Avaliação da eficácia e imunogenicidade de extratos antigênicos homólogos e heterólogos como vacinas contra leishmaniose cutânea murina causada por Leishmania amazonensis

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Souza, Iasmin Cristiane de
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/27441
Resumo: As leishmanioses representam um complexo de doenças com amplo espectro clínico e diversidade epidemiológica, sendo consideradas um grande problema de saúde pública. A terapêutica atual para estas doenças possui alto custo e tem efeitos adversos e toxicidade consideráveis. Até o momento não há disponibilidade de uma vacina para uso humano. Dentre várias questões sobre a o desenvolvimento de uma vacina para leishmaniose é se a mesma possuiria capacidade protetora contra a infecção de espécies homólogas e heterólogas de Leishmania. Estudos mostram que os extratos totais de antígenos de Leishmania braziliensis e Leishmania amazonensis possuem efeitos tanto protetores como promotores da doença, quando utilizados como vacina contra a leishmaniose em modelo murino. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a imunogenicidade e a capacidade protetora dos extratos totais homólogos e heterólogos de L. amazonensis (La) e L. braziliensis (Lb), respectivamente, frente à infecção experimental por L. amazonensis Para isso, camundongos BALB/c foram imunizados duas vezes com extratos totais de promastigotas mortas de La ou Lb isoladamente ou com oligodesoxinucleotídeos ricos em motivos CpG (CpG-ODN) como adjuvante. Duas semanas após a segunda imunização, os camundongos foram desafiados com promastigotas de L. amazonensis e o desenvolvimento das lesões foi acompanhado por mensurações semanais do diâmetro das patas. A carga parasitária foi avaliada pelas técnicas de Análise de Diluição Limitante (ADL) ou qPCR, além disso, o perfil de citocina foi determinado por citometria de fluxo. Os grupos imunizados com La- CpG ou Lb-CpG apresentaram lesões significativamente menores do que o grupo controle (PBS). A carga parasitária, em camundongos da linhagem BALB/c imunizados com os extratos em associação ao adjuvante, foi menor do que a dos grupos controle. Na análise do perfil de citocinas, os grupos de animais imunizados com La-CpG e Lb-CpG, que foram os grupos que mostraram proteção, apresentaram uma tendência a maior produção de IFN-\03B3.
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Dentre várias questões sobre a o desenvolvimento de uma vacina para leishmaniose é se a mesma possuiria capacidade protetora contra a infecção de espécies homólogas e heterólogas de Leishmania. Estudos mostram que os extratos totais de antígenos de Leishmania braziliensis e Leishmania amazonensis possuem efeitos tanto protetores como promotores da doença, quando utilizados como vacina contra a leishmaniose em modelo murino. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a imunogenicidade e a capacidade protetora dos extratos totais homólogos e heterólogos de L. amazonensis (La) e L. braziliensis (Lb), respectivamente, frente à infecção experimental por L. amazonensis Para isso, camundongos BALB/c foram imunizados duas vezes com extratos totais de promastigotas mortas de La ou Lb isoladamente ou com oligodesoxinucleotídeos ricos em motivos CpG (CpG-ODN) como adjuvante. Duas semanas após a segunda imunização, os camundongos foram desafiados com promastigotas de L. amazonensis e o desenvolvimento das lesões foi acompanhado por mensurações semanais do diâmetro das patas. A carga parasitária foi avaliada pelas técnicas de Análise de Diluição Limitante (ADL) ou qPCR, além disso, o perfil de citocina foi determinado por citometria de fluxo. Os grupos imunizados com La- CpG ou Lb-CpG apresentaram lesões significativamente menores do que o grupo controle (PBS). A carga parasitária, em camundongos da linhagem BALB/c imunizados com os extratos em associação ao adjuvante, foi menor do que a dos grupos controle. Na análise do perfil de citocinas, os grupos de animais imunizados com La-CpG e Lb-CpG, que foram os grupos que mostraram proteção, apresentaram uma tendência a maior produção de IFN-\03B3.Leishmaniasis represents a complex of diseases with broad clinical spectrum and epidemiological diversity, being considered a major public health problem. Current therapy for these diseases is costly and has considerable adverse effects and toxicity. So far there is no vaccine available for human use. Among several questions about a vaccine development for leishmaniasis is whether it would have a protective capacity against infection of homologous and heterologous Leishmania species. Studies have shown that total antigen extracts of Leishmania braziliensis and Leishmania amazonensis have both protective and disease-promoting effects when used as a vaccine against leishmaniasis in murine model. Therefore, this study aimed to evaluate the immunogenicity and protective capacity of the total homologous and heterologous extracts of L. amazonensis (La) and L. braziliensis (Lb), respectively, against the experimental infection by L. amazonensis BALB/c mouse were immunized twice with total extracts of dead La or Lb alone or with oligodeoxynucleotides containing CpG motifs (CpG-ODN) as adjuvant. Two weeks after the second immunization, mouse were challenged with L. amazonensis promastigotes and lesion development was followed by weekly measurements of paws diameter. The parasite load was evaluated by the Limiting Dilution Analysis (LDA) or qPCR techniques, in addition, the cytokine profile was determined by flow cytometry. Groups immunized with La-CpG or Lb-CpG showed significant lower lesions than the control group (PBS). The parasite load in BALB/c mouse immunized with extracts associated with adjuvant was lower than control groups. When the cytokine profile analysis was performed, the groups of animals immunized with La- CpG or Lb-CpG, which were the groups that showed protection, presented a tendency to higher production of IFN-\03B3.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.porLeishmaniose CutâneaVacinasAdjuvantes ImunológicosAvaliação da eficácia e imunogenicidade de extratos antigênicos homólogos e heterólogos como vacinas contra leishmaniose cutânea murina causada por Leishmania amazonensisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2018Instituto Oswaldo CruzFundação Oswaldo CruzRio de JaneiroPrograma de Pós-Graduação em Medicina Tropicalinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/27441/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALiasmin_souza_ioc_mest_2018.pdfapplication/pdf1656022https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/27441/2/iasmin_souza_ioc_mest_2018.pdf305ccb73fb6cf292f138eb7c8285abfbMD52TEXTiasmin_souza_ioc_mest_2018.pdf.txtiasmin_souza_ioc_mest_2018.pdf.txtExtracted texttext/plain104357https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/27441/3/iasmin_souza_ioc_mest_2018.pdf.txt1e0de032d1af1f7ea1e75973b4c29befMD53icict/274412022-06-24 13:11:02.583oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352022-06-24T16:11:02Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
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