Ômega-conotoxina MVIIC no trauma experimental da medula espinhal.
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFMG |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/1843/31553 |
Resumo: | O trauma medular é uma afecção comum na medicina veterinária. Ela pode acarretar graves consequências tais como déficit na função motora sensorial e autonômica para o animal acometido e pode determinar a eutanásia do mesmo. As lesões medulares causam danos no tecido nervoso por mecanismos primário e secundário. A lesão primaria e de tipo irreversível, já no mecanismo secundário um influxo exacerbado de cálcio é produzido, principalmente devido à ativação de canais para cálcio voltagem-dependentes (CCVD). Esse evento é considerado crítico na fisiopatogênia da lesão medular. A Ômega-conotoxina MVIIC obtida da purificação do veneno de Conus magus é capaz de bloquear CCVD e, assim, reduzir o influxo de cálcio. O presente estudo avaliou o efeito da aplicação intratecal da Ômega-conotoxina MVIIC nas doses 15 e 30 pmol e nos tempos 5 minutos e uma hora após o trauma medular experimental em ratos. Foram utilizados 36 ratos machos adultos, variedade Wistar, aleatoriamente divididos em seis grupos. Os animais do grupo Controle Negativo (CN) foram submetidos à laminectómica dorsal. Nos demais grupos, além da laminectómica, os animais foram submetidos ao trauma medular agudo contusivo pelo aparelho MASCIS impactor. Realizou-se aplicação intratecal de placebo nos animais dos grupos Controle Positivo (CP). Nos Grupos G3 e G5 foram aplicadas doses de 15 e 30 pmol, respectivamente, da toxina Ômega-conotoxina MVIIC, nos animais tratados 5 minutos após o trauma. Nos Grupos G4 e G6 foram aplicadas as doses de 15 e 30, respectivamente, uma hora após o trauma. Os animais foram eutanasiados 48 horas após a intervenção cirúrgica e a aplicação da toxina. Por fim, coletaram-se amostras de sangue para avaliar os efeitos secundários, e segmentos de medula espinhal, para quantificação de espécies reativas de oxigênio e peroxidação lipídica e para a avaliação da expressão gênica de fatores relacionados à apoptose por meio de técnica de qRT-PCR. Observou-se redução na produção de ERO´s no grupo tratado com 15 pmol/5 minutos após o trauma, o que sugere tendência de redução dos níveis de ERO's, o que, provavelmente, estaria relacionado à redução dos eventos patogênicos devido ao acúmulo intracelular de cálcio pelo bloqueio de CCVD. |
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Ela pode acarretar graves consequências tais como déficit na função motora sensorial e autonômica para o animal acometido e pode determinar a eutanásia do mesmo. As lesões medulares causam danos no tecido nervoso por mecanismos primário e secundário. A lesão primaria e de tipo irreversível, já no mecanismo secundário um influxo exacerbado de cálcio é produzido, principalmente devido à ativação de canais para cálcio voltagem-dependentes (CCVD). Esse evento é considerado crítico na fisiopatogênia da lesão medular. A Ômega-conotoxina MVIIC obtida da purificação do veneno de Conus magus é capaz de bloquear CCVD e, assim, reduzir o influxo de cálcio. O presente estudo avaliou o efeito da aplicação intratecal da Ômega-conotoxina MVIIC nas doses 15 e 30 pmol e nos tempos 5 minutos e uma hora após o trauma medular experimental em ratos. Foram utilizados 36 ratos machos adultos, variedade Wistar, aleatoriamente divididos em seis grupos. Os animais do grupo Controle Negativo (CN) foram submetidos à laminectómica dorsal. Nos demais grupos, além da laminectómica, os animais foram submetidos ao trauma medular agudo contusivo pelo aparelho MASCIS impactor. Realizou-se aplicação intratecal de placebo nos animais dos grupos Controle Positivo (CP). Nos Grupos G3 e G5 foram aplicadas doses de 15 e 30 pmol, respectivamente, da toxina Ômega-conotoxina MVIIC, nos animais tratados 5 minutos após o trauma. Nos Grupos G4 e G6 foram aplicadas as doses de 15 e 30, respectivamente, uma hora após o trauma. Os animais foram eutanasiados 48 horas após a intervenção cirúrgica e a aplicação da toxina. Por fim, coletaram-se amostras de sangue para avaliar os efeitos secundários, e segmentos de medula espinhal, para quantificação de espécies reativas de oxigênio e peroxidação lipídica e para a avaliação da expressão gênica de fatores relacionados à apoptose por meio de técnica de qRT-PCR. Observou-se redução na produção de ERO´s no grupo tratado com 15 pmol/5 minutos após o trauma, o que sugere tendência de redução dos níveis de ERO's, o que, provavelmente, estaria relacionado à redução dos eventos patogênicos devido ao acúmulo intracelular de cálcio pelo bloqueio de CCVD.Spinal cord trauma is a common condition in veterinary medicine. It can lead to serious consequences such as deficits in sensory and autonomic motor function for the affected animal and can determine the euthanasia of the affected animal. Marrow lesions cause damage to nerve tissue by primary and secondary mechanisms. The primary and irreversible lesion, already in the secondary mechanism an exacerbated influx of calcium is produced, mainly due to the activation of voltage-dependent calcium channels (CCVD). This event is considered critical in the pathophysiology of spinal cord injury. The Omega-conotoxin MVIIC obtained from the purification of the venom of Conus magus is able to