta comprovante.pdf.txtCarta comprovante.pdf.txtExtracted texttext/plain1https://repositorio.ufscar.br/bitstream/ufscar/12039/7/Carta%20comprovante.pdf.txt68b329da9893e34099c7d8ad5cb9c940MD57THUMBNAILDissertação final.pdf.jpgDissertação final.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg6601https://repositorio.ufscar.br/bitstream/ufscar/12039/6/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20final.pdf.jpg3bd1cdc126b461829bf621ac431edc00MD56Carta comprovante.pdf.jpgCarta comprovante.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg10778https://repositorio.ufscar.br/bitstream/ufscar/12039/8/Carta%20comprovante.pdf.jpg74901e5a51db7df92b37752337bdd681MD58ufscar/120392023-09-18 18:31:46.404oai:repositorio.ufscar.br:ufscar/12039Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufscar.br/oai/requestopendoar:43222023-09-18T18:31:46Repositório Institucional da UFSCAR - Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR)false |
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Food safety issues usually relate several quality indicators, such as biogenic amines (BAs). These BAs are produced by all living organisms, possess biological activity and may be present in a variety of foods and beverages. Brazilian legislation only established maximum levels for histamine in the muscle of some fresh fish species. The development of analytical methodologies for determination of biogenic amines in foods is relevant because of their toxicological effect for consumers. The present work developed a new analytical method for separation and quantification of BAs (putrescine, cadaverine, tyramine, histamine, tryptamine and benzylamine as internal standard) in foods, using capillary electrophoresis as analytical technique. Although derivatization of amines with dansyl chloride (DNS-Cl) has been widely used for other separation techniques, there are no reports in the literature on the use of DNS-Cl for capillary electrophoresis. The main advantages of the proposed method were the simplicity of the derivatization procedure (5 min at room temperature) and rapid analysis (less than 11 min). BA-DNS adducts (with maximum absorbance at 214 nm) were separated using a voltage of 18 kV and a temperature of 23 °C. A solution of phosphoric acid 120 mmol L-1 containing 5% v/v of acetonitrile pH 2.50 adjusted with triethylamine was used as running electrolyte. Samples were injected using the hydrodynamic mode (25 mBar × 6 s). The analytical curve was linear over the range of 1.0 to 10.0 mg L-1 for each amine (R ≥ 0.997). Repeatability and intermediate precision ranged from 0.9 to 9.9 % and 5.5 and 14.9 %, respectively. The method presented satisfactory values for limit of detection (42 - 417 μg L-1) and limit of quantification (141 - 1,389 μg L-1) without preconcentration process; limit of detection ranged for 7 to 45 μg L-1 and limit of quantification ranged for 25 to 145 μg L-1 with preconcentration process. The developed method was successfully applied for evaluating foods degradation and for quantitative determination in yoghurt and white cheese samples. |
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