Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2003 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFPE |
dARK ID: | ark:/64986/001300000tzg7 |
Texto Completo: | https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1844 |
Resumo: | Lipase comercial de Mucor miehei foi imobilizada em diferentes suportes, nylon, nylon-álcool polivinílico (nylon-PVA) e partículas de polisiloxano-álcool polivinílico magnetizadas (POS-PVA) e testados em relação à atividade hidrolítica. O sistema imobilizado que apresentou maior estabilidade operacional, no caso, lipase-POS-PVA foi caracterizado em relação aos parâmetros Km e Vmax aparentes, temperatura ótima e pH ótimo, usando ρ- nitrofenil palmitato como substrato. A lipase imobilizada em POS-PVA apresentou um Km aparente de 228,3μM e Vmax aparente de 36,06μmol.min-1 por miligrama de proteína, a 30oC e pH 8,0. A temperatura ótima e o pH ótimo foram respectivamente 45oC e pH = 8,0. Houve uma retenção de 69,1% de atividade após a imobilização, que permitiu o uso da enzima por um total de sete ensaios. Lipase-POS-PVA também foi empregada na síntese de ésteres. Os efeitos da razão molar ácido/álcool, da concentração de enzima imobilizada, do tamanho da cadeia carbônica dos reagentes e da estrutura do álcool sobre a formação de produto foram determinados. A síntese de butirato de butila foi maximizada para substratos contendo ácido orgânico em excesso e uma concentração de biocatalisador de 25mg/mL. A seletividade do biocatalisador em relação ao tamanho da cadeia carbônica foi diferente considerando ácidos orgânicos e álcoois. A maior concentração de produto foi obtida com ácidos orgânicos com oito e dez carbonos, enquanto que o aumento no tamanho da cadeia carbônica do álcool, de quatro para oito carbonos, provocou uma redução na síntese. O maior rendimento foi determinado para a síntese de caprilato de butila (12 carbonos). A síntese também foi influenciada pela estrutura do álcool, com a atividade máxima ocorrendo para álcool primário |
id |
UFPE_85b482954d33fab8c51f5857586b63d2 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:repositorio.ufpe.br:123456789/1844 |
network_acronym_str |
UFPE |
network_name_str |
Repositório Institucional da UFPE |
repository_id_str |
2221 |
spelling |
Maria Bruno, LauraHenrique Magalhães Melo, Eduardo 2014-06-12T15:52:45Z2014-06-12T15:52:45Z2003Maria Bruno, Laura; Henrique Magalhães Melo, Eduardo. Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres. 2003. Tese (Doutorado). Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2003.https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1844ark:/64986/001300000tzg7Lipase comercial de Mucor miehei foi imobilizada em diferentes suportes, nylon, nylon-álcool polivinílico (nylon-PVA) e partículas de polisiloxano-álcool polivinílico magnetizadas (POS-PVA) e testados em relação à atividade hidrolítica. O sistema imobilizado que apresentou maior estabilidade operacional, no caso, lipase-POS-PVA foi caracterizado em relação aos parâmetros Km e Vmax aparentes, temperatura ótima e pH ótimo, usando ρ- nitrofenil palmitato como substrato. A lipase imobilizada em POS-PVA apresentou um Km aparente de 228,3μM e Vmax aparente de 36,06μmol.min-1 por miligrama de proteína, a 30oC e pH 8,0. A temperatura ótima e o pH ótimo foram respectivamente 45oC e pH = 8,0. Houve uma retenção de 69,1% de atividade após a imobilização, que permitiu o uso da enzima por um total de sete ensaios. Lipase-POS-PVA também foi empregada na síntese de ésteres. Os efeitos da razão molar ácido/álcool, da concentração de enzima imobilizada, do tamanho da cadeia carbônica dos reagentes e da estrutura do álcool sobre a formação de produto foram determinados. A síntese de butirato de butila foi maximizada para substratos contendo ácido orgânico em excesso e uma concentração de biocatalisador de 25mg/mL. A seletividade do biocatalisador em relação ao tamanho da cadeia carbônica foi diferente considerando ácidos orgânicos e álcoois. A maior concentração de produto foi obtida com ácidos orgânicos com oito e dez carbonos, enquanto que o aumento no tamanho da cadeia carbônica do álcool, de quatro para oito carbonos, provocou uma redução na síntese. O maior rendimento foi determinado para a síntese de caprilato de butila (12 carbonos). A síntese também foi influenciada pela estrutura do álcool, com a atividade máxima ocorrendo para álcool primárioporUniversidade Federal de PernambucoAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessnylonSol-gelEsterificaçãoImobilizaçãoMucor mieheiLipaseDesenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteresinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPETHUMBNAILarquivo5049_1.pdf.jpgarquivo5049_1.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1214https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/1844/4/arquivo5049_1.pdf.jpg7cf5e5ae73cb814fb013fbffb0764ecfMD54ORIGINALarquivo5049_1.pdfapplication/pdf474256https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/1844/1/arquivo5049_1.pdf37317599cafeb878be1bf92f59e6079dMD51LICENSElicense.txttext/plain1748https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/1844/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52TEXTarquivo5049_1.pdf.txtarquivo5049_1.pdf.txtExtracted texttext/plain164590https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/1844/3/arquivo5049_1.pdf.txt0810b106eee5a699d99a7ef502d7cdb4MD53123456789/18442019-10-25 11:25:46.975oai:repositorio.ufpe.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufpe.br/oai/requestattena@ufpe.bropendoar:22212019-10-25T14:25:46Repositório Institucional da UFPE - Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)false |
