Avaliação de polimorfismos genéticos em HIF1A e expressão da proteína HIF-1α durante a compressão ortodôntica
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Publication Date: | 2020 |
Format: | Master thesis |
Language: | por |
Source: | Repositório do Centro Universitário Braz Cubas |
Download full: | https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2120 |
Summary: | Many genes and signaling molecules are involved in orthodontic tooth movement (OTM) with mechanically and hypoxically stabilized HIF-1α having been shown to play a decisive role in PDL signaling during OTM. Therefore, this in vitro study aimed to investigate, if genetic polymorphisms in HIF1A (Hypoxia-inducible factor α-subunits) influence the expression pattern of HIF-1α protein during simulated orthodontic compressive pressure. Samples from human periodontal ligament (hPDL) fibroblasts were used and their DNA was genotyped using real time PCR for the genetic polymorphisms rs2301113 and rs2057482 in HIF1A. For cell culture and protein expression experiments, six hPDL fibroblast cell lines were selected based on the patients’ genotype. To simulate orthodontic compressive pressure in hPDL fibroblasts, a force of 2 g/cm2 was applied under cell culture conditions for 48h. Protein expression was evaluated by Western Blot. Paired t-tests were used to compare HIF-1α expression with and without compressive pressure application and T tests to compare expression among the genotypes in rs2057482 and rs2301113 (p<0.05). The expression of HIF-1α protein was significantly enhanced by compressive pressure application regardless of the genotype (p<0.0001). The genotypes in the genetic polymorphisms rs2301113 and rs2057482 were not associated with HIF-1α protein expression. In conclusion, the genetic polymorphisms in HIF1A did not impact on the expression pattern of HIF-1α protein by hPDL fibroblasts during simulated orthodontic compressive pressure. |
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Avaliação de polimorfismos genéticos em HIF1A e expressão da proteína HIF-1α durante a compressão ortodônticaOdontologiaHipóxiaTécnicas de movimentação dentáriaPolimorfismo genéticoCNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIAMany genes and signaling molecules are involved in orthodontic tooth movement (OTM) with mechanically and hypoxically stabilized HIF-1α having been shown to play a decisive role in PDL signaling during OTM. Therefore, this in vitro study aimed to investigate, if genetic polymorphisms in HIF1A (Hypoxia-inducible factor α-subunits) influence the expression pattern of HIF-1α protein during simulated orthodontic compressive pressure. Samples from human periodontal ligament (hPDL) fibroblasts were used and their DNA was genotyped using real time PCR for the genetic polymorphisms rs2301113 and rs2057482 in HIF1A. For cell culture and protein expression experiments, six hPDL fibroblast cell lines were selected based on the patients’ genotype. To simulate orthodontic compressive pressure in hPDL fibroblasts, a force of 2 g/cm2 was applied under cell culture conditions for 48h. Protein expression was evaluated by Western Blot. Paired t-tests were used to compare HIF-1α expression with and without compressive pressure application and T tests to compare expression among the genotypes in rs2057482 and rs2301113 (p<0.05). The expression of HIF-1α protein was significantly enhanced by compressive pressure application regardless of the genotype (p<0.0001). The genotypes in the genetic polymorphisms rs2301113 and rs2057482 were not associated with HIF-1α protein expression. In conclusion, the genetic polymorphisms in HIF1A did not impact on the expression pattern of HIF-1α protein by hPDL fibroblasts during simulated orthodontic compressive pressure.Muitos genes de sinalização estão envolvidos no movimento dentário ortodôntico (MDO), estabilizado mecanicamente e hipoxicamente. O HIF-1α tem demonstrado desempenhar um papel decisivo na sinalização do ligamento periodontal (LPD) durante MDO. Este estudo in vitro teve como objetivo investigar se polimorfismos genéticos em HIF1A (subunidades α do fator induzível por hipóxia) influenciam o padrão de expressão da proteína HIF-1α durante a pressão compressiva ortodôntica simulada. Foram utilizadas amostras de fibroblastos do ligamento periodontal humano (hPDL) de 57 pacientes e seu DNA foi genotipado por PCR em tempo real para os polimorfismos genéticos rs2301113 e rs2057482 em HIF1A. Para experimentos de cultura de células e expressão de proteínas, seis linhas celulares de fibroblastos hPDL foram selecionadas com base no genótipo dos pacientes. Para simular a pressão de compressão ortodôntica nos fibroblastos hPDL, uma força de 2g/cm2 foi aplicada em condições de cultura celular por 48h. A expressão de proteínas foi avaliada por Western Blot. Os testes t pareados foram utilizados para comparar a expressão de HIF-1α com e sem aplicação de pressão compressiva e os testes T para comparar a expressão entre os genótipos em rs2057482 e rs2301113 (p <0,05). A expressão da proteína HIF-1α foi aumentada pela aplicação de pressão compressiva, independentemente do genótipo (p <0,0001). Os genótipos nos polimorfismos genéticos rs2301113 e rs2057482 não foram associados à expressão da proteína HIF-1α. Em conclusão, os polimorfismos genéticos em HIF1A não influenciaram no padrão de expressão da proteína HIF-1α pelos fibroblastos hPDL durante a pressão compressiva ortodôntica simuladaUniversidade PositivoBrasilPós-GraduaçãoPrograma de Pós-Graduação em Odontologia ClínicaUPScariot, Rafaelahttp://lattes.cnpq.br/8726711027143249Kirschneck, ChristianTeodoro, Vinicius Broska2021-05-11T18:23:38Z20202021-05-11T18:23:38Z2020info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2120porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório do Centro Universitário Braz Cubasinstname:Centro Universitário Braz Cubas (CUB)instacron:CUB2021-06-17T18:44:10Zoai:repositorio.cruzeirodosul.edu.br:123456789/2120Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.brazcubas.edu.br/oai/requestbibli@brazcubas.edu.bropendoar:2021-06-17T18:44:10Repositório do Centro Universitário Braz Cubas - Centro Universitário Braz Cubas (CUB)false |
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