Desenvolvimento de plataforma bacteriana para produção de biofármacos
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2021 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UNESP |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/11449/214291 |
Resumo: | A produção de biofármacos tem crescido rapidamente em todo o mundo. Porém, o processo de produção e purificação destas biomoléculas é bastante custoso. A solução para minimizar tais custos pode estar associada ao desenvolvimento da linhagem produtora. Desenvolver uma plataforma de produção de biofármacos, usando microrganismos que facilitem o processo de extração e purificação da biomolécula, pode gerar grande redução de custos e aumento da recuperação do produto. Além disso, uma plataforma padronizada pode ser útil para a produção de uma grande variedade de biofármacos com reduzido tempo de desenvolvimento individual. Dentro deste contexto, este trabalho consistiu no desenvolvimento de uma plataforma padronizada para a produção de biofármacos, usando a bactéria Bacillus subtilis como chassis. Como modelo de biofármaco, a L-Asparaginase II de Aliivibrio fischeri foi produzida usando a plataforma construída. Esta enzima apresenta potencial antileucêmico baseado em sua sequência de aminoácidos. O projeto resultou no desenvolvimento de uma linhagem de B. subtilis produtora da L-Asparaginase intracelular. Além disso, diferentes peptídeos-sinal foram testados utilizando a Proteína Verde Fluorescente como repórter para avaliar e otimizar a exportação proteica. |
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Desenvolvimento de plataforma bacteriana para produção de biofármacosDevelopment of a microbial platform for biopharmaceuticals productionAsparaginaseBacillus subtilisBiofármacosBiologia SintéticaA produção de biofármacos tem crescido rapidamente em todo o mundo. Porém, o processo de produção e purificação destas biomoléculas é bastante custoso. A solução para minimizar tais custos pode estar associada ao desenvolvimento da linhagem produtora. Desenvolver uma plataforma de produção de biofármacos, usando microrganismos que facilitem o processo de extração e purificação da biomolécula, pode gerar grande redução de custos e aumento da recuperação do produto. Além disso, uma plataforma padronizada pode ser útil para a produção de uma grande variedade de biofármacos com reduzido tempo de desenvolvimento individual. Dentro deste contexto, este trabalho consistiu no desenvolvimento de uma plataforma padronizada para a produção de biofármacos, usando a bactéria Bacillus subtilis como chassis. Como modelo de biofármaco, a L-Asparaginase II de Aliivibrio fischeri foi produzida usando a plataforma construída. Esta enzima apresenta potencial antileucêmico baseado em sua sequência de aminoácidos. O projeto resultou no desenvolvimento de uma linhagem de B. subtilis produtora da L-Asparaginase intracelular. Além disso, diferentes peptídeos-sinal foram testados utilizando a Proteína Verde Fluorescente como repórter para avaliar e otimizar a exportação proteica.Biopharmaceuticals production has grown rapidly in the World and in Brazil. Many pharmaceutical companies have expanded their role in biopharmaceuticals due to the increased demand. However, the production process for biopharmaceuticals is still costly. Production and subsequent purification of the biomolecule account for most of the cost. Developing a platform for the production of biopharmaceuticals, using microorganisms that facilitate the extraction and purification process of the biomolecule, can generate a great reduction of costs and increase product recovery. In addition, a standardized platform may be useful for the production of a wide variety of biopharmaceuticals with reduced individual development time. Within this context, in this work, we aimed to develop a standardized platform for the production of biopharmaceuticals, using the bacterium Bacillus subtilis as chassis. As a biopharmaceutical model, L-Asparaginase II from Aliivibrio fischeri was produced using the constructed platform. This enzyme has anti-leukemic potential based on its amino acid sequence. To this moment, a strain producing L-Asparaginase II intracellularly was developed. Moreover, different signal-peptides were tested using the Green Fluorescent Protein as a reporter to evaluate and optimize protein secretion.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)130614/2019-0Universidade Estadual Paulista (Unesp)Pedrolli, Danielle BiscaroUniversidade Estadual Paulista (Unesp)Paiva, Gabriela Barbosa de2021-09-02T16:36:34Z2021-09-02T16:36:34Z2021-08-16info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11449/21429133004030081P7porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESP2024-06-24T18:10:09Zoai:repositorio.unesp.br:11449/214291Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestopendoar:29462024-08-05T23:19:27.849579Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)false |
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A produção de biofármacos tem crescido rapidamente em todo o mundo. Porém, o processo de produção e purificação destas biomoléculas é bastante custoso. A solução para minimizar tais custos pode estar associada ao desenvolvimento da linhagem produtora. Desenvolver uma plataforma de produção de biofármacos, usando microrganismos que facilitem o processo de extração e purificação da biomolécula, pode gerar grande redução de custos e aumento da recuperação do produto. Além disso, uma plataforma padronizada pode ser útil para a produção de uma grande variedade de biofármacos com reduzido tempo de desenvolvimento individual. Dentro deste contexto, este trabalho consistiu no desenvolvimento de uma plataforma padronizada para a produção de biofármacos, usando a bactéria Bacillus subtilis como chassis. Como modelo de biofármaco, a L-Asparaginase II de Aliivibrio fischeri foi produzida usando a plataforma construída. Esta enzima apresenta potencial antileucêmico baseado em sua sequência de aminoácidos. O projeto resultou no desenvolvimento de uma linhagem de B. subtilis produtora da L-Asparaginase intracelular. Além disso, diferentes peptídeos-sinal foram testados utilizando a Proteína Verde Fluorescente como repórter para avaliar e otimizar a exportação proteica. |
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