Indução e caracterização morfoanatômica de calos e suspensão celular de Eucalipto

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Caetano, Thaís Teixeira Valério
Data de Publicação: 2021
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFLA
Texto Completo: http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/49188
Resumo: Eucalyptus is a woody plant with major applicability in the timber, cellulose and paper industries and even in the pharmaceutical industry with the production of essential oils. However, eucalyptus has a high level of heterozygosity, which hinders the conventional breeding processes. Although the genetic transformation of plants is a potential technology to assist conventional techniques of genetic improvement, for perennial species, this methodology remains difficult to be adopted due to the absence of an effective regeneration system for transformed plants. In this context, one of the potential strategies used in tissue culture is somatic embryogenesis, which added to the cultivation of cell suspension, can bring benefits when applied to the culture of woody species, which includes eucalyptus. This approach brings advantages, as for instance, mass clonal propagation in a short period of time and also assist in obtaining cultivars with qualities of interest. Nevertheless, one of the difficulties faced by recalcitrant species such as eucalyptus is the low efficiency of inducing callogenesis and the low frequency of germination of embryos, making its application limited. Therefore, the goal of this work was to test the culture media MS and modified MS with its NH 4 NO 3 reduced up to 50% of its concentration, adding cytokinins (BAP, KN and 2-iP) to the culture. N6, MS and JADS media were also tested with the addition of picloram (0, 100, 200, 400 and 800 M) in order to induce embryogenic calluses and to obtain an efficient protocol for eucalyptus cell suspension and regeneration of the respective somatic embryos. The results showed that the reduction of ammonium nitrate in the culture medium did not seem to favor the induction of callus formation in E. grandis. The use of 2-iP helped in the formation of semi-friable yellow calluses, and the use of BAP favored the formation of compact yellow calluses. Calli originated from hypocotyl and leaf, that were cultivated in N6 and JADS medium showed potential for obtaining somatic embryogenesis.
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In this context, one of the potential strategies used in tissue culture is somatic embryogenesis, which added to the cultivation of cell suspension, can bring benefits when applied to the culture of woody species, which includes eucalyptus. This approach brings advantages, as for instance, mass clonal propagation in a short period of time and also assist in obtaining cultivars with qualities of interest. Nevertheless, one of the difficulties faced by recalcitrant species such as eucalyptus is the low efficiency of inducing callogenesis and the low frequency of germination of embryos, making its application limited. Therefore, the goal of this work was to test the culture media MS and modified MS with its NH 4 NO 3 reduced up to 50% of its concentration, adding cytokinins (BAP, KN and 2-iP) to the culture. N6, MS and JADS media were also tested with the addition of picloram (0, 100, 200, 400 and 800 M) in order to induce embryogenic calluses and to obtain an efficient protocol for eucalyptus cell suspension and regeneration of the respective somatic embryos. The results showed that the reduction of ammonium nitrate in the culture medium did not seem to favor the induction of callus formation in E. grandis. The use of 2-iP helped in the formation of semi-friable yellow calluses, and the use of BAP favored the formation of compact yellow calluses. Calli originated from hypocotyl and leaf, that were cultivated in N6 and JADS medium showed potential for obtaining somatic embryogenesis.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Eucalipto é uma planta lenhosa de grande aplicabilidade nas indústrias madeireira, de celulose e papel e até mesmo na indústria farmacêutica com produção de óleos essenciais. Porém, o eucalipto possui um alto nível de heterozigosidade, que dificulta os processos de melhoramento convencional. Embora a transformação genética de plantas seja uma tecnologia em potencial para auxiliar as técnicas convencionais de melhoramento genético, para espécies perenes, esta tecnologia continua difícil de ser adotada devido à ausência de um sistema efetivo de regeneração de plantas transformadas. Tendo isso em vista, uma das estratégias em potencial utilizadas da cultura de tecidos é a embriogênese somática que somada ao cultivo de suspensão celular, pode trazer benefícios quando aplicada à cultura de espécies lenhosas, como o eucalipto. Esta estratégia traz vantagens como a propagação clonal em massa em curto período e facilidade na obtenção de cultivares com as qualidades de interesse desejadas. Contudo, uma das dificuldades enfrentadas para espécies recalcitrantes como o eucalipto é a baixa eficiência de indução de calos embriogênicos e/ou a baixa frequência de germinação dos embriões, tornando sua aplicação limitada. Por isso, o objetivo desse trabalho foi testar meios de cultivo MS e MS modificado com redução de 50% da concentração de NH 4 NO 3, com a adição de citocininas (BAP, KN e 2-iP) bem como os meios básicos de cultivo N6, MS e JADS, com adição de picloram (0, 100, 200, 400 e 800 M) na indução de calos embriogênicos e obter um protocolo eficiente mediante o uso de suspensão celular de eucalipto e regeneração dos respectivos embriões somáticos. Os resultados mostraram que a redução de nitrato de amônio do meio de cultivo não pareceu favorecer a indução de formação de calos em E. grandis. A utilização de 2-iP ajudou na formação de calos amarelos semi-friáveis e a utilização de BAP favoreceu a formação de calos amarelos compactos. Os calos oriundos de hipocótilo e folha cultivados em meio N6 e JADS têm potencial para obtenção da embriogênese somática.Universidade Federal de LavrasPrograma de Pós-Graduação em Agronomia/Fisiologia VegetalUFLAbrasilDepartamento de BiologiaPaiva, Luciano VilelaSouza, Rafaeli Aparecida Vieira deSilva, Diogo Pedrosa Corrêa daStein, Vanessa CristinaCaetano, Thaís Teixeira Valério2022-02-07T16:50:11Z2022-02-07T16:50:11Z2022-02-072021-08-31info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfCAETANO, T. T. V. Indução e caracterização morfoanatômica de calos e suspensão celular de Eucalipto. 2021. 92 p. Dissertação (Mestrado em Agronomia/Fisiologia Vegetal) – Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2022.http://repositorio.ufla.br/jspui/handle/1/49188porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFLAinstname:Universidade Federal de Lavras (UFLA)instacron:UFLA2023-04-27T17:57:16Zoai:localhost:1/49188Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.ufla.br/oai/requestnivaldo@ufla.br || repositorio.biblioteca@ufla.bropendoar:2023-04-27T17:57:16Repositório Institucional da UFLA - Universidade Federal de Lavras (UFLA)false
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