dc.title.pt_BR.fl_str_mv |
Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres |
title |
Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres |
spellingShingle |
Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres Maria Bruno, Laura nylon Sol-gel Esterificação Imobilização Mucor miehei Lipase |
title_short |
Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres |
title_full |
Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres |
title_fullStr |
Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres |
title_full_unstemmed |
Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres |
title_sort |
Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres |
author |
Maria Bruno, Laura |
author_facet |
Maria Bruno, Laura |
author_role |
author |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Maria Bruno, Laura |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Henrique Magalhães Melo, Eduardo |
contributor_str_mv |
Henrique Magalhães Melo, Eduardo |
dc.subject.por.fl_str_mv |
nylon Sol-gel Esterificação Imobilização Mucor miehei Lipase |
topic |
nylon Sol-gel Esterificação Imobilização Mucor miehei Lipase |
description |
Lipase comercial de Mucor miehei foi imobilizada em diferentes suportes, nylon, nylon-álcool polivinílico (nylon-PVA) e partículas de polisiloxano-álcool polivinílico magnetizadas (POS-PVA) e testados em relação à atividade hidrolítica. O sistema imobilizado que apresentou maior estabilidade operacional, no caso, lipase-POS-PVA foi caracterizado em relação aos parâmetros Km e Vmax aparentes, temperatura ótima e pH ótimo, usando ρ- nitrofenil palmitato como substrato. A lipase imobilizada em POS-PVA apresentou um Km aparente de 228,3μM e Vmax aparente de 36,06μmol.min-1 por miligrama de proteína, a 30oC e pH 8,0. A temperatura ótima e o pH ótimo foram respectivamente 45oC e pH = 8,0. Houve uma retenção de 69,1% de atividade após a imobilização, que permitiu o uso da enzima por um total de sete ensaios. Lipase-POS-PVA também foi empregada na síntese de ésteres. Os efeitos da razão molar ácido/álcool, da concentração de enzima imobilizada, do tamanho da cadeia carbônica dos reagentes e da estrutura do álcool sobre a formação de produto foram determinados. A síntese de butirato de butila foi maximizada para substratos contendo ácido orgânico em excesso e uma concentração de biocatalisador de 25mg/mL. A seletividade do biocatalisador em relação ao tamanho da cadeia carbônica foi diferente considerando ácidos orgânicos e álcoois. A maior concentração de produto foi obtida com ácidos orgânicos com oito e dez carbonos, enquanto que o aumento no tamanho da cadeia carbônica do álcool, de quatro para oito carbonos, provocou uma redução na síntese. O maior rendimento foi determinado para a síntese de caprilato de butila (12 carbonos). A síntese também foi influenciada pela estrutura do álcool, com a atividade máxima ocorrendo para álcool primário |
publishDate |
2003 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2003 |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2014-06-12T15:52:45Z |
dc.date.available.fl_str_mv |
2014-06-12T15:52:45Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
format |
doctoralThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.citation.fl_str_mv |
Maria Bruno, Laura; Henrique Magalhães Melo, Eduardo. Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres. 2003. Tese (Doutorado). Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2003. |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1844 |
dc.identifier.dark.fl_str_mv |
ark:/64986/001300000tzg7 |
identifier_str_mv |
Maria Bruno, Laura; Henrique Magalhães Melo, Eduardo. Desenvolvimento de sistemas enzimáticos (Lipase) para aplicação na hidrólise e síntese de ésteres. 2003. Tese (Doutorado). Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2003. ark:/64986/001300000tzg7 |
url |
https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1844 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/ info:eu-repo/semantics/openAccess |
rights_invalid_str_mv |
Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/ |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de Pernambuco |
publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de Pernambuco |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da UFPE instname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE) instacron:UFPE |
instname_str |
Universidade Federal de Pernambuco (UFPE) |
instacron_str |
UFPE |
institution |
UFPE |
reponame_str |
Repositório Institucional da UFPE |
collection |
Repositório Institucional da UFPE |
bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/1844/4/arquivo5049_1.pdf.jpg https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/1844/1/arquivo5049_1.pdf https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/1844/2/license.txt https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/1844/3/arquivo5049_1.pdf.txt |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
7cf5e5ae73cb814fb013fbffb0764ecf 37317599cafeb878be1bf92f59e6079d 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 0810b106eee5a699d99a7ef502d7cdb4 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da UFPE - Universidade Federal de Pernambuco (UFPE) |
repository.mail.fl_str_mv |
attena@ufpe.br |
_version_ |
1815172920313380864 |