Flow cytometry reticulocyte counting using acridine orange: validation of a new protocol

• Main Author: Viana, Karina Augusta
• Publication Date: 2014
• Other Authors: Carvalho, Maria das Graças, Dusse, Luci Maria Sant' Ana, Fernandes, Aline Caldeira, Avelar, Renato Sathler, Avelar, Danielle Marquete Vitelli, Carvalho, Beatriz, Ribeiro, Claudia Maria Franco, Antonelli, Lis Ribeiro do Valle, Carvalho, Andrea Teixeira, Martins Filho, Olindo Assis
• Format: Article
• Language: eng
• Source: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Download full: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/9842
• topic: métodos de contagem de reticulócitos; citometria de fluxo; acridine orange; contagem manual de reticulócitos.; reticulocyte counting methods; flow cytometry; acridine orange; manual reticulocyte count

Introdução: Atualmente, a contagem de reticulócitos representa um desafio para os laboratórios clínicos no Brasil, principalmente os de pequeno e médio porte, nos quais ainda se utiliza o método manual. Este método apresenta algumas limitações, classificando-se como tedioso, demorado e de baixa precisão. Objetivos: O presente estudo desenvolveu e avaliou o desempenho de um novo protocolo laboratorial para contagem de reticulócitos por citometria de fluxo (CF) utilizando acridine orange (AO) como corante, visando padronizar um protocolo preciso, de fácil e rápida execução e custo acessível. Após a padronização do novo protocolo desenvolvido (CF/AO), fez-se a comparação com o método manual. Os resultados foram analisados de acordo com recomendações do National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), atualmente Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), para avaliar a intercambialidade entre os métodos, por meio da análise de regressão linear e teste t pareado, além de outros testes de controle de qualidade. Conclusão: Diante dos resultados obtidos referentes à correlação entre os métodos e os testes voltados ao controle de qualidade, pode-se admitir que o CF/AO estabelecido para contagem de reticulócitos possui vantagens inegáveis quando comparado com o método manual.