Comparação de nested PCR e PCR em tempo real para diagnóstico de Trypanosoma caninum em pele de cães

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Sumiyoshi, Melissa Harumi
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Monografias da UFMT
Texto Completo: http://bdm.ufmt.br/handle/1/3838
Resumo: Trypanosomatidae family encompasses several species of parasites from different hosts and in 2009 a new species, Trypanosoma caninum, was isolated from the skin of a dog coinfected with Leishmania braziliensis. Since then, this parasite has been detected in overlapping areas with other trypanosomatids, such as L. infantum, T. cruzi, raising questions about the possibility of cross-reaction in serological tests and reinforcing the importance of more sensitive and specific diagnostic methods, such as molecular techniques. In this context, the present study aimed to compare two variations of polymerase chain reaction (PCR), nested PCR and real-time PCR (qPCR), in detecting T. caninum infection in skin dogs attended at the Veterinary Hospital of the Federal University of Mato Grosso (HOVET-UFMT). Skin samples from 150 dogs treated at this location were used for molecular analyses. The occurrence of infection by this trypanosomatid was 8% (12/150), regardless of the molecular method used. nPCR detected the infection in 2% (3/150) of the dogs, and qPCR in 7.3% (11/150). There was no statistically significant association observed between T. caninum infection and the variables of breed, gender, and age. However, an association was found between infection and the absence of dermatopathies, indicating a higher likelihood that the infection does not induce dermatological changes. Real-time PCR associated with the use of specific primers for T. caninum allowed a greater detection and understanding of the true occurrence of the agent in comparison to nPCR.
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spelling Comparação de nested PCR e PCR em tempo real para diagnóstico de Trypanosoma caninum em pele de cãesCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIATripanossomíaseAnálise molecularParasitologiaTrypanosomiasisMolecular analysisParasitologyTrypanosomatidae family encompasses several species of parasites from different hosts and in 2009 a new species, Trypanosoma caninum, was isolated from the skin of a dog coinfected with Leishmania braziliensis. Since then, this parasite has been detected in overlapping areas with other trypanosomatids, such as L. infantum, T. cruzi, raising questions about the possibility of cross-reaction in serological tests and reinforcing the importance of more sensitive and specific diagnostic methods, such as molecular techniques. In this context, the present study aimed to compare two variations of polymerase chain reaction (PCR), nested PCR and real-time PCR (qPCR), in detecting T. caninum infection in skin dogs attended at the Veterinary Hospital of the Federal University of Mato Grosso (HOVET-UFMT). Skin samples from 150 dogs treated at this location were used for molecular analyses. The occurrence of infection by this trypanosomatid was 8% (12/150), regardless of the molecular method used. nPCR detected the infection in 2% (3/150) of the dogs, and qPCR in 7.3% (11/150). There was no statistically significant association observed between T. caninum infection and the variables of breed, gender, and age. However, an association was found between infection and the absence of dermatopathies, indicating a higher likelihood that the infection does not induce dermatological changes. Real-time PCR associated with the use of specific primers for T. caninum allowed a greater detection and understanding of the true occurrence of the agent in comparison to nPCR.A família Trypanosomatidae abrange diversas espécies de parasitos de diferentes hospedeiros, sendo que em 2009 uma nova espécie, Trypanosoma caninum, foi isolada em pele de cão coinfectado com Leishmania braziliensis. Desde então, esse parasito tem sido detectado em áreas de sobreposição com outros tripanosomatídeos, como L. infantum, T. cruzi, levantando questionamentos sobre a possibilidade de reação cruzada em testes sorológicos e reforçando a importância de métodos diagnósticos mais sensíveis e específicos, como as técnicas moleculares. Nesse contexto, o presente estudo teve como objetivo comparar duas variações da reação em cadeia de polimerase (PCR), a nested PCR (nPCR) e a PCR em tempo real (qPCR), na detecção da infecção por T. caninum em pele de cães atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Mato Grosso (HOVET-UFMT). Foram utilizadas amostras de pele de 150 cães atendidos nesse local para a realização das análises moleculares. A ocorrência de infecção por esse tripanosomatídeo foi de 8% (12/150), independentemente do método molecular utilizado. A nPCR detectou a infecção em 2% (3/150) e a qPCR em 7,3% (11/150) dos cães. Não foi observada associação estatisticamente significativa entre a infecção por T. caninum e as variáveis raça, sexo e idade. Entretanto, houve associação entre a infecção e ausência de dermatopatias, indicando maior probabilidade de que a infecção não induza alterações dermatológicas. A qPCR associada ao uso de primers específicos para T. caninum possibilitou maior detecção e conhecimento da real ocorrência do agente em comparação à nPCR.Universidade Federal de Mato GrossoBrasilFaculdade de Medicina Veterinária (FAVET)UFMT CUC - CuiabáMedicina Veterinária - CUCAlmeida, Arleana do Bom Parto Ferreira de925.378.391-53http://lattes.cnpq.br/6594130395321223Almeida, Arleana do Bom Parto Ferreira de925.378.391-53http://lattes.cnpq.br/6594130395321223Sorte, Eveline da Cruz Boa011.650.211-88http://lattes.cnpq.br/4919664588356613Ferreira, Arlyson Sousa010.674.372-40http://lattes.cnpq.br/5918450413603728Sumiyoshi, Melissa Harumi2024-02-02T14:26:58Z2023-10-252024-02-02T14:26:58Z2023-10-17info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/datasetSUMIYOSHI, Melissa Harumi. Comparação de nested PCR e PCR em tempo real para diagnóstico de Trypanosoma caninum em pele de cães. 2023. 24 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Medicina Veterinária) - Universidade Federal de Mato Grosso, Faculdade de Medicina Veterinária, Cuiabá, 2023.http://bdm.ufmt.br/handle/1/3838porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Monografias da UFMTinstname:Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT)instacron:UFMT2024-02-08T06:01:03Zoai:localhost:1/3838Biblioteca Digital de Monografiahttps://bdm.ufmt.br/PUBhttp://200.129.241.122/oai/requestopendoar:2024-02-08T06:01:03falseBiblioteca Digital de Monografiahttps://bdm.ufmt.br/PUBhttp://200.129.241.122/oai/requestbibliotecacentral@ufmt.br||opendoar:2024-02-08T06:01:03Biblioteca Digital de Monografias da UFMT - Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT)false
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description Trypanosomatidae family encompasses several species of parasites from different hosts and in 2009 a new species, Trypanosoma caninum, was isolated from the skin of a dog coinfected with Leishmania braziliensis. Since then, this parasite has been detected in overlapping areas with other trypanosomatids, such as L. infantum, T. cruzi, raising questions about the possibility of cross-reaction in serological tests and reinforcing the importance of more sensitive and specific diagnostic methods, such as molecular techniques. In this context, the present study aimed to compare two variations of polymerase chain reaction (PCR), nested PCR and real-time PCR (qPCR), in detecting T. caninum infection in skin dogs attended at the Veterinary Hospital of the Federal University of Mato Grosso (HOVET-UFMT). Skin samples from 150 dogs treated at this location were used for molecular analyses. The occurrence of infection by this trypanosomatid was 8% (12/150), regardless of the molecular method used. nPCR detected the infection in 2% (3/150) of the dogs, and qPCR in 7.3% (11/150). There was no statistically significant association observed between T. caninum infection and the variables of breed, gender, and age. However, an association was found between infection and the absence of dermatopathies, indicating a higher likelihood that the infection does not induce dermatological changes. Real-time PCR associated with the use of specific primers for T. caninum allowed a greater detection and understanding of the true occurrence of the agent in comparison to nPCR.
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