Detecção do Fator Corda: utilização de diferentes metodologias com e sem coloração para uma rápida identificação presuntiva do complexo Mycobacterium tuberculosis

• Autor(a) principal: Roberto Silva
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-92PLSG
• topic: Identificação de micobactérias; Fator Corda; Tuberculose; Estudo comparativo; Mycobacterium tuberculosis; Sensibilidade e especificidade; Mycobacteriaceae; Medicina tropical; Escarro/microbiologia; Crescimento e desenvolvimento; Fatores corda/análise; Tuberculose pulmonar; Coloração e rotulagem; Meios de cultura

A diferenciação rápida entre M. tuberculosis e micobactérias não tuberculosa é essencial para o tratamento adequado dos pacientes, principalmente coinfectados com o vírus da imunodeficiência humana ou pacientes com doenças respiratórias de base, tais como: fibrose cística e sequelas pulmonares prévias. A identificação por métodos básicos e moleculares pode ser usada, porém necessita de umaidentificação presuntiva primária para saber qual protocolo deverá ser seguido. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar diferentes metodologias com e sem coloração na detecção do Fator Corda para uma rápida identificação presuntiva do complexo mycobacterium tuberculosis. Esfregaços de escarro após processados e centrifugados foram corados pelo método de Ziehl-Neelsen e avaliados quanto àpresença do Fator Corda. Dois esfregaços de colônias isoladas do meio de Lowenstein Jensen foram corados em lâminas pelo método de Ziehl-Neelsen e Auramina O e visualizadas em microscópio à luz branca e fluorescente, respectivamente, e um esfregaço foi visualizado diretamente em microscópio em luz invertida sem coloração para a detecção do Fator Corda. Para a identificação das espécies foi utilizada, como padrão ouro, os testes bioquímicos básicos. Dois observadores realizaram todas as metodologias de maneira cega. Em 10/21esfregaços de escarro (47,6%) foram detectados o Fator Corda, o que correspondeu a 100% de sensibilidade e especificidade. Em 88/101 culturas de micobactérias coradas pela técnica de Zielh-Neelsen (87,1%) foram detectadas o Fator Corda, o que correspondeu a uma sensibilidade de 100%; especificidade 81,3%; valor preditivo positivo 96,6%; valor preditivo negativo 100%; acurácia de 97,0% e Kappa= 0,88 (muito boa concordância - IC95%). Pela coloração de Auramina 89/101 (88,1%) foi visualizado o Fator Corda o que correspondeu a uma sensibilidade de 100%; especificidade 75,0%; valor preditivo positivo 95,5%; valor preditivo negativo 100%; acurácia de 96,0% e Kappa = 0,83 (muito boa concordância - IC95%). Sem coloração e visualizaão direta e microscópio à luz invertida em 90/101 (89,1%) foi visualizado o Fator Corda o que correspondeu uma sensibilidade de 100%; especificidade 68,8%; valor preditivo positivo 95,5%; valor preditivo negativo 100%;acurácia de 95% e Kappa = 0,79 (boa concordância - IC95%) sem coloração com microscópio à luz invertida. A especificidade alcançou 100% quando associada à observação das características das colônias em meio de cultura. Houve alta concordância dos resultados entre os dois observadores. A detecção do Fator Corda para a identificação presuntiva do complexo mycobacterium tuberuclosis tem excelente acurácia tanto pela coloração direta do escarro, quanto em colôniaspositivas pelas metodologias de Ziehl-Neelsen, Auramina ou sem coloração, visualizada em microscópio à luz branca, fluorescente e de luz invertida, respectivamente, e pode ser utilizada para direcionar as metodologias de identificação definitiva em laboratórios de micobactérias. A metodologia sem coloração é mais rápida, mas depende de treinamento técnico efetivo. É importante ressaltar que não há trabalhos descritos na literatura que comparem metodologiasde detecção do Fator Corda, porém é necessário que outros laboratóriosdesenvolvam suas próprias experiências, para que se possa realizar novas pesquisas e comparações.