Caracterização biológica e genotípica de isolados de Toxoplasma gondii de suínos naturalmente infectados do Rio Grande do Sul, Brasil
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Data de Publicação: | 2014 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca |
Texto Completo: | http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/9035 |
Resumo: | O protozoário Toxoplasma gondii pode infectar ampla gama de espécies animais, inclusive o homem. Entre os animais domésticos, os suínos têm grande importância, devido ao risco de infecção humana pelo consumo de carnes cruas, mal cozidas e embutidos frescal. O objetivo do estudo foi o isolamento, caracterização biológica e genotípica de T. gondii de suínos naturalmente infectados, de criação artesanal, destinados ao consumo humano. Amostras de soros de suínos (100) de 58 propriedades rurais, de diferentes municípios do sul do Rio Grande do Sul foram testadas, através da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI ≥ 64). Dos animais amostrados, 36,0% foram soropositivos com títulos de anticorpos que variaram de 64 a 2048. Para o isolamento do parasito, bioensaios em camundongos foram realizados, utilizando-se um pool de tecidos de suínos soropositivos (coração e cérebro). Dos 36 bioensaios, 17 isolados (47,2%) foram obtidos. Destes, 41,2% (7/17) mostraram-se altamente virulentos para os camundongos inoculados, causando 100% de mortalidade. Taquizoítos foram encontrados no exsudato peritoneal, fígado e pulmão. Os demais isolados (10/17) não causaram sinais clínicos, mas foram detectados anticorpos, com títulos de 16 a 512 (RIFI ≥ 16), e cistos do parasito nos cérebros e/ou fígados dos camundongos infectados. Para a caracterização genotípica de todos os isolados (17) utilizou-se a técnica de PCRRFLP no locus 5’3’SAG2, que identifica os genótipos I, II e III. Genótipos dos Tipos I (29,4% - 5/17) e III (70,6%- 12/17) foram identificados e não houve a detecção do Tipo II. Entre os isolados caracterizados como Tipo I, quatro (80,0%) mataram os camundongos e um (20,0%) não matou nenhum animal. Apenas três isolados do Tipo III (25,0%) foram virulentos, causando a morte dos animais, o que não ocorreu com os outros, nove (75,0%). Dos 17 isolados, até o momento, cinco foram genotipados com mais marcadores, além do 5’3’SAG2 (SAG1, alt. SAG2, BTUB,GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico e CS3). Foram identificados cinco diferentes genótipos, sendo três já descritos no Brasil (Tipos III, BrII e BrIV) e dois novos genótipos. Os novos genótipos, o BrII e o BrIV foram altamente virulentos, capazes de matar 100% dos camundongos infectados. O isolado Tipo III foi avirulento e cistogênico. Utilizando-se o marcador CS3, verificou-se que os isolados que apresentaram alelos I e u-1 foram virulentos, enquanto que aqueles com o III foram apenas cistogênicos. A caracterização genotípica por PCR-RFLP com mais marcadores é mais acurada, pois possibilita a identificação de genótipos atípicos. Este estudo revela que os suínos criados artesanalmente na região podem servir de fonte de infecção humana pelo parasito, estando infectados por uma população de T. gondii diversificada quanto a características de virulência e genotípicas. |
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2023-01-27T00:02:32Z2023-01-27T00:02:32Z2014-05-22CADEMARTORI, Beatris Gonzalez. Caracterização biológica e genotípica de isolados de Toxoplasma gondii de suínos naturalmente infectados do Rio Grande do Sul, Brasil. 2014. 97f. Tese (Doutorado em Parasitologia) – Instituto de Biologia, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2014.http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/9035O protozoário Toxoplasma gondii pode infectar ampla gama de espécies animais, inclusive o homem. Entre os animais domésticos, os suínos têm grande importância, devido ao risco de infecção humana pelo consumo de carnes cruas, mal cozidas e embutidos frescal. O objetivo do estudo foi o isolamento, caracterização biológica e genotípica de T. gondii de suínos naturalmente infectados, de criação artesanal, destinados ao consumo humano. Amostras de soros de suínos (100) de 58 propriedades rurais, de diferentes municípios do sul do Rio Grande do Sul foram testadas, através da Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI ≥ 64). Dos animais amostrados, 36,0% foram soropositivos com títulos de anticorpos que variaram de 64 a 2048. Para o isolamento do parasito, bioensaios em camundongos foram realizados, utilizando-se um pool de tecidos de suínos soropositivos (coração e cérebro). Dos 36 bioensaios, 17 isolados (47,2%) foram obtidos. Destes, 41,2% (7/17) mostraram-se altamente virulentos para os camundongos inoculados, causando 100% de mortalidade. Taquizoítos foram encontrados no exsudato peritoneal, fígado e pulmão. Os demais isolados (10/17) não causaram sinais clínicos, mas foram detectados anticorpos, com títulos de 16 a 512 (RIFI ≥ 16), e cistos do parasito nos cérebros e/ou fígados dos camundongos infectados. 