Transmissão interespécies de lentivírus de caprinos para ovinos.

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Main Author: SOUZA, T. S. de
Publication Date: 2014
Format: Doctoral thesis
Language: por
Source: Repositório Institucional da EMBRAPA (Repository Open Access to Scientific Information from EMBRAPA - Alice)
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Summary: Resumo: A artrite-encefalite caprina (CAE) e a maedi-visna (MV) acometem caprinos e ovinos, respectivamente. Durante anos, os agentes etiológicos dessas enfermidades foram considerados como específicos a cada espécie animal. Entretanto, análises filogenéticas têm demonstrado a heterogeneidade desse vírus, reunindo diferentes genótipos e subtipos em um grupo denominado de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR). Sendo assim, o principal objetivo deste trabalho foi avaliar a transmissão interespecífica do lentivírus de caprinos para ovinos, a partir de quatro grupos experimentais. O primeiro (grupo colostro) foi formado por nove cordeiros que receberam colostro de cabras positivas para LVPR. O segundo (grupo leite) foi estabelecido por nove cordeiros que receberam leite dessas cabras. O terceiro foi um grupo controle, constituído por dez cordeiros que mamaram colostro e leite de suas mães negativas. Já o quarto grupo (grupo contato) foi formado por oito ovinos adultos confinados com duas cabras naturalmente infectadas, propiciando a análise de transmissão horizontal. Os grupos foram monitorados por immunoblotting (IB), ensaio imunoenzimático (ELISA), imunodifusão em gel de agarose (IDGA) e reação em cadeia da polimerase do tipo nested (nPCR). Todos os cordeiros que mamaram colostro e leite de cabras infectadas e seis ovinos do grupo contato apresentaram resultados positivos na nPCR, apesar de soroconversão somente ter sido detectada em três dos 26 animais expostos, não havendo manifestação clínica de lentiviroses, em 720 dias de observação. Análises filogenéticas demonstraram estreita relação entre sequências virais obtidas dos animais infectados e sequência do protótipo lentiviral caprino CAEV-Cork. Dessa forma, concluiu-se que os lentivírus foram transmitidos de caprinos para ovinos, entretanto, o grau de adaptação da cepa viral à espécie hospedeira provavelmente interfere na persistência da infecção, taxa de soroconversão e manifestação da doença. Outras avaliações ainda foram conduzidas nos grupos colostro e controle, para estudo da transferência de imunidade passiva colostral contra LVPR, em cordeiros. Determinaram-se as concentrações de proteína sérica total (PST), albumina (ALB), globulinas (GLOB) e imunoglobulina G (IgG). Em ambos os grupos, as menores médias de PST, GLOB e IgG foram observadas ao nascimento e as maiores médias foram constatadas às 24 horas de vida, devido à absorção de imunoglobulinas colostrais. Para o grupo colostro, a transferência de imunidade também pôde ser constatada pelas provas de imunodiagnóstico. Ao nascimento, os animais estavam soronegativos. Com 24 horas, todos foram reagentes nos três testes sorológicos. Posteriormente, resultados negativos começaram a ser observados, a partir dos 15 dias de idade, pela prova de IDGA. Já pelo teste de ELISA, todos os animais permaneceram reagentes até os 50 dias de vida. Apenas o IB foi capaz de detectar anticorpos anti-LVPR aos 70 dias. Esses dados estão de acordo com a sensibilidade e especificidade de cada prova sorológica e demonstram que aos 90 e 120 dias de idade, anticorpos colostrais anti-LVPR não mais são detectados no soro de cordeiros, com o emprego dessas metodologias. [Interspecies transmission of lentiviruses from goats to sheep]. Caprine arthritis-encephalitis (CAE) and maedi-visna (MV) affect goats and sheep, respectively. For many years, the etiological agents of these diseases were considered specific to each animal species. However, phylogenetic analyses have demonstrated the heterogeneity of these viruses, bringing the various genotypes and subtypes in a group called small ruminant lentiviruses (SRLV). Thus, the main objective of this study was to evaluate the transmission of caprine lentivirus to sheep, using four experimental groups. The first (colostrum group) was formed by nine lambs receiving colostrum from goats positive for SRLV. The second (milk group) was established by nine lambs that received milk of these goats. The third was a control group, consisting of lambs that suckled colostrum and milk of negative mothers. The fourth group (contact group) was formed by eight adult sheep, confined with two naturally infected goats. The groups were monitored by immunoblotting (IB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), agar gel immunodiffusion (AGID) and nested polymerase chain reaction (nPCR). All lambs that suckled colostrum and milk of infected goats and six sheep of the contact group had positive results in the nPCR, although seroconversion was detected only in three of the exposed animals, with no clinical lentiviruses manifestation, in 720 days of observation. Phylogenetic analysis showed a close relationship between viral sequences obtained from infected animals and the prototype CAEV-Cork. It was concluded that SRLV have been transmitted from goats to sheep, however, the degree of adaptation of the virus strain to the host species probably interferes with the infection persistence, seroconversion rate and disease manifestation. Further analyzes were also conducted in colostrum and control groups for the study of passive immunity against SRLV in lambs. The concentrations of total serum protein (TSP), albumin (ALB), globulin (GLOB) and immunoglobulin G (IgG) were determined. In both groups, the lowest averages of TSP, GLOB and IgG were observed at birth and the highest averages were observed at 24 hours of life, due to absorption of colostral immunoglobulins. For colostrum group, transfer of immunity could also be detected by immunodiagnostic tests. At birth, the animals were negative. After 24 hours, all animals were positive in three serological tests. Negative results were first observed 15 days after birth by the AGID test. As for ELISA testing, all animals remained reagent until 50 days old. Only IB was able to detect anti-SRLV at 70 days. These data are consistent with the sensitivity and specificity of serological tests and show that at 90 and 120 days of age, colostral antibodies to SRLV are no longer detected in the serum of lambs, with the use of these methodologies.
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O primeiro (grupo colostro) foi formado por nove cordeiros que receberam colostro de cabras positivas para LVPR. O segundo (grupo leite) foi estabelecido por nove cordeiros que receberam leite dessas cabras. O terceiro foi um grupo controle, constituído por dez cordeiros que mamaram colostro e leite de suas mães negativas. Já o quarto grupo (grupo contato) foi formado por oito ovinos adultos confinados com duas cabras naturalmente infectadas, propiciando a análise de transmissão horizontal. Os grupos foram monitorados por immunoblotting (IB), ensaio imunoenzimático (ELISA), imunodifusão em gel de agarose (IDGA) e reação em cadeia da polimerase do tipo nested (nPCR). Todos os cordeiros que mamaram colostro e leite de cabras infectadas e seis ovinos do grupo contato apresentaram resultados positivos na nPCR, apesar de soroconversão somente ter sido detectada em três dos 26 animais expostos, não havendo manifestação clínica de lentiviroses, em 720 dias de observação. Análises filogenéticas demonstraram estreita relação entre sequências virais obtidas dos animais infectados e sequência do protótipo lentiviral caprino CAEV-Cork. Dessa forma, concluiu-se que os lentivírus foram transmitidos de caprinos para ovinos, entretanto, o grau de adaptação da cepa viral à espécie hospedeira provavelmente interfere na persistência da infecção, taxa de soroconversão e manifestação da doença. Outras avaliações ainda foram conduzidas nos grupos colostro e controle, para estudo da transferência de imunidade passiva colostral contra LVPR, em cordeiros. Determinaram-se as concentrações de proteína sérica total (PST), albumina (ALB), globulinas (GLOB) e imunoglobulina G (IgG). Em ambos os grupos, as menores médias de PST, GLOB e IgG foram observadas ao nascimento e as maiores médias foram constatadas às 24 horas de vida, devido à absorção de imunoglobulinas colostrais. Para o grupo colostro, a transferência de imunidade também pôde ser constatada pelas provas de imunodiagnóstico. Ao nascimento, os animais estavam soronegativos. Com 24 horas, todos foram reagentes nos três testes sorológicos. Posteriormente, resultados negativos começaram a ser observados, a partir dos 15 dias de idade, pela prova de IDGA. Já pelo teste de ELISA, todos os animais permaneceram reagentes até os 50 dias de vida. Apenas o IB foi capaz de detectar anticorpos anti-LVPR aos 70 dias. Esses dados estão de acordo com a sensibilidade e especificidade de cada prova sorológica e demonstram que aos 90 e 120 dias de idade, anticorpos colostrais anti-LVPR não mais são detectados no soro de cordeiros, com o emprego dessas metodologias. [Interspecies transmission of lentiviruses from goats to sheep]. Caprine arthritis-encephalitis (CAE) and maedi-visna (MV) affect goats and sheep, respectively. For