Construction and characterization of a glycoprotein e deletion mutant of bovine herpesvirus type 1.2 strain isolated in Brazil
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Data de Publicação: | 2002 |
Outros Autores: | , , , |
Tipo de documento: | Artigo |
Idioma: | eng |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFRGS |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10183/19783 |
Resumo: | Este artigo descreve a construção e caracterização de uma amostra de um herpesvírus bovino tipo 1.2a (BoHV-1.2a) que apresenta uma deleção na região genômica que codifica a glicoproteína E (gE). A deleção gênica foi induzida através da co-transfecção de um fragmento de deleção, contendo as regiões 5´e 3´flanqueadoras da gE, com o DNA viral intacto de uma amostra viral isolada de um animal que apresentava doença respiratória. O isolamento do vírus gE negativo (gE-) foi realizado com auxílio da técnica de imunoperoxidase em que foi utilizado como anticorpo primário um anticorpo monoclonal anti-gE. O vírus gE- foi purificado e o DNA isolado desta amostra foi examinado através das técnicas de análise por enzimas de restrição e “Southern blot”. Esta amostra gE- será avaliada como candidata para compor uma vacina diferencial contra a rinotraqueíte infecciosa dos bovinos. |
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Franco, Ana ClaudiaRijsewijk, Franciscus Antonius MariaFlores, Eduardo FurtadoWeiblen, RudiRoehe, Paulo Michel2010-04-16T09:11:35Z20021517-8382http://hdl.handle.net/10183/19783000413593Este artigo descreve a construção e caracterização de uma amostra de um herpesvírus bovino tipo 1.2a (BoHV-1.2a) que apresenta uma deleção na região genômica que codifica a glicoproteína E (gE). A deleção gênica foi induzida através da co-transfecção de um fragmento de deleção, contendo as regiões 5´e 3´flanqueadoras da gE, com o DNA viral intacto de uma amostra viral isolada de um animal que apresentava doença respiratória. O isolamento do vírus gE negativo (gE-) foi realizado com auxílio da técnica de imunoperoxidase em que foi utilizado como anticorpo primário um anticorpo monoclonal anti-gE. O vírus gE- foi purificado e o DNA isolado desta amostra foi examinado através das técnicas de análise por enzimas de restrição e “Southern blot”. Esta amostra gE- será avaliada como candidata para compor uma vacina diferencial contra a rinotraqueíte infecciosa dos bovinos.This paper describes the construction and characterization of a Brazilian strain of bovine herpesvirus type 1.2a (BoHV-1.2a) with a deletion of the glycoprotein E (gE) gene. The deletion was introduced by cotransfection of a deletion fragment containing the 5´and 3´gE flanking regions and genomic DNA of wild type BoHV-1 into bovine cells. Isolation of gE deletion mutant was performed by immunoperoxidase staining with an anti-gE monoclonal antibody. Viral clones were plaque purified and further examined by restriction endonuclesase digestion and Southern blot hybridization. This gE deletion mutant will be evaluated as a vaccinal virus, in order to determine its potential use for a differential vaccine.application/pdfengBrazilian journal of microbiology. São Paulo, SP. Vol. 33, n. 3 (jul./set. 2002), p. 274-278VirologiaHerpesvírus bovinoInfectious bovine rhinotracheitisInfectious pustular vulvovaginitisBoHV-1Deletion mutantDifferential vaccineConstruction and characterization of a glycoprotein e deletion mutant of bovine herpesvirus type 1.2 strain isolated in BrazilConstrução e caracterização de uma amostra de BoHV-1.2 isolada no Brasil com uma deleção no gene da glicoproteína E info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/otherinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRGSinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)instacron:UFRGSTEXT000413593.pdf.txt000413593.pdf.txtExtracted Texttext/plain22730http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/19783/2/000413593.pdf.txtdf34910ec9db8c4670c8d35f5726bccbMD52ORIGINAL000413593.pdf000413593.pdfTexto completo (inglês)application/pdf54909http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/19783/1/000413593.pdf479e92426449e92d40a7a3608120d7b4MD51THUMBNAIL000413593.pdf.jpg000413593.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1725http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/19783/3/000413593.pdf.jpgc1ec14df965e18f0d837b7c68df792daMD5310183/197832019-01-11 04:11:04.917919oai:www.lume.ufrgs.br:10183/19783Repositório de PublicaçõesPUBhttps://lume.ufrgs.br/oai/requestopendoar:2019-01-11T06:11:04Repositório Institucional da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)false |
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Este artigo descreve a construção e caracterização de uma amostra de um herpesvírus bovino tipo 1.2a (BoHV-1.2a) que apresenta uma deleção na região genômica que codifica a glicoproteína E (gE). A deleção gênica foi induzida através da co-transfecção de um fragmento de deleção, contendo as regiões 5´e 3´flanqueadoras da gE, com o DNA viral intacto de uma amostra viral isolada de um animal que apresentava doença respiratória. O isolamento do vírus gE negativo (gE-) foi realizado com auxílio da técnica de imunoperoxidase em que foi utilizado como anticorpo primário um anticorpo monoclonal anti-gE. O vírus gE- foi purificado e o DNA isolado desta amostra foi examinado através das técnicas de análise por enzimas de restrição e “Southern blot”. Esta amostra gE- será avaliada como candidata para compor uma vacina diferencial contra a rinotraqueíte infecciosa dos bovinos. |
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