Avaliação da ocorrência de periodontopatógenos em sítios periodontais de pacientes com e sem doença periodontal por cultura microbiológica e por reação de polimerização em cadeia

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Márcia Almeida Lana
Data de Publicação: 2005
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/37542
Resumo: Bastonetes anaeróbios produtores de pigmento negro, Fusobacterium nucleatum, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Eikenella corrodens, Tannerella forsythensis e Treponema denticola são periodontopatógenos putativos indígenas da cavidade oral, cuja freqüência e proporção nos sítios periodontais saudáveis e com doença podem exibir diferenças regionais. O objetivo deste estudo foi avaliar, por cultura microbiológica e por PCR, a ocorrência destes microrganismos em sítios periodontais de 30 pacientes com periodontite crônica, 30 com periodontite agressiva e de 30 indivíduos com periodonto saudável. Os espécimes foram colhidos com cones de papel e transferidos para Ringer PRAS, sob fluxo de CO2. O material foi homogeneizado, introduzido em câmara anaeróbica e, após realização de diluições seriadas até 10-4, cultivado em meios seletivos e incubado a 37ºC por até 15 dias. A identificação bacteriana baseou-se em características morfocoloniais, morfotintoriais e bioquímico-fisiológicas. O restante do espécime clínico foi centrifugado e o sedimento empregado para extração de DNA pelo método do fenol-clorofórmio. Primers específicos foram utilizados para amplificação de rDNA 16S por PCR. Os resultados obtidos por cultura microbiológica mostraram associação entre P. intermedia/nigrescens, F. nucleatum e F. varium e periodontite crônica e entre P. intermedia/nigrescens e A. actinomycetemcomitans e periodontite agressiva. Os resultados de PCR indicaram que P. intermedia, P. nigrescens, Fusobacterium spp., T. forsythensis e T. denticola estavam estatisticamente associados com as formas crônica e agressiva de periodontite, enquanto E. corrodens mostrou-se associada apenas à periodontite crônica. A PCR demonstrou ser mais sensível para a detecção da maioria dos microrganismos investigados. As associações, antagônicas ou sinergísticas, observadas entre as amostras bacterianas isoladas dos pacientes com periodontite agressiva diferem daquelas detectadas em pacientes com periodontite crônica, o que reforça a importância destas associações na expressão das doenças periodontais.
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Os espécimes foram colhidos com cones de papel e transferidos para Ringer PRAS, sob fluxo de CO2. O material foi homogeneizado, introduzido em câmara anaeróbica e, após realização de diluições seriadas até 10-4, cultivado em meios seletivos e incubado a 37ºC por até 15 dias. A identificação bacteriana baseou-se em características morfocoloniais, morfotintoriais e bioquímico-fisiológicas. O restante do espécime clínico foi centrifugado e o sedimento empregado para extração de DNA pelo método do fenol-clorofórmio. Primers específicos foram utilizados para amplificação de rDNA 16S por PCR. Os resultados obtidos por cultura microbiológica mostraram associação entre P. intermedia/nigrescens, F. nucleatum e F. varium e periodontite crônica e entre P. intermedia/nigrescens e A. actinomycetemcomitans e periodontite agressiva. 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The purpose of this study was to evaluate, by employing microbiological culture and PCR, the presence of these microorganisms in periodontal sites of 30 patients with chronic periodontitis, 30 patients with aggressive periodontitis and 30 subjects with healthy periodontium. The samples were collected with paper points and transferred to Ringer PRAS solution, under CO2 flux. The material was homogenized, introduced into an anaerobic chamber and, following serial 10-fold dilutions up to 10-4, it was cultured onto selective media and incubated at 37ºC for up to 15 days. Bacterial identification was based on macroscopic, microscopic and biochemical-physiological characteristics. Also, part of the clinical specimen was centrifuged and the sediment used for DNA extraction by the phenol-chloroform method. Specific primers that targeted the 16S rDNA were employed for PCR amplification. The results of the microbiological culture have shown associations between P. intermedia/nigrescens, F. nucleatum, F. varium and chronic periodontitis, and between P. intermedia/nigrescens, A. actinomycetemcomitans and aggressive periodontitis. The PCR results have indicated that P. intermedia, P. nigrescens, Fusobacterium spp., T. forsythensis and T. denticola were statistically associated to the chronic and the aggressive forms of periodontitis, whereas E. corrodens was shown to be associated only to chronic periodontitis. PCR has been shown to be more sensitive for the detection of most of the investigated microorganisms. The antagonistic or synergistic associations observed among the bacterial samples isolated from patients with aggressive periodontitis, differ from those found in patients with chronic periodontitis, which reinforces the importance of those associations in periodontal disease expression.CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas GeraisCAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorporUniversidade Federal de Minas GeraisPrograma de Pós-Graduação em MicrobiologiaUFMGBrasilICB - DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIAMicrobiologiaDoenças PeriodontaisBactérias AnaeróbiasPlaca DentáriaPlaca subgengivalBactérias anaeróbiasDoenças periodontaisAvaliação da ocorrência de periodontopatógenos em sítios periodontais de pacientes com e sem doença periodontal por cultura microbiológica e por reação de polimerização em cadeiainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALAVALIAÇÃO DA OCORRÊNCIA DE PERIODONTOPATÓGENOS EM SÍTIOS PERIODONTAIS DE PACIENTES COM E SEM DOENÇA PERIODONTAL POR CULTURA MICROBIOLÓGICA E POR.pdfAVALIAÇÃO DA OCORRÊNCIA DE PERIODONTOPATÓGENOS EM SÍTIOS PERIODONTAIS DE PACIENTES COM E SEM DOENÇA PERIODONTAL POR CULTURA MICROBIOLÓGICA E POR.pdfapplication/pdf2573487https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/37542/7/AVALIA%c3%87%c3%83O%20DA%20OCORR%c3%8aNCIA%20DE%20PERIODONTOPAT%c3%93GENOS%20EM%20S%c3%8dTIOS%20PERIODONTAIS%20DE%20PACIENTES%20COM%20E%20SEM%20DOEN%c3%87A%20PERIODONTAL%20POR%20CULTURA%20MICROBIOL%c3%93GICA%20E%20POR.pdfc8e016ce1e3799a5c210f30d04ff0f14MD57LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82118https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/37542/8/license.txtcda590c95a0b51b4d15f60c9642ca272MD581843/375422021-08-17 12:20:40.711oai:repositorio.ufmg.br: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ório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2021-08-17T15:20:40Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false
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