Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Smith, Mickaela Cardoso Martinez
Data de Publicação: 2006
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1604688
Resumo: Orientador: Claudia Bincoletto Trindade
id UNICAMP-30_a2cd58bee5efcfe29cd684906ae6efe0
oai_identifier_str oai::398583
network_acronym_str UNICAMP-30
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository_id_str
spelling Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladacicloLysosomal alterations and programmed cell death induction in leukaemic cells treated with palladacycleApoptoseCélulas K562ApoptosisK562 cellOrientador: Claudia Bincoletto TrindadeDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias MedicasResumo: Estudos experimentais envolvendo a caracterização fármaco-toxicológica de novos fármacos são de grande importância na pesquisa inicial sobre drogas (ERDAL et al., 2005). Sendo assim, neste projeto um dos nossos objetivos iniciais foi avaliar os possíveis efeitos antineoplásicos de uma nova classe de drogas organometálicas contendo paládio como metal de transição, denominada paladaciclo ferroceno 1:2, utilizando para isto, a linhagem de células leucêmica K562 (leucemia mielóide crônica) e Jurkat (leucemia linfóide aguda). Os valores de IC50% obtidos na linhagem K562 após 72 horas de tratamento com o composto paladaciclo foram 4,1 e 2,9 µM, nos testes de redução do MTT e exclusão por azul de trypan, respectivamente. Através da fragmentação de DNA observamos que o composto foi capaz de induzir apoptose nas células K562 e Jurkat. Aspectos morfológicos de apoptose nestas células também foram confirmados através da coloração de acredine orange visualizadas em microscopia de fluorescência nas células K562. Utilizando acredine orange, um corante que tem a característica de se acumular principalmente em lisossomas secundários de células tumorais, nós também analisamos o mecanismo bioquímico envolvido no processo de morte celular das células K562 induzidas pelo composto paladaciclo. Nossos resultados demonstraram que a expressão dos genes envolvidos no controle da apoptose (Bcl-2 e Bax) em ambas as linhagens celulares tratadas com o paladaciclo é similar ao controle sem tratamento. Por outro lado, o composto em estudo (6,0 µM) induziu a permeabilização da membrana lisossomal de células K562 após 5 horas de tratamento com ativação das caspases efetoras da apoptose 3 e 6. Este processo de ativação das caspases também foi observado após 72 horas de incubação com o paladaciclo. Como a catepsina B está abundantemente presente nos lisossomoas e sua liberação para o citosol é esperada após alterações da permeabilidade da membrana lisossomal, investigamos também a ativação de ambas as caspases, descritas acima, após a incubação das células K562 com um inibidor de catepsina B (CA074) por 2 horas antes da exposição ao paladaciclo (6,0 µM). Este estudo forneceu um resultado bastante interessante, pois demonstrou que a ativação das caspases efetoras da morte celular programada foi prevenida, sugerindo assim que a catepsina B está fortemente associada ao processo apoptótico em células K562. Sendo assim, podemos sugerir que o composto paladaciclo apresenta potencial antileucêmico, merecendo estudos adicionais que comprovem sua eficácia terapêuticaAbstract: Experimental studies involving the pharmaco-toxicogical properties of new drugs are of very importance in its initial development (ERDAL et al., 2005). In this study it was evaluated the possible antileukemic effects of a new organometallic class of drugs called palladacycle ferrocene 1:2, using the K562 and Jurkat leukaemia cell lines. The cell death mechanism of cytotoxicity induced by the Biphosphinic Palladacycle Complex (BPC) was studied using a K562 leukaemia cell line. The IC50% values obtained for K562 cells post 72 h of BPC were less than 5.0 µM by using MTT and trypan blue assays. Complex triggers apoptosis in K562 and Jurkat cells, inducing DNA fragmentation, as analysed through electrophoresis. Using the Acridine Orange (AO) vital staining combining fluorescence microscopy it was confirmed the presence these process in K562 cells. Lysosomal membrane permeabilization was also observed in K562 cells post 5 h of BPC, which suggests intralysossomal accumulation by proton-trapping, previous study, revealed that its pKa value ranged from 5.1 to 6.5. Caspase-3, and -6 activity induced by BPC in K562 cells was prevented by the cathepsin B inhibitor (CA-074). These events occurred in the presence of endogenous Bcl-2 and Bax expression. Taken together, these data suggest a novel lysosomal pathway for BPCinduced apoptosis, in which lysosomes are the primary target and cathepsin B acts as death mediatorMestradoFarmacologiaMestre em Farmacologia[s.n.]Trindade, Claudia BincolettoSaad, Sara Teresinha OlallaNantes, Iseli LourençoUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em FarmacologiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASSmith, Mickaela Cardoso Martinez20062006-08-28T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf84f. : il.(Broch.)https://hdl.handle.net/20.500.12733/1604688SMITH, Mickaela Cardoso Martinez. Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo. 2006. 84f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1604688. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/398583porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T04:50:21Zoai::398583Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T04:50:21Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
dc.title.none.fl_str_mv Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo
Lysosomal alterations and programmed cell death induction in leukaemic cells treated with palladacycle
title Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo
spellingShingle Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo
Smith, Mickaela Cardoso Martinez
Apoptose
Células K562
Apoptosis
K562 cell
title_short Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo
title_full Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo
title_fullStr Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo
title_full_unstemmed Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo
title_sort Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo
author Smith, Mickaela Cardoso Martinez
author_facet Smith, Mickaela Cardoso Martinez
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Trindade, Claudia Bincoletto
Saad, Sara Teresinha Olalla
Nantes, Iseli Lourenço
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas
Programa de Pós-Graduação em Farmacologia
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
dc.contributor.author.fl_str_mv Smith, Mickaela Cardoso Martinez
dc.subject.por.fl_str_mv Apoptose
Células K562
Apoptosis
K562 cell
topic Apoptose
Células K562
Apoptosis
K562 cell
description Orientador: Claudia Bincoletto Trindade
publishDate 2006
dc.date.none.fl_str_mv 2006
2006-08-28T00:00:00Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv (Broch.)
https://hdl.handle.net/20.500.12733/1604688
SMITH, Mickaela Cardoso Martinez. Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo. 2006. 84f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1604688. Acesso em: 2 set. 2024.
identifier_str_mv (Broch.)
SMITH, Mickaela Cardoso Martinez. Alterações lisossomais e indução de morte celular programada em celulas leucemicas tratadas com paladaciclo. 2006. 84f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1604688. Acesso em: 2 set. 2024.
url https://hdl.handle.net/20.500.12733/1604688
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/398583
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
84f. : il.
dc.publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
instname_str Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron_str UNICAMP
institution UNICAMP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.mail.fl_str_mv sbubd@unicamp.br
_version_ 1809188962919514112

Registros relacionados