Avaliação química e biológica do extrato bruto do fungo endofítico Phomopsis sp

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Garcia, Armando da Costa
Data de Publicação: 2017
Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/0116956227094387
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM
Texto Completo: http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6219
Resumo: Fungos endofíticos são fungos que vivem no tecido interno das plantas sem que lhes causem prejuízo imediato. Esses microrganismos são considerados uma fonte importante para a produção de metabólitos secundários com ação antimicrobiana, antitumoral, entre outras. Este trabalho descreve o estudo químico e biológico dos metabólitos secundários produzidos pelo fungo endofítico Phomopsis sp. isolado da planta Passovia stelis. Para tanto, o fungo em questão foi cultivado em escala ampliada, utilizando meio líquido de batata dextrose. O caldo obtido foi extraído com acetato de etila fornecendo o extrato bruto. Este foi submetido à ensaio larvicida, frente as larvas do mosquito Aedes aegypti, antimicrobiano frente às bactérias patogênicas Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa. Também foram realizados ensaios anticolinesterase, antioxidante e antifúngico frente aos fungos Cladosporium cladosporioides e Cladosporium sphaerospermum. No ensaio larvicida de dose, o extrato do fungo Phomopsis sp. exibiu bioatividade com valores de DL50 de 84,7; 81,6 e 79,5 ppm e DL90 de 147,8; 140,2 e 137,7 ppm respectivamente, nas leituras realizadas após 24, 48 e 72 h. No ensaio larvicida seletivo, três frações obtiveram bioatividade em 100 ppm nas primeiras 24 horas. Após análise por CCD, CLAE e RMN, o extrato bruto foi fracionado por cromatografia em coluna e por CLAE-DAD. Da fração F4 foi isolado o ácido 3-nitropropiônico que é muito utilizado em pesquisas neurológicas. Da fração F7 foi isolado o ácido succínico tido como um dos principais blocos de construção na indústria da síntese química. Outras três substâncias da classe dos ésteres, derivados do tirosol foram isolados da fração F1 sendo uma delas inédita. No ensaio antioxidante duas frações (F5, F6) deram resultado positivo e no ensaio anticolinesterásico quatro frações (F2, F5, F6, F7) mostraram atividade. Estes resultados mostraram a expressiva biopotência do fungo Phomopsis sp, abrindo novas perspectivas atrativas para estudos futuros.
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Este foi submetido à ensaio larvicida, frente as larvas do mosquito Aedes aegypti, antimicrobiano frente às bactérias patogênicas Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa. Também foram realizados ensaios anticolinesterase, antioxidante e antifúngico frente aos fungos Cladosporium cladosporioides e Cladosporium sphaerospermum. No ensaio larvicida de dose, o extrato do fungo Phomopsis sp. exibiu bioatividade com valores de DL50 de 84,7; 81,6 e 79,5 ppm e DL90 de 147,8; 140,2 e 137,7 ppm respectivamente, nas leituras realizadas após 24, 48 e 72 h. No ensaio larvicida seletivo, três frações obtiveram bioatividade em 100 ppm nas primeiras 24 horas. Após análise por CCD, CLAE e RMN, o extrato bruto foi fracionado por cromatografia em coluna e por CLAE-DAD. Da fração F4 foi isolado o ácido 3-nitropropiônico que é muito utilizado em pesquisas neurológicas. Da fração F7 foi isolado o ácido succínico tido como um dos principais blocos de construção na indústria da síntese química. Outras três substâncias da classe dos ésteres, derivados do tirosol foram isolados da fração F1 sendo uma delas inédita. No ensaio antioxidante duas frações (F5, F6) deram resultado positivo e no ensaio anticolinesterásico quatro frações (F2, F5, F6, F7) mostraram atividade. Estes resultados mostraram a expressiva biopotência do fungo Phomopsis sp, abrindo novas perspectivas atrativas para estudos futuros.Endophytic fungi are microorganisms that live in interne tissues of plants, without causing them immediate damage. They are considered an important source to the production of secondary metabolites with antimicrobial, antitumor activities, among others. The present work describes the chemical and biological study of the secondary metabolites produced by the endophytic fungus Phomopsis sp. isolated from the plant Passovia stelis. For that, the fungus at hand was cultivated in large scale using the liquid medium of dextrose potato. The ethylacetat crude extract was obtained through extraction from the broth and then submitted to larvicide assay against larvae of the mosquito Aedes aegypti and antimicrobial against the pathogenic bacteria Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. It was also performed assays against the enzyme anticholinesterase, antioxidants and antifungal against Cladosporium cladosporioides e Cladosporium sphaerospermum. In the selective larvicide, 3 fractions showed bioactivity (100 ppm) in 24h. In the dosing assay larvicide, the extract of the fungus Phomopsis sp. showed bioactivity with LD50 of 84.7, 81.6 and 79.5 ppm and LD90 de 147.8, 140.2 and 137.7 ppm after 24, 48 e 72 h, respectively. The crude extract was analyzed using TLC, HPLC and NMR and then purified through column chromatography and HLPC-DAD. From F4, the 3-nitropropionic acid was isolated, which is used in neurological research. Succinic acid, which is considered one of the construction blocks in chemical synthesis industry, was isolated from the fraction F7. Other 3 esterified substances, derivatives of tyrosol, were isolated of the fraction F1, and one of them unpublished. In the antioxidant assay, two fractions (F5, F6) showed positive results and in the assay against the enzyme anticholinesterase four fraction (F2, F5, F6, F7) presented bioactivity. These results demonstrate the expressive biopotency of the fungus Phomopsis sp. and open a new perspective for further studies.FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do AmazonasUniversidade Federal do AmazonasInstituto de Ciências Exatas e Tecnologia - ItacoatiaraBrasilUFAMPrograma de Pós-graduação em Ciência e Tecnologia para Recursos AmazônicosOliveira, Camila Martins dePeríodo de Embargo: 06/03/18 - 19/01/2021http://lattes.cnpq.br/0897793846591143Maia, Paulo José de SousaHaltori, Renata TakearaGarcia, Armando da Costahttp://lattes.cnpq.br/01169562270943872018-03-06T15:39:37Z2017-12-13info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfGARCIA, Armando da Costa. Avaliação química e biológica do extrato bruto do fungo endofítico Phomopsis sp. 2017. 83 f. Dissertação (Mestrado em Ciência e Tecnologia para Recursos Amazônicos) - Universidade Federal do Amazonas, Itacoatiara, 2017.http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/6219porhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAMinstname:Universidade Federal do Amazonas (UFAM)instacron:UFAM2021-01-20T05:03:36Zoai:https://tede.ufam.edu.br/handle/:tede/6219Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://200.129.163.131:8080/PUBhttp://200.129.163.131:8080/oai/requestddbc@ufam.edu.br||ddbc@ufam.edu.bropendoar:65922021-01-20T05:03:36Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFAM - Universidade Federal do Amazonas (UFAM)false
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