Seleção de leveduras ambientais produtoras de enzimas para a síntese de fruto-oligossacarídeos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Deffert, Flávia
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/37498
Resumo: Orientador : Prof. Dr. Tania Maria Bordin Bonfim
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spelling Deffert, FláviaBonfim, Tania Maria Bordin, 1961-Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas2020-07-20T17:03:52Z2020-07-20T17:03:52Z2015https://hdl.handle.net/1884/37498Orientador : Prof. Dr. Tania Maria Bordin BonfimDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 12/02/2015Inclui bibliografiaÁrea de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: Fruto-oligossacarideos sao carboidratos que apresentam uma molecula de sacarose e uma ou mais unidades frutosil ligadas a ela. O consumo destes acucares beneficia a multiplicacao celular de micro-organismos beneficos do trato gastrointestinal auxiliando a manutencao da saude e aumento do bem-estar do hospedeiro. Os fruto-oligossacarideos podem ser produzidos pelo emprego das enzimas ƒÀ-frutofuranosidase e/ou frutosiltransferase. Estas enzimas realizam a ligacao de uma ou mais unidades de frutose a uma molecula de sacarose. Em virtude de que as leveduras, diferentemente dos outros micro-organismos, foram pouco exploradas para a producao de fruto-oligossacarideos e de que os micro-organismos ambientais estao expostos a diferentes fatores de estresse como diferencas na disponibilidade de agua e de pressao osmotica, modificando sua fisiologia para adaptar-se ao ambiente, as leveduras ambientais tornam-se um interessante objeto de estudo para a obtencao de fruto-oligossacarideos. O objetivo deste trabalho foi selecionar leveduras ambientais capazes de sintetizar fruto-oligossacarideos e identificar o seu genero e especie. Dentre as 141 leveduras ambientais avaliadas em solucao de sacarose 500 g.L-1, valor de pH inicial de 4,5}0,2, 50 oC, 150 rpm, 65 leveduras formaram o fruto-oligossacarideo 1-cestose. As leveduras foram selecionadas por cromatografia em camada delgada e o carboidrato identificado por cromatografia em fase liquida de alta eficiencia. A formacao de fruto-oligossacarideos pelas oito leveduras selecionadas foi avaliado nas temperaturas de 40 oC, 50 oC e 60 oC, nos valores de pH de 4,5; 5,5 e 6,5. Em seis horas de reacao, a levedura 225, na temperatura de 60 oC e valor de pH de 4,5, formou 23,47} 1,88 g.L-1 de 1-cestose e a levedura 222, formou 3,90 } 2,56 g.L-1 de 1-cestose e 14,89 } 0,39 g.L-1 de nistose, na temperatura de 50 oC e valor de pH 4,5. As leveduras selecionadas foram identificadas como Saccharomyces cerevisiae por meio das tecnicas de espectrometria de massa MALDI-TOF e PCR-RFLP. Palavras chave: Saccharomyces cerevisiae. 1-cestose. Nistose. MALDI-TOF. PCR-RFLP.Abstract: Fructooligosaccharides are carbohydrates that have a sucrose molecule and one or more fructosyl units linked to it. The consumption of these sugars increases multiplication of beneficial microorganisms cells in the gastrointestinal tract aiding the maintenance of health and the host's well-being. The fructooligosaccharides may be produced by the use of the â-fructofuranosidase and/or fructosyltransferase enzymes. These enzymes carry out the linkage of one or more fructose units to a sucrose molecule. Yeasts, unlike others microorganisms, were little exploited for producing fructooligosaccharides and, else, environmental micro-organisms are exposed to various stress factors such as differences in the availability of water and osmotic pressure, changing their physiology to adapt to the environment. So, wild yeasts become an interesting object of study for obtaining fructooligosaccharides. The objective of this work is to select environmental yeasts capable of synthesizing fructooligosaccharides and identify its genus and species. Of the 141 yeast environmental evaluated in sucrose solution 500 gl-1, initial pH value of 4.5 ± 0.2, 50 °C, 150 rpm, 65 yeasts formed the fructooligosaccharide 1-kestose. The yeasts were selected by thin layer chromatography and the carbohydrate was identified by high efficiency liquid chromatography. The formation of fructooligosaccharides by the eight selected yeasts was evaluated at temperatures of 40 °C, 50 °C and 60 °C at pH 4.5; 5.5 and 6.5. Within six hours of reaction, the yeast 225 formed 23.47 ± 1.88 g.L -1 of 1-kestose, at a temperature of 60 °C and pH 4.5, and yeast 222 formed 2.56 ± 3.90 g.L-1 1-kestose and 14.89 ± 0.39 g.L-1 of nystose, at temperature of 50 °C and pH value of 4.5. The selected yeasts were identified through the techniques of MALDI-TOF mass spectrometry and PCR-RFLP as Saccharomyces cerevisiae. Keywords: Saccharomyces cerevisiae. 1-kestose. Nystose. MALDI-TOF. PCR-RFLP.83 f. : il. (algumas color.), grafs., tabs. ; 31 cm.application/pdfDisponível em formato digitalFarmáciaDissertaçõesFarmáciaCiencias farmaceuticasEnzimasSacaroseFrutoseLevedurasSeleção de leveduras ambientais produtoras de enzimas para a síntese de fruto-oligossacarídeosinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessTHUMBNAILR - D - FLAVIA DEFFERT.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1216https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/37498/1/R%20-%20D%20-%20FLAVIA%20DEFFERT.pdf.jpgcf76212e2cf344eb8e4df8580d4e0ed3MD51open accessTEXTR - D - FLAVIA DEFFERT.pdf.txtExtracted Texttext/plain144771https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/37498/2/R%20-%20D%20-%20FLAVIA%20DEFFERT.pdf.txtc43b90647fcd14dae2f7810f487990f3MD52open accessORIGINALR - D - FLAVIA DEFFERT.pdfapplication/pdf1719608https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/37498/3/R%20-%20D%20-%20FLAVIA%20DEFFERT.pdf819cde21a37649b41989dbe70557d7e3MD53open access1884/374982020-07-20 14:03:52.254open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/37498Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082020-07-20T17:03:52Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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