Perfil da resposta imunológica de memória em pacientes com histórico de neuroarbovirose e seu comunicante intradomiciliar, não geneticamente relacionado, frente ao desafio com antígenos de arbovírus (DENV, ZIKV e CHIKV)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Silva, Mauro César
Data de Publicação: 2021
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/53084
Resumo: Os mosquitos do gênero Aedes são responsáveis pela cocirculação dos vírus da dengue (DENV), Zika (ZIKV) e chikungunya (CHIKV). Esses arbovírus, quando sintomáticos, podem promover nos indivíduos infectados um amplo espectro de síndromes clínicas, incluindo doenças neuroinvasivas, como a encefalite e a síndrome de Guillain-Barré (SGB). O mecanismo de patogênese das neuroarboviroses é complexo e ainda não foi completamente esclarecido o papel dos mediadores solúveis na patogênese da doença. Diante disso, tivemos como objetivo compreender a resposta imunológica de memória nas células mononucleares do sangue periférico de pacientes com histórico de neuroarbovirose e seu comunicante intradomiciliar (cônjuge), frente ao desafio com antígenos de arbovírus. A população de estudo foi composta por 16 pacientes maiores de 18 anos, que tiveram diagnóstico clínico e laboratorial de neuroarbovirose (seis de encefalite e 10 de SGB) atendidos no Setor de Neurologia do Hospital da Restauração (HR), Recife, Pernambuco e seu respectivo cônjuge. As PBMCs dos pacientes e comunicantes foram cultivadas e desafiadas com os antígenos de DENV, CHIKV e ZIKV; os mediadores solúveis foram quantificados com o kit Human Cytokine Magnetic 35-Plex Panel; e um ELISA do tipo sanduíche foi realizado para mensurar os níveis de HLA-G solúvel. Observamos que o perfil de expressão dos mediadores solúveis da resposta imunológica varia de acordo com o agente infeccioso, que influencia na apresentação clínica da doença; onde os antígenos de CHIKV apresentaram uma maior antigenicidade. Além disso, também foi constatado que a encefalite está associada a expressão exacerbada dos mediadores solúveis, possivelmente devido a fatores genéticos que tornam esses indivíduos extremamente responsivos a antígenos e a uma menor eficiência na resposta antiviral, que foi comprovada no sobrenadante de PBMCs dos comunicantes que apresentaram aumento de IL-15 em relação as PBMCs dos pacientes com histórico de encefalite.
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O mecanismo de patogênese das neuroarboviroses é complexo e ainda não foi completamente esclarecido o papel dos mediadores solúveis na patogênese da doença. Diante disso, tivemos como objetivo compreender a resposta imunológica de memória nas células mononucleares do sangue periférico de pacientes com histórico de neuroarbovirose e seu comunicante intradomiciliar (cônjuge), frente ao desafio com antígenos de arbovírus. A população de estudo foi composta por 16 pacientes maiores de 18 anos, que tiveram diagnóstico clínico e laboratorial de neuroarbovirose (seis de encefalite e 10 de SGB) atendidos no Setor de Neurologia do Hospital da Restauração (HR), Recife, Pernambuco e seu respectivo cônjuge. As PBMCs dos pacientes e comunicantes foram cultivadas e desafiadas com os antígenos de DENV, CHIKV e ZIKV; os mediadores solúveis foram quantificados com o kit Human Cytokine Magnetic 35-Plex Panel; e um ELISA do tipo sanduíche foi realizado para mensurar os níveis de HLA-G solúvel. Observamos que o perfil de expressão dos mediadores solúveis da resposta imunológica varia de acordo com o agente infeccioso, que influencia na apresentação clínica da doença; onde os antígenos de CHIKV apresentaram uma maior antigenicidade. Além disso, também foi constatado que a encefalite está associada a expressão exacerbada dos mediadores solúveis, possivelmente devido a fatores genéticos que tornam esses indivíduos extremamente responsivos a antígenos e a uma menor eficiência na resposta antiviral, que foi comprovada no sobrenadante de PBMCs dos comunicantes que apresentaram aumento de IL-15 em relação as PBMCs dos pacientes com histórico de encefalite.Mosquitoes of the Aedes are responsible for the cocirculation of dengue (DENV), Zika (ZIKV) and chikungunya (CHIKV) viruses. These arboviruses, when symptomatic, can promote a wide spectrum of clinical syndromes in infected individuals, including neuroinvasive diseases such as encephalitis and Guillain-Barré syndrome (GBS). The mechanism of pathogenesis of neuroarboviruses is complex and the role of soluble mediators in the pathogenesis of the disease has not been completely clarified. Therefore, we aimed to understand the memory immune response in peripheral blood mononuclear cells of patients with a history of neuroarbovirosis and their household contact (spouse), facing the challenge with arbovirus antigens. The study population consisted of 16 patients over 18 years of age, who had a clinical and laboratory diagnosis of neuroarbovirus (6 encephalitis and 10 GBS) treated at the Neurology Sector of Hospital da Restauração (HR), Recife, Pernambuco and its respective spouse. PBMCs from patients and contacts were cultured and challenged with DENV, CHIKV and ZIKV antigens; soluble mediators were quantified with the Human Cytokine Magnetic 35-Plex Panel kit; and a sandwich-type ELISA was performed to measure soluble HLA-G levels. We observed that the expression profile of soluble immune response mediators varies according to the infectious agent, which influences the clinical presentation of the disease, where CHIKV antigens showed greater antigenicity. In addition, encephalitis was also found to be associated with exacerbated expression of soluble mediators, possibly due to genetic factors that make these individuals extremely responsive to antigens and to a lower efficiency in the antiviral response, which was proven in the PBMC supernatant of contacts that showed an increase in IL-15 compared to the PBMCs of patients with a history of encephalitis.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil.porResposta imunológicaNeuroarboviroseEnsaio in vitroDengueZikaChikungunyaVírus da DengueZika virusVírus ChikungunyaAntígenos ViraisLeucócitos MononuclearesTécnicas In VitroEncefalite por ArbovirusMemória ImunológicaEnsaio de Imunoadsorção EnzimáticaPerfil da resposta imunológica de memória em pacientes com histórico de neuroarbovirose e seu comunicante intradomiciliar, não geneticamente relacionado, frente ao desafio com antígenos de arbovírus (DENV, ZIKV e CHIKV)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2021Instituto Aggeu MagalhãesFundação Oswaldo. Instituto Aggeu Magalhães.Mestrado AcadêmicoRecife/PEPrograma de Pós-Graduação em Biociências e Biotecnologia em Saúdeinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/53084/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALmauro_silva_iam_mest_2021.pdfmauro_silva_iam_mest_2021.pdfapplication/pdf1899353https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/53084/2/mauro_silva_iam_mest_2021.pdf81def7f7369e7546ad4dda28fd036ea1MD52icict/530842022-08-03 14:23:13.609oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352022-08-03T17:23:13Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
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