Busca por novos antígenos para a produção de soro antiescorpiônico: construção de antígenos quiméricos e caracterização de proteases da peçonha de T. serrulatus

• Autor(a) principal: Anderson Oliveira do Carmo
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-9W8HEC
• topic: TsMS; Tityus serrulatus; Protease; Anti-veneno; Proteína quimera; Escorpião; TsSP; Anticorpo; Soro; Tityus serrulatus; Anticorpos; Protease; Anti-veneno; Proteína quimera recombinante; Escorpião; Genética

Acidentes causados por picadas de escorpiões representam um sério problema de saúde pública e é considerado negligenciado. O tratamento de acidentes graves e moderados envolve o uso da soroterapia. Para prover uma melhora na qualidade e na produção desse soro, vários pesquisadores estudam o uso de antígenos alternativos para a produção de soro antiescorpiônico. Desta maneira, esse trabalho buscou a produção de uma proteína quimérica recombinante, com base em três toxinas presentes na peçonha de Tityus serrulatus (TsP) para a produção de soro antiescorpiônico e a caracterização de novos componentes da peçonha com capacidade de gerar anticorpos neutralizantes. A quiméra Tsq3, constituída pelas proteínas Ts1, Ts3 e TsNTxP foi utilizada como imunógeno. Foram imunizados 4 grupos com 2 coelhas com combinações de TsQ3 e TsP. Os soros obtidos possuem a capacidade de reconhecimento mútuo aos dois antígenos, no entanto, os soros produzidos com a TsQ3 apresentaram capacidade de neutralização inferior à do soro produzido contra a TsP. Esse fato pode ser devido à ausência de outras sequências de referência ou de epítopos conformacionais das principais toxinas. Recentemente, Horta et al. (2014) demostraram a importância da utilização de hialorunidase na produção de soro antiescorpiônico. Essa informação nos incentivou a estudar sobre a importância de proteases na produção de soros neutralizantes. Com o auxílio do transcriptoma da glândula de peçonha de T. serrulatus, foi possível à identificação de 12 sequências relativas a proteases. Foram identificadas 11 proteases pertencentes à classe das metaloproteases, nomeadas de Metalloserrulases (TsMS 1-11) e uma serino protease nomeada de TsSP 1. Todas as TsMSs possuem peptídeo sinal e propeptídeo. No entanto, não foi encontrada a sequência completa da TsSP 1. Verificando-se que a atividade proteolítica dessa peçonha tem preferência por sítios compostos por aminoácidos básicos. Apesar de essas enzimas serem pouco estudadas na peçonha escorpiônica, elas podem ter um grande potencial como novo alvo para a produção de um soro antiescorpiônico mais eficaz.