Investigação de genes de resistência e fatores associados a formação de biofilme em Providencia stuartii

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: SILVA, Sivoneide Maria da
Data de Publicação: 2021
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPE
Texto Completo: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/44302
Resumo: Providencia stuartii é uma espécie de Enterobacteriaceae que causa diferentes infecções devido, principalmente, a resistência intrínseca a antimicrobianos, capacidade para adquirir novos genes e formação de biofilme. Assim, este estudo investigou genes de resistência a antimicrobianos e fatores relacionados com a formação de biofilme de 28 isolados de P. stuartii obtidos de um hospital público de Recife, PE. Além disso, foram apresentadas neste estudo revisões do estado-da-arte sobre os principais mecanismos de resistência e virulência de patógenos humanos, sobretudo, P. stuartii. Inicialmente, foi confirmada a identidade taxonômica por espectrometria de massas e, foram realizados ensaios fenotípicos, seguidos de moleculares para investigar os genes de resistência aac(6')-Ib-cr e blaKPC. Além disso, foram investigadas a diversidade genética dos isolados e os genes fimH e mrkD associados a formação de biofilme. Para confirmar a formação de biofilme, foram utilizados métodos de coloração, de microscopia e adesão a hidrocarboneto. Todos os isolados analisados, foram confirmados como P. stuartii e resistentes a fluoroquinolonas sendo a maioria resistentes a betalactâmicos. Este estudo demostrou o primeiro relato no Brasil do gene aac(6')-Ib-cr, presente em 16 isolados e confirmou a disseminação do blaKPC em 14, dos quais 11 apresentaram ambos os genes. Todos os isolados formaram biofilme e se mostraram, majoritariamente, hidrofílicos. Entretanto, não apresentaram os genes fimH e mrkD, os quais são associados a formação de biofilme em enterobactérias revelando, assim, particularidades sobre a patogenicidade de P. stuartii. Os dados obtidos, tanto os experimentais quanto os de revisões, indicam que as opções para o tratamento de infecções causadas por esta espécie estão ainda mais limitas, devido ao seu potencial para aquisição de novos genes. Além disso, sugere que mecanismos ainda não conhecidos podem ser responsáveis pela formação de biofilme de P. stuartii. O presente estudo, reforça a necessidade de pesquisas adicionais para eventualmente prevenir infecções causadas por essa bactéria.
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Além disso, foram apresentadas neste estudo revisões do estado-da-arte sobre os principais mecanismos de resistência e virulência de patógenos humanos, sobretudo, P. stuartii. Inicialmente, foi confirmada a identidade taxonômica por espectrometria de massas e, foram realizados ensaios fenotípicos, seguidos de moleculares para investigar os genes de resistência aac(6')-Ib-cr e blaKPC. Além disso, foram investigadas a diversidade genética dos isolados e os genes fimH e mrkD associados a formação de biofilme. Para confirmar a formação de biofilme, foram utilizados métodos de coloração, de microscopia e adesão a hidrocarboneto. Todos os isolados analisados, foram confirmados como P. stuartii e resistentes a fluoroquinolonas sendo a maioria resistentes a betalactâmicos. Este estudo demostrou o primeiro relato no Brasil do gene aac(6')-Ib-cr, presente em 16 isolados e confirmou a disseminação do blaKPC em 14, dos quais 11 apresentaram ambos os genes. Todos os isolados formaram biofilme e se mostraram, majoritariamente, hidrofílicos. Entretanto, não apresentaram os genes fimH e mrkD, os quais são associados a formação de biofilme em enterobactérias revelando, assim, particularidades sobre a patogenicidade de P. stuartii. Os dados obtidos, tanto os experimentais quanto os de revisões, indicam que as opções para o tratamento de infecções causadas por esta espécie estão ainda mais limitas, devido ao seu potencial para aquisição de novos genes. Além disso, sugere que mecanismos ainda não conhecidos podem ser responsáveis pela formação de biofilme de P. stuartii. O presente estudo, reforça a necessidade de pesquisas adicionais para eventualmente prevenir infecções causadas por essa bactéria.CAPESProvidencia stuartii is a species of Enterobacteriaceae that causes caused mainly because of the intrinsic resistance to antimicrobials, able to acquire new genes and biofilm formation. Thus, this study investigated antimicrobial resistance genes and factors related to the biofilm formation of 28 P. stuartii grants obtained from a public hospital in Recife, PE. In addition, state-of-the-art reviews of the main mechanisms of resistance and virulence of human pathogens, especially P. stuartii, were presented in this study. Initially, the taxonomic identity was confirmed by mass spectrometry, and phenotypic, followed by molecular assays were performed to investigate the aac(6')-Ib-cr and blaKPC resistance genes. Furthermore, genetic diversity was investigated, as well as the fimH and mrkD genes associated with biofilm formation. To confirm biofilm formation, coloring, microscopy and hydrocarbon adhesion methods were used. All isolates analyzed were confirmed as P. stuartii and resistant to fluoroquinolones, the majority being resistant to beta-lactams. This study demonstrated the first report in Brazil of the aac(6')-Ib-cr gene, present in 16 isolates and confirmed the spread of blaKPC in 14, of which 11 had both genes. All isolates formed biofilm and were mostly hydrophilic. However, they did not show the fimH and mrkD genes, which are associated with biofilm formation in enterobacteria, thus revealing particularities about the pathogenicity of P. stuartii. The data obtained, both experimental and from reviews, indicate that the options for the treatment of infections caused by this species are even more limited, due to its potential for acquiring new genes. Furthermore, it suggests that mechanisms not yet known may be responsible for the formation of P. stuartii biofilm. The present study reinforces the need for additional research to eventually prevent infections caused by this bacteria.porUniversidade Federal de PernambucoPrograma de Pos Graduacao em Bioquimica e FisiologiaUFPEBrasilAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessBactériaInfecçãoAgentes antibacterianosInvestigação de genes de resistência e fatores associados a formação de biofilme em Providencia stuartiiinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisdoutoradoreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPEORIGINALTESE Sivoneide Maria da Silva.pdfTESE Sivoneide Maria da Silva.pdfapplication/pdf5330881https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/44302/1/TESE%20Sivoneide%20Maria%20da%20Silva.pdfe508232c0510ff414db3800e71284642MD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8811https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/44302/2/license_rdfe39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34MD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82142https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/44302/3/license.txt6928b9260b07fb2755249a5ca9903395MD53TEXTTESE Sivoneide Maria da Silva.pdf.txtTESE Sivoneide Maria da Silva.pdf.txtExtracted texttext/plain185116https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/44302/4/TESE%20Sivoneide%20Maria%20da%20Silva.pdf.txt9e1f4f2752511017820d1dcf4ad9f53eMD54THUMBNAILTESE Sivoneide Maria da Silva.pdf.jpgTESE Sivoneide Maria da Silva.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1327https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/44302/5/TESE%20Sivoneide%20Maria%20da%20Silva.pdf.jpgb39b33525c12fecb5e6e599400296100MD55123456789/443022022-05-07 02:14:44.924oai:repositorio.ufpe.br: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ório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufpe.br/oai/requestattena@ufpe.bropendoar:22212022-05-07T05:14:44Repositório Institucional da UFPE - Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)false
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