Estudo da autofagia modulada pelo Canabidiol em modelos celulares de infecção por SARS-CoV-2
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2023 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UNIFESP |
Texto Completo: | https://repositorio.unifesp.br/11600/69381 |
Resumo: | A autofagia é um processo catabólico endolisossomal altamente regulado e fundamental para a manutenção da homeostase celular. Evidências sugerem grande potencial da modulação da autofagia no tratamento da infecção por SARS-CoV-2, devido a estratégias adotadas pelo mesmo para modular esse mecanismo e usá-lo de modo pró-viral. O canabidiol (CBD), fitocanabinóide presente abundantemente na planta Cannabis sativa, tem sido reportado como um possível tratamento à COVID- 19, no entanto, o mecanismo autofágico mediado pelo CBD nesse contexto está em discussão. Neste presente estudo, avaliou-se o papel da modulação da autofagia, a partir do CBD, na infectibilidade de duas linhagens celulares (Vero-E6 e Beas-2B) ao SARS-CoV-2. A partir dos resultados obtidos pelo PCR em tempo real, demonstrou- se que a concentração de CBD [1 μM] foi a mais efetiva em diminuir o número de cópias virais em ambos modelos celulares, com as variantes B 1.1.7 ou Ômicron. Além disso, os níveis de expressão de ECA2 e TMPRSS2 não foram modulados pelo CBD, exceto ECA2 na concentração [10 μM] onde há uma diminuição da sua expressão, além de, aparentemente, não influenciarem no número de cópias virais. Por fim, através da técnica de Western Blotting, observou-se um aumento dos níveis de LC3II e p62 devido a infecção pelo SARS-CoV-2 Ômicron. Adicionalmente, o CBD foi capaz de diminuir os níveis de p62 a partir das concentrações de [1 μM] e [10 μM], evidenciando que o SARS-CoV-2 estaria possivelmente bloqueando a fase final da autofagia a seu favor e que o CBD tem potencial de reverter esse processo a partir da modulação autofágica. Dessa forma, esse estudo adiciona importantes informações sobre o potencial terapêutico do CBD, além de elucidar o papel da autofagia na COVID-19. Palavras-chave: SARS-CoV-2, Canabidiol, Autofagia. |
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Araujo, Beatriz Grisolia [UNIFESP]http://lattes.cnpq.br/3452685876406431http://lattes.cnpq.br/7125107888186769Pereira, Gustavo José da Silva [UNIFESP]São Paulo2023-10-23T19:32:30Z2023-10-23T19:32:30Z2023-02-14https://repositorio.unifesp.br/11600/69381A autofagia é um processo catabólico endolisossomal altamente regulado e fundamental para a manutenção da homeostase celular. Evidências sugerem grande potencial da modulação da autofagia no tratamento da infecção por SARS-CoV-2, devido a estratégias adotadas pelo mesmo para modular esse mecanismo e usá-lo de modo pró-viral. O canabidiol (CBD), fitocanabinóide presente abundantemente na planta Cannabis sativa, tem sido reportado como um possível tratamento à COVID- 19, no entanto, o mecanismo autofágico mediado pelo CBD nesse contexto está em discussão. Neste presente estudo, avaliou-se o papel da modulação da autofagia, a partir do CBD, na infectibilidade de duas linhagens celulares (Vero-E6 e Beas-2B) ao SARS-CoV-2. A partir dos resultados obtidos pelo PCR em tempo real, demonstrou- se que a concentração de CBD [1 μM] foi a mais efetiva em diminuir o número de cópias virais em ambos modelos celulares, com as variantes B 1.1.7 ou Ômicron. Além disso, os níveis de expressão de ECA2 e TMPRSS2 não foram modulados pelo CBD, exceto ECA2 na concentração [10 μM] onde há uma diminuição da sua expressão, além de, aparentemente, não influenciarem no número de cópias virais. Por fim, através da técnica de Western Blotting, observou-se um aumento dos níveis de LC3II e p62 devido a infecção pelo SARS-CoV-2 Ômicron. Adicionalmente, o CBD foi capaz de diminuir os níveis de p62 a partir das concentrações de [1 μM] e [10 μM], evidenciando que o SARS-CoV-2 estaria possivelmente bloqueando a fase final da autofagia a seu favor e que o CBD tem potencial de reverter esse processo a partir da modulação autofágica. Dessa forma, esse estudo adiciona importantes informações sobre o potencial terapêutico do CBD, além de elucidar o papel da autofagia na COVID-19. Palavras-chave: SARS-CoV-2, Canabidiol, Autofagia.Autophagy is a highly regulated catabolic