Caracterização de bacteriocina sintetizada por amostra de Shigella sonnei isolada de criança com diarreia aguda

• Autor(a) principal: Patrícia Luciana de Oliveira
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-9BQFEM
• topic: Substância antagonista; Fator de virulência; Purificação de proteína; Enterite aguda; Shigella; Bacteriocina; Microbiologia; Intestinos Doenças; Shigella sonnei; Bacteriocinas; Proteínas Purificação; Fatores de virulência; Substâncias antagonistas

Shigella é um dos agentes bacterianos mais relevantes de diarréia aguda. Bacteriocinas são proteínas ou peptídeos antimicrobianos sintetizados por diversas bactérias, inclusive Shigella, que, aparentemente, contribuem para a virulência do organismo. Desenvolvemos este estudo com o objetivo de caracterizar uma bacteriocina produzida por uma amostra de Shigella sonnei (SsP) isolada de fezes diarreicas. O espectro de atividade de SsP e a distribuição da característica expressão de antagonismo na população foram avaliados. Foram determinadas CIM, CBM e cinética de ação de C75 (extrato intracelular precipitado com 75% de (NH4)2SO4). A massa molecular da(s) bacteriocina(s) presentes em C75 foi estimada por SDS-PAGE/revelação in situ. C75 foi submetido a cromatografia e frações parcialmente purificadas foram submetidas a espectrometria de massa (MS). Observou-se espectro restrito de atividade, contra amostras diarreiogênicas e da microbiota intestinal. A habilidade antagonista estava distribuída homogeneamente na população. A equivalência entre CIM e CBM e o curto período necessário para eliminação da bactéria reveladora demonstraram a atividade bactericida de C75. Duas bandas ativas com massas moleculares de 57 e 66 kDa foram detectadas. Este dado, bem como a diversidade de tamanhos de halos de inibição e a presença de várias frações ativas em cada etapa de purificação, sugerem a síntese de mais de uma bacteriocina. O protocolo possibilitou a purificação parcial da(s) bacteriocina(s) presentes em C75, como demonstrado por MS. A sequência dos fragmentos proteicos gerados por tripsinólise das frações parcialmente purificadas não foi similar à de nenhuma substância antagonista depositada nos bancos de dados avaliados.