Efeitos imunomodulatório e neuroprotetor da aplicação de células tronco mesenquimais alogênicas criopreservadas em ratos com trauma experimental de medula espinhal
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Data de Publicação: | 2015 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFMG |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/1843/BUBD-A7PMKF |
Resumo: | Objetivou-se avaliar os efeitos imunomodulatório e neuroprotetor da aplicação de células tronco mesenquimais (CTM) alógenas e criopreservadas no trauma experimental de medula espinhal. Foram utilizados Rattus norvegicus, Lewis, eGFP para isolamento das CTM, e Wistar para estudo do trauma de medula espinhal. Avaliou-se três grupos experimentais: controle negativo (CN), controle positivo (CP) e CTM, em cinco tempos de avaliação: 24, 48, 72 horas e oito e 21 dias após a cirurgia. Avaliou-se a função motora dos animais pelo teste BBB. Realizou-se histopatologia e imunoistoquímica para quantificar infiltrado inflamatório (CD68), integridade neuronal (NeuN) e ativação de astrócitos (GFAP). Quantificou-se os transcritos gênicos para IL-10, TNF-, IL-1, TGF-, BDNF, GDNF e VEGF por RT-PCR em tempo real. Quando comparado ao grupo CP, o grupo CTM apresentou maiores escores nas avaliações de função motora 72 horas, 8 e 21 dias após trauma, e menor expressão de CD68 aos 8 dias e de GFAP aos 21 dias. Observou-se menor degeneração da substância branca e maior expressão de NeuN no grupo CTM aos 21 dias. A expressão de IL-10 foi maior no grupo CTM às 24 horas, de GDNF 48 horas e 8 dias e de VEGF aos 21 dias. No grupo CTM houve menor expressão de TNF- aos 8 e 21 dias e de TGF- 24 horas e aos 21 dias. Não houveram diferenças na expressão de IL-1 e BDNF. A administração de CTM reduziu o infiltrado inflamatório, aumentou a quantidade de neurônios íntegros, diminuiu a degeneração da substância branca e a ativação de astrócitos após trauma de medula espinhal. Adicionalmente, as CTM aumentaram expressão de IL-10, de GDNF e de VEGF, e reduziram as de TNF e TGF-. |
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Eliane Goncalves de MeloAlfredo Miranda de GoesRogeria SerakidesIsabel Rodrigues Rosado2019-08-13T12:08:29Z2019-08-13T12:08:29Z2015-02-25http://hdl.handle.net/1843/BUBD-A7PMKFObjetivou-se avaliar os efeitos imunomodulatório e neuroprotetor da aplicação de células tronco mesenquimais (CTM) alógenas e criopreservadas no trauma experimental de medula espinhal. Foram utilizados Rattus norvegicus, Lewis, eGFP para isolamento das CTM, e Wistar para estudo do trauma de medula espinhal. Avaliou-se três grupos experimentais: controle negativo (CN), controle positivo (CP) e CTM, em cinco tempos de avaliação: 24, 48, 72 horas e oito e 21 dias após a cirurgia. Avaliou-se a função motora dos animais pelo teste BBB. Realizou-se histopatologia e imunoistoquímica para quantificar infiltrado inflamatório (CD68), integridade neuronal (NeuN) e ativação de astrócitos (GFAP). Quantificou-se os transcritos gênicos para IL-10, TNF-, IL-1, TGF-, BDNF, GDNF e VEGF por RT-PCR em tempo real. Quando comparado ao grupo CP, o grupo CTM apresentou maiores escores nas avaliações de função motora 72 horas, 8 e 21 dias após trauma, e menor expressão de CD68 aos 8 dias e de GFAP aos 21 dias. Observou-se menor degeneração da substância branca e maior expressão de NeuN no grupo CTM aos 21 dias. A expressão de IL-10 foi maior no grupo CTM às 24 horas, de GDNF 48 horas e 8 dias e de VEGF aos 21 dias. No grupo CTM houve menor expressão de TNF- aos 8 e 21 dias e de TGF- 24 horas e aos 21 dias. Não houveram diferenças na expressão de IL-1 e BDNF. A administração de CTM reduziu o infiltrado inflamatório, aumentou a quantidade de neurônios íntegros, diminuiu a degeneração da substância branca e a ativação de astrócitos após trauma de medula espinhal. Adicionalmente, as CTM aumentaram expressão de IL-10, de GDNF e de VEGF, e reduziram as de TNF e TGF-.The aim of the present study was to evaluate immunomodulatory and neuroprotective effects of cryopreserved allogenic mesenchymal stem cells (MSCs) aplication on experimental spinal cord injury. Therefore, Rattus norvegicus, Lewis, EGFP, were used for MSCs isolation, and Wistar for the spinal cord injury study. Three experimental groups were evaluated: negative control (NC), positive control (CP) and MSC, on five evaluation time: 24, 48, 72 hours and eight and 21 days after surgery. Motor function was assessed by BBB locomotor rating scale. Histopathology and immunohistochemistry were performed for measurement of inflammatory infiltration (CD68), of neuronal integrity (NeuN) and astrocyte activation (GFAP). IL-10, TNF-, IL-1, TGF-, BDNF, GDNF and VEGF gene transcripts measurement were performed by real time RT-PCR. When compared to the CP group, the MSC group showed higher motor function scores at 72 hours, 8 and 21 days, lesser CD68 expression at eight days and GFAP at 21 days. Furthermore, there was lesser white matter degeneration and higher NeuN expression in MSC group at 21 days. IL-10 expression was higher in the MSC group at 24 hours, GDNF 48 hours and 8 days and VEGF at 21 days. However it was observed in the MSC group lower TNF- expression at 8 and 21 days, and TGF- 24 hours and at 21 days. There were no differences in IL-1 and BDNF expression. The MSC administration reduced the inflammatory infiltrate, increased t neuronal integrity, decreased white matter degeneration and astrocytes activation after spinal cord injury. Additionally, the MSC increased IL-10, GDNF and VEGF expression, and the reduced TNF and TGF-.Universidade Federal de Minas GeraisUFMGRato como animal de laboratórioCélulas tronco mesenquimaisCriopreservaçãoTraumatismos da medula espinhalmesenquimaisCélulas troncoCriopreservaçãoTrauma de medula espinhalEfeitos imunomodulatório e neuroprotetor da aplicação de células tronco mesenquimais alogênicas criopreservadas em ratos com trauma experimental de medula espinhalinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALtese_versao_final_pdf__1_.pdfapplication/pdf3474761https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/BUBD-A7PMKF/1/tese_versao_final_pdf__1_.pdf321037e6118672953c24461abf8a4e77MD51TEXTtese_versao_final_pdf__1_.pdf.txttese_versao_final_pdf__1_.pdf.txtExtracted texttext/plain164747https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/BUBD-A7PMKF/2/tese_versao_final_pdf__1_.pdf.txt543e1733470534ec059ab0b819ee896fMD521843/BUBD-A7PMKF2019-11-14 22:56:00.261oai:repositorio.ufmg.br:1843/BUBD-A7PMKFRepositório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2019-11-15T01:56Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false |
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