Imunomodulação da ciclofosfamida na reação inflamatória em tilapias do Nilo (Oreochromis niloticus)

• Autor(a) principal: Charlie-Silva, Ives [UNESP]
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/191099
• topic: Imunologia; Modelos experimentais; Proteína de fase aguda; Inflamação; Inflammation; Immunology; Experimental models; Acute-phase protein

O presente estudo investigou os efeitos da ciclofosfamida (CYP) na modulação de proteínas de fase aguda (APPs) e acúmulo celular em exsudatos presentes na bexiga natatória de tilápias (modelo de peixe de aerocistite) e o recrutamento de leucócitos na lamínula de vidro implantadas no tecido subcutâneo. Foram utilizadas 140 tilápias (Oreochromis niloticus) (± 150 g) distribuídas em 14 aquários com capacidade para 250 L de água (n = 10). Os animais foram distribuídos em dois ensaios: Experimento I: foram utilizados 80 animais distribuídos em quatro tratamentos: T1 - controle NAIVE; T2 - controle negativo + solução salina injetada NaCl; T3- controle positivo + injetado com Aeromonas hydrophila; T4- ciclofosfamida, Isopac ® Sigma (200 mg / kg, dose única, por via intraperitoneal) + injetado com A. hydrophila. As amostras de exsudato e sangue foram coletadas 6 e 24 horas após a infecção (HPI) para a contagem de células e determinação do fracionamento eletroforético das APPs por SDS-PAGE, digestão de proteínas em gel e identificação por espectrometria de massa. Experimento II: os peixes foram alocados (n=60) em 3 grupos experimentais: G1 - controle NAIVE; G2 – controle positivo + implante de lamínula; G3 - ciclofosfamida, Isopac ® Sigma (200 mg / kg, dose única, por via intraperitoneal) + implante de lamínula. Após serem anestesiados, foram submetidos ao implante da lamínula de vidro de 10mm de diâmetro no tecido subcutâneo. As amostras de sangue foram coletadas e as lamínulas foram cuidadosamente retiradas e lavadas com solução salina 0,9% após 74 e 144 horas. As amostras foram fixadas em solução de Bouin e coradas em hematoxilina-eosina. Em todas as lamínulas foram quantificados o total de macrófagos, células gigantes tipo corpo estranho e Langhans. Na evolução da aerocistite, a tilápia tratada com CYP apresentou diminuição nos valores circulantes de ceruloplasmina, complemento C3, α2macroglobulina e haptoglobina. A avaliação do exsudato revelou diminuição (p < 0,05) do número total de células acumuladas em peixes tratados com CYP quando comparada à resposta observada em peixes de controle positivo (T3). Em relação à contagem total de macrófagos e células gigantes no implante, observou-se aumento no acúmulo de macrófagos e formação de células gigantes ao longo do tempo (144 HPI). Ao mesmo tempo, houve diferença significativa (p < 0,05) nas contagens totais entre os grupos tratados CYP e controle negativo. Da mesma forma em mamíferos, vários estudos relataram os efeitos supressivos associados ao tratamento com este agente alquilante. O uso de 200 mg/kg de ciclofosfamida em O. niloticus, inibe a resposta inflamatória e induz leucopenia e trombocitopenia em processos inflamatórios agudos e crônicos.