Efeito dos anestésicos gerais inalatórios Sevoflurano e Isoflurano na exocitose de vesículas sinápticas em junção neuromuscular de diafragma de camundongo

• Autor(a) principal: Matheus de Castro Fonseca
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-9N8KUT
• topic: Junção neuromuscular; Isoflurano; FM1-43; Sevoflurano; Exocitose; Biologia celular

Sevoflurano e isoflurano são anestésicos inalatórios utilizados tanto para a indução quanto para a manutenção da anestesia. Apesar de serem amplamente utilizados na prática clínica, seus mecanismos sinápticos de ação não são completamente elucidados. Além disso, esses fármacos também causam relaxamento muscular esquelético durante sua utilização em procedimentos cirúrgicos. Este efeito pode estar relacionado a um efeito inibitório destes agentes na liberação de acetilcolina na região da junção neuromuscular. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi investigar e comparar os efeitos pré-sinápticos dos anestésicos sevoflurano e isoflurano na junção neuromuscular de camundongos, utilizando técnicas de microscopia óptica para visualizar a reciclagem de vesículas sinápticas. No presente trabalho, preparações neuromusculares de diafragma de camundongos foram isoladas e os aglomerados de vesículas sinápticas marcados com a sonda fluorescente FM1-43 com o objetivo de avaliar a interferência do sevoflurano e isoflurano no ciclo espontâneo ou evocado das mesmas. Sevoflurano e isoflurano (0,45, 0,6 e 0,9 mM) não alteraram a exocitose espontânea de vesículas sinápticas. Além disso, sevoflurano e isoflurano não apresentaram efeito inibitório sob o estímulo despolarizante gerado por solução concentrada de KCl, um estímulo Na+-independente. Por outro lado, sevoflurano e isoflurano mostraram significativo efeito inibitório sob os estímulos despolarizantes Na+-dependente evocados por 4AP (1mM) e veratridina (100 M), sugerindo uma ação destes anestésicos em canais para Na+. Além disso, o efeito inibitório de sevoflurano sob a desmarcação do FM1-43 induzida por 4AP foi maior do que o observado com isoflurano. A exocitose evocada por veratridina (100 M) foi inibida por tetrodotoxina (1 M TTX), porém nenhuma inibição adicional foi observada quando TTX foi usada conjuntamente com os anestésicos testados. Contudo, TTX 0,5 M concentração esta que reduz em 50% a exocitose induzida pela veratridina, com 0,45 mM de sevoflurano ou de isoflurano inibiu o estímulo despolarizante da veratridina de forma similar a inibição causada por 1M TTX, indicando que estes anestésicos podem ter como alvo canais para Na+ voltagem-dependente. Nossos resultados mostram que os anestésicos voláteis sevoflurano e isoflurano inibem a exocitose evocada por estímulos dependentes de Na+ provavelmente por atuarem em canais para Na+ sensíveis a TTX. Estes achados podem contribuir para um melhor entendimento dos efeitos neuromusculares observados durante a administração destes fármacos na anestesia geral.