Caracterização genotípica e fenotípica de amostras de Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) e com padrão chain-Like Adhesion (CLA) isoladas de crianças com e sem diarréia
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Data de Publicação: | 2012 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Scaletsky, Isabel Cristina AffonsoSpano, Liliana CruzMonfardini, Mariane VedovattiPalaci, MoisésElias Junior, Waldir Pereira2016-12-23T13:56:12Z2012-08-312016-12-23T13:56:12Z2012-04-27abstractEscherichia coli enteroagregativa (EAEC) é considerada um patógeno emergente de diarreia aguda e persistente em crianças, conhecida pela heterogeneidade de isolados. O objetivo deste estudo foi caracterizar, através de métodos genotípicos e fenotípicos, amostras de E. coli com padrão de aderência agregativo (AA), positivas ou negativas para plasmídio pAA, e de E. coli chain-like adhesion (CLA) de crianças com até doze anos de idade, com e sem diarreia, provenientes de comunidades quilombolas e de bairros de periferia do Norte do Espírito Santo, Brasil. Foram analisadas um total de 202 amostras (57 e 145 de crianças com e sem diarreia, respectivamente), sendo 189 EAEC (81 pAA+ e 108 pAA-) e 13 E. coli com padrão CLA, por: (i) PCR monoplex e multiplex para detecção de 20 genes de virulência, plasmidiais e/ou cromossômicos (aggA, aafA, agg-3A, aggR, aap, shf, agn43, astA, , pet, sen, set1A, sat, hlyA, irp2, iucA, chuA, papC, sfa, fis, e yafK) e categorizados qualitativamente conforme a frequência encontrada; (ii) Teste de formação de biofilme em superfície abiótica, em meio mínimo de Eagle modificado por Dulbecco com 0,4% de glicose, corado com safranina e cristal violeta seguido por leitura de densidade ótica para classificação em formador (forte e fraco) e não formador; (iii) Ensaio de formação de película em caldo Mueller Hinton sob agitação a 37ºC por 20 horas, e classificados em score (0, 1+, 2+, 3+). Os seguintes genes foram detectados nos isolados de EAEC: (i) fis e yafK em altíssima frequência (>80% das amostras); (ii) irp2, pet, agn43 e iucA em alta frequência (30-50% das amostras); (iii) astA e shf em moderada frequência (20-30%); (iv) aap, aggR, sat, set1A e chuA em baixa frequência (10-20%) e; (v) aafA, aggA, agg-3A, hlyA, papC e sen em baixíssima frequência (<10%). O gene sfa não foi encontrado. O gene agn43 foi estatisticamente significante entre as amostras de EAEC de crianças com diarreia (p<0,05). EAEC típica e atípica corresponderam a 16,4% e 83,6% do isolados, respectivamente, e não foram associadas à diarreia (p>0,05). Os genes aap e agn43 foram isoladamente associados aos isolados de EAEC atípica de crianças com diarreia (p<0,05). O gene chuA foi associado aos isolados de EAEC pAA- de crianças com diarreia (p<0,05). Foram produtoras de biofilme 30,7% (safranina) e 24,9% (cristal violeta) das amostras de EAEC e nenhuma das amostras com padrão CLA. Os genes aap, agg-3A, aggR e shf foram significantes entre os isolados biofilme+ (p<0,05). A formação de película foi encontrada em 72% das amostras de EAEC e em 100% das E. coli com padrão CLA. Nas amostras com padrão CLA foram detectados nove dos 20 genes pesquisados [fis (100%), pet (92,3%), iucA (76,9%), yafK (76,9%) agn43 (69,2%), chuA (7,7%), hlyA (15,4%), irp2 (23,1%) e shf (7,7%)]. Estes resultados demonstram (i) a baixa frequência de EAEC típica na população estudada, (ii) genes que codificam as adesinas AAF em baixíssima frequência, (iii) a formação de biofilme incomum nas amostras de EAEC e não associada à diarreia, (iv) altíssima frequência do gene pet nas amostras de E. coli com padrão CLA (v) E. coli com padrão CLA com características genotípicas e fenotípicas distintas da EAEC. Estes resultados confirmam a heterogeneidade genética das amostras de EAEC e sugerem subpopulações mais virulentas (EAEC agn43+, EAEC atípica aap+ e/ou agn43+ e, EAEC pAA- chuA+).TextMONFARDINI, Mariane Vedovatti. Caracterização genotípica e fenotípica de amostras de Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) e com padrão chain-Like Adhesion (CLA) isoladas de crianças com e sem diarréia. 2012. 96 f. Dissertação (Mestrado em Doenças Infecciosas) - Programa de Pós-Graduação em Doenças Infecciosas, Universidade Federal do Espírito Santo, Vitória, 2012.http://repositorio.ufes.br/handle/10/5955porUniversidade Federal do Espírito SantoMestrado em Doenças InfecciosasPrograma de Pós-Graduação em Doenças InfecciosasUFESBRCentro de Ciências da SaúdeEnteroaggregative Escherichia coli (EAEC)E. coli with chain-like adhesion pattern (CLA)Virulence genesBiofilm formationClump formationEscherichia coli enteroagregativa (EAEC)Escherichia coli com padrão chainlike adhesion (CLA)Genes de virulênciaFormação de biofilmeFormação de películaDoenças Infecciosas e Parasitárias61Caracterização genotípica e fenotípica de amostras de Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) e com padrão chain-Like Adhesion (CLA) isoladas de crianças com e sem diarréiainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal do Espírito Santo (riUfes)instname:Universidade Federal do Espírito Santo (UFES)instacron:UFESORIGINALMariane Vedovatti Monfardini.pdfapplication/pdf1961832http://repositorio.ufes.br/bitstreams/35e24d96-0a4f-4b68-95e9-5c2a9dc1a6d8/downloadaa4b3c38772fccae782d05815d51af3aMD5110/59552024-07-16 17:06:20.965oai:repositorio.ufes.br:10/5955http://repositorio.ufes.brRepositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufes.br/oai/requestopendoar:21082024-10-15T17:56:35.370509Repositório Institucional da Universidade Federal do Espírito Santo (riUfes) - Universidade Federal do Espírito Santo (UFES)false |
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