endolysosomal process that is fundamental for the maintenance of cellular homeostasis. Evidence suggests a great potential for autophagy modulation in the treatment of SARS-CoV-2 infection, due to strategies adopted by the virus to use this mechanism and use it in a pro-viral way. Cannabidiol (CBD), a phytocannabinoid present abundantly in the Cannabis sativa plant, has been reported for its therapeutic actions in COVID-19 treatment. In this present study, we evaluated the role of autophagy modulated by CBD, in the infectivity of two cell lines (Vero-E6 and Beas-2B) to SARS-CoV-2. Here, we demonstrated by real-time PCR, that the concentration of CBD [1 μM] was the most effective in decreasing the number of viral copies in both cellular models, infected by B 1.1.7 or Omicron variants. Furthermore, the levels of ACE2 and TMPRSS2 expression were not modulated by CBD, except ACE2 at the concentration [10 μM], apparently, not influencing the number of viral copies. Finally, by Western Blotting assays, LC3II and p62 levels were increased by SARS-CoV-2 Omicron infection. Additionally, CBD was able to decrease p62 levels at the concentrations [1 μM] and [10 μM], showing that SARS-CoV-2 was possibly blocking the final phase of autophagy in its favor and that CBD has the potential to reverse this process based on autophagic modulation. Thus, this study adds important information about the therapeutic potential of CBD, in addition to elucidating the role of autophagy in COVID-19. Keywords: SARS-CoV-2, Cannabidiol, Autophagy.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)88887.508411/2020-0097 f.porUniversidade Federal de São PauloCanabidiolAutofagiaSARS-CoV-2COVID-19Estudo da autofagia modulada pelo Canabidiol em modelos celulares de infecção por SARS-CoV-2info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPEscola Paulista de Medicina (EPM)FarmacologiaTEXTTESE BEATRIZ FINAL (1).pdf.txtTESE BEATRIZ FINAL (1).pdf.txtExtracted texttext/plain225096${dspace.ui.url}/bitstream/11600/69381/5/TESE%20BEATRIZ%20FINAL%20%281%29.pdf.txtc1548a3ddabac5fec60800a5805df759MD55open accessTHUMBNAILTESE BEATRIZ FINAL (1).pdf.jpgTESE BEATRIZ FINAL (1).pdf.jpgIM 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Canabidiol Autofagia SARS-CoV-2 COVID-19 |
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A autofagia é um processo catabólico endolisossomal altamente regulado e fundamental para a manutenção da homeostase celular. Evidências sugerem grande potencial da modulação da autofagia no tratamento da infecção por SARS-CoV-2, devido a estratégias adotadas pelo mesmo para modular esse mecanismo e usá-lo de modo pró-viral. O canabidiol (CBD), fitocanabinóide presente abundantemente na planta Cannabis sativa, tem sido reportado como um possível tratamento à COVID- 19, no entanto, o mecanismo autofágico mediado pelo CBD nesse contexto está em discussão. Neste presente estudo, avaliou-se o papel da modulação da autofagia, a partir do CBD, na infectibilidade de duas linhagens celulares (Vero-E6 e Beas-2B) ao SARS-CoV-2. A partir dos resultados obtidos pelo PCR em tempo real, demonstrou- se que a concentração de CBD [1 μM] foi a mais efetiva em diminuir o número de cópias virais em ambos modelos celulares, com as variantes B 1.1.7 ou Ômicron. Além disso, os níveis de expressão de ECA2 e TMPRSS2 não foram modulados pelo CBD, exceto ECA2 na concentração [10 μM] onde há uma diminuição da sua expressão, além de, aparentemente, não influenciarem no número de cópias virais. Por fim, através da técnica de Western Blotting, observou-se um aumento dos níveis de LC3II e p62 devido a infecção pelo SARS-CoV-2 Ômicron. Adicionalmente, o CBD foi capaz de diminuir os níveis de p62 a partir das concentrações de [1 μM] e [10 μM], evidenciando que o SARS-CoV-2 estaria possivelmente bloqueando a fase final da autofagia a seu favor e que o CBD tem potencial de reverter esse processo a partir da modulação autofágica. Dessa forma, esse estudo adiciona importantes informações sobre o potencial terapêutico do CBD, além de elucidar o papel da autofagia na COVID-19. Palavras-chave: SARS-CoV-2, Canabidiol, Autofagia. |
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2023 |
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