Composição bacteriana do biofilme in situ formado sobre discos de titânio, obtidos por diferentes técnicas

• Autor(a) principal: Kreve, Simone
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58131/tde-05122022-114447/
• topic: Análise química; Biologia molecular; Chemical analysis; Dental implants; Implantes dentários; Impressão tridimensional; Mechanical tests; Microbiologia; Microbiology; Molecular biology; Printing; RNA-Se; RNA-Seq; Testes mecânicos; Three-dimensional; Titânio; Titanium; Topografia; Topography

Diferentes tratamentos de superfície são aplicados em implantes odontológicos de ligas de titânio a fim de modificar a superfície e alterar as respostas celulares. Tais modificações melhoram a osseointegração, entretanto, promovem topografia rugosa as quais estão sujeitas ao acúmulo de diferentes tipos de biofilme bacteriano, que diferem na quantidade e nas espécies colonizadoras. A obtenção de implantes odontológicos por meio da utilização da manufatura aditiva apresenta um implante com superfície topográfica e com caracterização química superficial diferente dos implantes disponíveis no mercado. Sabendo que a composição da superfície, estrutura química, molhabilidade, energia livre de superfície, forças eletrostáticas e rugosidade podem interferir no acúmulo de biofilme, o objetivo deste estudo foi avaliar três superfícies de discos de titânio obtidos por diferentes métodos, sendo 1 manufatura aditiva (DMA), 2 manufatura subtrativa com tratamento de superfície de hidroxiapatita (DUCT), 3 manufatura subtrativa sem tratamento (DUST), e compará-las quanto ao perfil microbiológico por meio de sequenciamento do gene 16S rRNA-based PCR. Oito corpos de prova com Ø 5,0 mm x 1 mm de altura foram obtidos por manufatura aditiva a partir do pó de Ti-6Al-4V, e 16 corpos de prova com Ø 8,0 mm x 3 mm de altura foram obtidos por manufatura subtrativa de barras cilíndricas de liga de Ti-6Al-4V. Destes 16 corpos de prova, 8 tiveram a superfície tratada com hidroxiapatita carbonatada (HAp) cultivada em fosfolipídio. Foram confeccionados aparelhos removíveis para alojar os discos a partir da moldagem da maxila de 8 pacientes. O aparelho foi utilizado por 96 horas, e o biofilme coletado a cada 24 horas. Foi realizada a extração do DNA genômico, o PCR 16S e o sequenciamento genético das amostras. A rugosidade foi avaliada por microscópio confocal a laser, e a composição química foi determinada por Espectroscopia de energia dispersiva de Raio-X (EDS). Para a análise estatística foi verificada a distribuição dos dados, e em seguida foram aplicados testes paramétricos, não-paramétricos e análise descritiva com nível de significância de 5% (α = 0,05). Quanto a rugosidade, foram observados diferentes níveis, sendo que a superfície DMA foi quem mostrou as maiores médias para todos os parâmetros avaliados (Ra, Rz e Sa). A análise da composição química por EDS mostrou predominância de Ti nas superfícies dos discos DMA e DUST, seguida pelos elementos Al e V. Nas superfícies do DUCT foi observada a predominância de O seguida de Ti, Ca, P e Mg. Com relação à quantificação microbiana total, foi observada diferença significante quando realizado o comparatório entre as três superfícies, sendo DUCT e DUST semelhantes na comparação múltipla (p= 0,80). Na análise de abundância relativa, foi observada semelhança na proporção dos gêneros (p= 0,99), sendo que Streptococcus (38,31%), Neisseria (10,43%) e Pasteurella (4,95%) foram os gêneros predominantes em uma contagem total sem considerar superfícies. Com relação á diversidade foi observada grande diversidade e sugere-se que não existem gêneros dominantes em nenhuma das superfícies investigadas.