Caracterização da microbiota da glândula mamária bovina saudável e com mastite subclínica e seleção de bactérias potencialmente probióticas isoladas deste ecossistema

• Autor(a) principal: Raphael Steinberg da Silva
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/37407
• topic: Mastite; Microbiota; Bactérias do ácido lático; Probióticos; Genética; Mastite Bovina; Microbiota; Probióticos

A mastite é a fonte dos maiores prejuízos à produção de leite em bovinos. Devido a importância estratégica da pecuária leiteira na produção de alimentos, o controle desta doença é vital. Objetivando atender às pressões, em nível internacional, para redução do uso de antimicrobianos, o desenvolvimento de métodos alternativos para o tratamento e prevenção da mastite devem ser implementados para substituir a atual terapia com antibióticos. Devido ao aumento do uso de probióticos para o controle de doenças, a bacterioterapia oferece uma possível estratégia para o controle da mastite. As bactérias do ácido lático (BAL) são membros da microbiota do leite, e tem uma longa história de uso seguro, produzindo efeitos benéficos à saúde do hospedeiro e, por isso, são candidatas à prospecção de probióticos para a glândula mamária. Os objetivos deste trabalho foram o de caracterizar a microbiota da glândula mamária bovina em quatro raças (Gir, Guzerá, Girolando 1/2 e Holandês) além de isolar e caracterizar BAL a partir de amostras de leite cru e swab intramamário. A microbiota da glândula mamária de 200 vacas (131 saudáveis e 69 com mastite subclínica) apresentou composição dominada por membros dos filos Firmicutes e Proteobactéria. De maneira geral, uma baixa porcentagem de OTUs foi compartilhada entre animais de raças diferentes. Nossos dados apontam que o efeito ambiental sobre a composição desta comunidade microbiana parece ser forte. A mudança na composição da microbiota com a instalação do quadro de mastite subclínica (redução da abundância de Acinetobacter e Pseudomonas e aumento de Staphylococcus) indicam que esse quadro está associado a disbiose. Com exceção da raça Holandês, que parece ter quadro de mastite subclínica caracterizado pelo aumento da abundância de Lactococcus, a abundância relativa de BAL diminuiu em animais com CCS> 200.000 cel/mL, indicando que elas podem estar relacionadas a úberes mais saudáveis. Por isso, amostras de 115 vacas foram submetidas ao isolamento de BAL. Foram obtidos 192 isolados de BAL pertencentes a 30 espécies, dos quais 82 foram selecionados para avaliação de seu potencial probiótico. De forma geral, as BAL que habitavam a glândula mamária apresentam baixa autoagregação, hidrofobicidade da superfície celular, co-agregação com patógenos, capacidade de produção de biofilme, além de incapacidade de produção de exopolissacarídeos (EPS) e forte antagonismo contra patógenos causadores de mastite, com alta produção de H2O2. Dois isolados de BAL, capazes de aderir e internalizar células epiteliais mamárias MDA-MB-231, apresentaram potencial efeito protetor contra mastite. O isolado WcoGIRO48L1* (Weissella confusa GIR48L1*) reduziu significativamente a adesão de Staphylococcus aureus ATCC 29213, adesão de Escherichia coli ATCC 25723 e produção de Tnfa. Por outro lado, o isolado LactGIRO4S8* (L. lactis GIRO4S8*) foi capaz de reduzir significativamente a adesão e invasão de S. aureus ATCC 29213 e a adesão de E. coli ATCC 25723, além de aumentar a expressão de IL8. Ambos os isolados foram capazes de reduzir a produção de IL1β. Nossos resultados, portanto, contribuem para a produção, no futuro, de novas ferramentas de diagnóstico e de bacterioterapia para mastite bovina.