block CCVD and thus reduce the influx of calcium. The present study evaluated the effect of intrathecal application of omega-conotoxin MVIIC at doses 15 and 30 pmol and at the times 5 minutes and one hour after the experimental bone marrow trauma in rats. Thirty - six adult male Wistar rats were randomly divided into six groups. The animals of the Negative Control (CN) group were submitted to dorsal laminectomy. In the other groups, in addition to laminectomy, the animals were submitted to acute medullary trauma by the device MASCIS impactor. Intrathecal application of placebo was performed in the animals of the Positive Control (CP) groups. In Groups G3 and G5 doses of 15 and 30 pmol, respectively, of the Omega-conotoxin toxin MVIIC, were applied in the treated animals 5 minutes after the trauma. In Groups G4 and G6 doses of 15 and 30, respectively, were applied one hour after the trauma. The animals were euthanized 48 hours after the surgical intervention and the application of the toxin. Finally, blood samples were collected to evaluate the side effects and spinal cord segments for the quantification of reactive oxygen species and lipid peroxidation and for the evaluation of the gene expression of factors related to apoptosis by means of the qRTPCR. There was a reduction in ROS production in the treated group at 15 pmol / 5 minutes post trauma, suggesting a tendency to reduce ROS levels, which would probably be related to the reduction of the pathogenic events due to the intracellular accumulation of calcium by blocking CCVD.CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas GeraisCAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorporUniversidade Federal de Minas GeraisPrograma de Pós-Graduação em Ciência AnimalUFMGBrasilVET - DEPARTAMENTO DE CLÍNICA E CIRURGIAPrograma Institucional de Internacionalização – CAPES - PrIntTrauma medularTrauma MedularNeuroproteçãoÔmega-conotoxina MVIICCálcioApoptosePeroxidação LipídicaEspécies Reativas de OxigênioÔmega-conotoxina MVIIC no trauma experimental da medula espinhal.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALDISSERTAÇÃO SEBASTIAN 2017.pdfDISSERTAÇÃO SEBASTIAN 2017.pdfapplication/pdf1966619https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/31553/1/DISSERTA%c3%87%c3%83O%20SEBASTIAN%202017.pdff40df95119a3b0fa62d72886cc8d5569MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82119https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/31553/2/license.txt34badce4be7e31e3adb4575ae96af679MD52TEXTDISSERTAÇÃO SEBASTIAN 2017.pdf.txtDISSERTAÇÃO SEBASTIAN 2017.pdf.txtExtracted texttext/plain158421https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/31553/3/DISSERTA%c3%87%c3%83O%20SEBASTIAN%202017.pdf.txt2b3d7586b1b944f5e8564dfc866503e1MD531843/315532019-12-14 03:31:00.458oai:repositorio.ufmg.br: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Repositório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2019-12-14T06:31Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false |
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O trauma medular é uma afecção comum na medicina veterinária. Ela pode acarretar graves consequências tais como déficit na função motora sensorial e autonômica para o animal acometido e pode determinar a eutanásia do mesmo. As lesões medulares causam danos no tecido nervoso por mecanismos primário e secundário. A lesão primaria e de tipo irreversível, já no mecanismo secundário um influxo exacerbado de cálcio é produzido, principalmente devido à ativação de canais para cálcio voltagem-dependentes (CCVD). Esse evento é considerado crítico na fisiopatogênia da lesão medular. A Ômega-conotoxina MVIIC obtida da purificação do veneno de Conus magus é capaz de bloquear CCVD e, assim, reduzir o influxo de cálcio. O presente estudo avaliou o efeito da aplicação intratecal da Ômega-conotoxina MVIIC nas doses 15 e 30 pmol e nos tempos 5 minutos e uma hora após o trauma medular experimental em ratos. Foram utilizados 36 ratos machos adultos, variedade Wistar, aleatoriamente divididos em seis grupos. Os animais do grupo Controle Negativo (CN) foram submetidos à laminectómica dorsal. Nos demais grupos, além da laminectómica, os animais foram submetidos ao trauma medular agudo contusivo pelo aparelho MASCIS impactor. Realizou-se aplicação intratecal de placebo nos animais dos grupos Controle Positivo (CP). Nos Grupos G3 e G5 foram aplicadas doses de 15 e 30 pmol, respectivamente, da toxina Ômega-conotoxina MVIIC, nos animais tratados 5 minutos após o trauma. Nos Grupos G4 e G6 foram aplicadas as doses de 15 e 30, respectivamente, uma hora após o trauma. Os animais foram eutanasiados 48 horas após a intervenção cirúrgica e a aplicação da toxina. Por fim, coletaram-se amostras de sangue para avaliar os efeitos secundários, e segmentos de medula espinhal, para quantificação de espécies reativas de oxigênio e peroxidação lipídica e para a avaliação da expressão gênica de fatores relacionados à apoptose por meio de técnica de qRT-PCR. Observou-se redução na produção de ERO´s no grupo tratado com 15 pmol/5 minutos após o trauma, o que sugere tendência de redução dos níveis de ERO's, o que, provavelmente, estaria relacionado à redução dos eventos patogênicos devido ao acúmulo intracelular de cálcio pelo bloqueio de CCVD. |
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