Purificação parcial de toxina killer de Hansenula wingei visando aplicação no controle do desenvolvimento de fungos filamentosos deteriorantes de alimentos

• Autor(a) principal: Fontana, Herrison Yoshiki Yocida
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))
• Texto Completo: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/12374
• topic: CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::CIENCIA E TECNOLOGIA DE ALIMENTOS::TECNOLOGIA DE ALIMENTOS; Fungos; Pragas agrícolas - Controle biológico; Leveduras; Fungi; Agricultural pests - Biological control; Yeast

O Brasil é um país agropecuário de destaque no cenário mundial da produção de commodities agrícolas. Neste contexto, durante o armazenamento, os grãos se tornam suscetíveis à proliferação de fungos filamentosos devido às suas características nutricionais. Durante o crescimento, determinadas espécies podem produzir micotoxinas que constituem um perigo natural na cadeia produtiva do alimento. Sendo assim, medidas de controle de desenvolvimento fúngico se tornam necessárias para prevenção de deteriorantes e, consequentemente, ocorrência destas toxinas nos alimentos. O objetivo deste trabalho é produzir e purificar toxina killer de Hansenula wingei visando aplicação no controle do desenvolvimento de fungos filamentosos deteriorantes de alimentos. Os fungos testes foram identificados por meio do sequenciamento da região ITS (Internal Transcribed Spacer). Para a obtenção do extrato bruto, a levedura foi cultivada em caldo MPL à 25oC por 96h. Após este período o cultivo foi centrifugado e filtrado em membrana de 0,20 µm para remoção das células e o extrato obtido. A purificação parcial do extrato foi realizada por sistema de ultrafiltração em membranas de exclusão molecular de 30 e 10 kDa, então essas frações foram testadas frente à germinação de esporos fúngicos de Aspergillus ochraceus e Penicillium expansum. O sequenciamento da região ITS dos fungos foi eficaz na confirmação da identificação morfológica. O sistema de ultrafiltração possibilitou a obtenção de três frações, denominadas Fração 1 (> 30 kDa), Fração 2 (entre 10 e 30 kDa), e Fração 3 (< 10 kDa). Embora as frações 1 e 2 terem sido concentradas 14 e 13 vezes, o processo de ultrafiltração não foi eficiente na purificação parcial da toxina killer de H. wingei. A porcentagem de esporos germinados nas frações 1 e controle positivo não diferiram entre si (p > 0,05), embora a primeira fração tenha sido um pouco mais eficaz. Embora as frações 2 e 3 tenham diferido significativamente entre si e do controle negativo (p < 0,05), foi observado que mais de 50% dos esporos de ambos os fungos germinaram na presença destas.