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Utilizando-se o marcador CS3, verificou-se que os isolados que apresentaram alelos I e u-1 foram virulentos, enquanto que aqueles com o III foram apenas cistogênicos. A caracterização genotípica por PCR-RFLP com mais marcadores é mais acurada, pois possibilita a identificação de genótipos atípicos. Este estudo revela que os suínos criados artesanalmente na região podem servir de fonte de infecção humana pelo parasito, estando infectados por uma população de T. gondii diversificada quanto a características de virulência e genotípicas.The protozoan Toxoplasma gondii can infect a wide range of animal species, including man. Among domestic animals, pigs have greater importance due to the risk of human infection by ingestion of raw or undercooked meat and handmade sausages. The aim of the study was the isolation and genotypic characterization of T. gondii from small farms pigs naturally infected, intended for human consumption. Serum samples from pigs (100) of 58 farms in different of municipalities southern Rio Grande do Sul were analyzed by indirect fluorescence antibody test (IFAT ≥ 64). 36.0% of the animals sampled were seropositive with antibody titers from 64 to 2048. To isolate the parasite, bioassays in mice were performed using a pool of seropositive pig tissues (heart and brain). From the 36 bioassays, 17 isolated (47.2%) were obtained. 41.2% of these (7/17) proved to be highly virulent to the inoculated mice, causing 100% mortality. Tachyzoites were found in peritoneal exudates, livers and lungs. The remaining isolates (10/17) did not cause clinical signs, but antibodies were detected with titers from 16 to 512 (IFAT ≥ 16), and cysts of the parasite in the brains and/or livers of the infected mice. For the genotypic characterization of all isolates (17) the PCR-RFLP technique was used in the locus 5'3'SAG2 that identifies genotypes I, II and III. Genotypes Type I (29.4% - 5/17) and III (70.6% - 12/17) were identified and there was no detection of Type II. Among the isolates characterized as Type I, four (80.0%) killed the mice and (20.0%) did not kill any animal. Only three isolates of Type III (25.0%) were virulent, causing the death of animals, which did not occur with the remaining nine (75.0%). Among 17 isolates, five were genotyped with more markers up to this moment, in addition 5'3'SAG2 (SAG1, alt. SAG2, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico e CS3). Five different genotypes were identified, three of them having already been described in Brazil (Types III, BrII and BrIV) and two being newly identified genotypes. The new genotypes, BrII and BrIV were highly virulent, able to kill 100% of the infected mice. The isolate Type III was avirulent and cystogenic. Using the marker CS3, it was found that the isolates which presented alleles I and u-1 were virulent, while those with only III were only cystogenic. Genotypic characterization by PCR-RFLP with more markers is more accurate, since it allows the identification of atypical genotypes. This study reveals that small farms pigs in the region might serve as a source of human infection by the parasite, once they are infected by a population of T. gondii which is diversified regarding virulence characteristics and genotype.Sem bolsaporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em ParasitologiaUFPelBrasilInstituto de BiologiaCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::PARASITOLOGIAParasitologiaToxoplasma gondiiSuínosGenotipagemIsolamentoCaracterização biológica e genotípica de isolados de Toxoplasma gondii de suínos naturalmente infectados do Rio Grande do Sul, BrasilBiological and genotypic characterization of isolates of Toxoplasma gondii from naturally infected pigs from Rio Grande do Sul, Brazilinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesishttp://lattes.cnpq.br/8649118341468294http://lattes.cnpq.br/1297914323669244Rocha, Andréa da Silva Ramoshttp://lattes.cnpq.br/1207655504558175Farias, Nara Amélia da RosaCademartori, Beatris Gonzalezinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTtese_beatris_gonzalez_cademartori.pdf.txttese_beatris_gonzalez_cademartori.pdf.txtExtracted texttext/plain186236http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/9035/6/tese_beatris_gonzalez_cademartori.pdf.txtc09e2f7eba5b2ed8361d515893e64b86MD56open accessTHUMBNAILtese_beatris_gonzalez_cademartori.pdf.jpgtese_beatris_gonzalez_cademartori.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1190http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/9035/7/tese_beatris_gonzalez_cademartori.pdf.jpg7534eb181cd42b1fc28d6a9e8389e314MD57open accessORIGINALtese_beatris_gonzalez_cademartori.pdftese_beatris_gonzalez_cademartori.pdfapplication/pdf3212009http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/9035/1/tese_beatris_gonzalez_cademartori.pdfadf3328cccb67629277539cc0916a6e6MD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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