Avaliação da toxicidade e eficácia de nanoemulsões contendo Anfotericina B para o tratamento da Leishmaniose Visceral

• Autor(a) principal: Delia Chaves Moreira dos Santos
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-B4SLB6
• topic: Nanoemulsões; Atividade em modelo animal; Leishmaniose visceral; Metabolômica; Anfotericina b; Efeitos tóxicos; Nanoemulsões; Leishmaniose visceral; Toxicidade; Metabolômica; Anfotericina B; Nanotecnologia

A anfotericina B (AmB), fármaco de segunda escolha para o tratamento da leishmaniose visceral (LV), possui atividades antifúngica e antiparasitária de amplo espectro. No entanto, sua formulação convencional (C-AmB), a qual a AmB está associada ao desoxicolato de sódio, apresenta elevada toxicidade. Várias reações adversas estão associadas ao uso desta formulação, sendo a nefrotoxicidade e anemia as maiores limitações ao tratamento. Formulações lipídicas, como as nanoemulsões (NE), constituem uma alternativa interessante para contornar tais obstáculos. Assim sendo, este trabalho teve como objetivo otimizar, caracterizar, avaliar os efeitos tóxicos in vitro e in vivo e a atividade de NE contendo AmB (NE-AmB) em camundongos BALB/c experimentalmente infectados com Leishmania (Leishmania) infantum chagasi. A NE foi caracterizada pelo tamanho, índice de polidispersão (IP) e eficiência de encapsulação do fármaco (EE). A atividade hemolítica in vitro induzida pelas formulações de AmB foi avaliada pelo contato de células sanguíneas vermelhas. Os estudos de atividade em modelo murino de LV, a C-AmB e NE-AmB (1 ou 2 mg/kg/dia) foram administradas, por via intravenosa, em 5 dias alternados. Os estudos de toxicidade in vivo foram conduzidos em camundongos sadios, utilizando AmB (1 mg/kg) em 3 dias alternados. Análises bioquímicas (uréia nitrogenada (BUN) e creatinina) e histopatológicas foram realizadas, além das análises metabolômicas do plasma em 3 diferentes técnicas analíticas acopladas a espectrometria de massas (MS). Após aumentos gradativos na pressão no homogeneizador de alta pressão (HAP), a NE apresentou diâmetro dos glóbulos (~140 nm) e valores de IP < 0.2, inferiores aos obtidos anteriormente e EE próximo a 100%. A atividade hemolítica in vitro de C-AmB foi muito maior do que aquela observada para a NE-AmB. A NE-AmB e C-AMB, ambas a 1 mg/kg, reduziram significativamente a carga parasitária no fígado e baço em comparação com o controle, mas diferenças entre as duas formulações foram observadas somente quando a NE-AmB foi administrada a 2 mg/kg sem qualquer efeito agudo, ao contrário da C-AmB, a qual foi letal nessa dose. Os valores de BUN, creatinina e as análises histopatológicas não revelaram quaisquer alterações nas funções renais. Nas análises metabolômicas, observou-se que no grupo tratado com C-AmB, as vias metabólicas, como as dos ácidos graxos poliinsaturados e do ácido araquidônico, foram as mais afetadas, sugerindo que a C-AmB pode estar associada a processos inflamatórios, stress oxidativo e isquemia renal. Estes dados demonstraram que a NE-AmB apresentou menor efeitos tóxicos in vitro e in vivo e apresentou eficácia in vivo, se constituindo, portanto, numa alternativa promissora para o tratamento da LV