many years, the etiological agents of these diseases were considered specific to each animal species. However, phylogenetic analyses have demonstrated the heterogeneity of these viruses, bringing the various genotypes and subtypes in a group called small ruminant lentiviruses (SRLV). Thus, the main objective of this study was to evaluate the transmission of caprine lentivirus to sheep, using four experimental groups. The first (colostrum group) was formed by nine lambs receiving colostrum from goats positive for SRLV. The second (milk group) was established by nine lambs that received milk of these goats. The third was a control group, consisting of lambs that suckled colostrum and milk of negative mothers. The fourth group (contact group) was formed by eight adult sheep, confined with two naturally infected goats. The groups were monitored by immunoblotting (IB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), agar gel immunodiffusion (AGID) and nested polymerase chain reaction (nPCR). All lambs that suckled colostrum and milk of infected goats and six sheep of the contact group had positive results in the nPCR, although seroconversion was detected only in three of the exposed animals, with no clinical lentiviruses manifestation, in 720 days of observation. Phylogenetic analysis showed a close relationship between viral sequences obtained from infected animals and the prototype CAEV-Cork. It was concluded that SRLV have been transmitted from goats to sheep, however, the degree of adaptation of the virus strain to the host species probably interferes with the infection persistence, seroconversion rate and disease manifestation. Further analyzes were also conducted in colostrum and control groups for the study of passive immunity against SRLV in lambs. The concentrations of total serum protein (TSP), albumin (ALB), globulin (GLOB) and immunoglobulin G (IgG) were determined. In both groups, the lowest averages of TSP, GLOB and IgG were observed at birth and the highest averages were observed at 24 hours of life, due to absorption of colostral immunoglobulins. For colostrum group, transfer of immunity could also be detected by immunodiagnostic tests. At birth, the animals were negative. After 24 hours, all animals were positive in three serological tests. Negative results were first observed 15 days after birth by the AGID test. As for ELISA testing, all animals remained reagent until 50 days old. Only IB was able to detect anti-SRLV at 70 days. These data are consistent with the sensitivity and specificity of serological tests and show that at 90 and 120 days of age, colostral antibodies to SRLV are no longer detected in the serum of lambs, with the use of these methodologies.Tese (Doutorado em Ciência Animal nos Trópicos) - Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal da Bahia, Salvador. Orientador: Joselito Nunes Costa; Co-orientador: Raymundo Rizaldo Pinheiro (CNPC).Thiago Sampaio de Souza.SOUZA, T. S. de2017-08-10T23:54:33Z2017-08-10T23:54:33Z2015-02-0520142017-08-10T23:54:33Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis123 f.2014.http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1007836porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da EMBRAPA (Repository Open Access to Scientific Information from EMBRAPA - Alice)instname:Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa)instacron:EMBRAPA2017-08-16T04:18:29Zoai:www.alice.cnptia.embrapa.br:doc/1007836Repositório InstitucionalPUBhttps://www.alice.cnptia.embrapa.br/oai/requestopendoar:21542017-08-16T04:18:29falseRepositório InstitucionalPUBhttps://www.alice.cnptia.embrapa.br/oai/requestcg-riaa@embrapa.bropendoar:21542017-08-16T04:18:29Repositório Institucional da EMBRAPA (Repository Open Access to Scientific Information from EMBRAPA - Alice) - Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa)false
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Artrite-encefalite caprina
LVPR
SRLV
CAE
CAEV
Caprine arthritis encephalit virus
Caprino
Ovino
Doença animal
Transmissão de doença
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Goats
Lentivirus
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Animal diseases
Cross infection
Visna maedi virus
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Já o quarto grupo (grupo contato) foi formado por oito ovinos adultos confinados com duas cabras naturalmente infectadas, propiciando a análise de transmissão horizontal. Os grupos foram monitorados por immunoblotting (IB), ensaio imunoenzimático (ELISA), imunodifusão em gel de agarose (IDGA) e reação em cadeia da polimerase do tipo nested (nPCR). Todos os cordeiros que mamaram colostro e leite de cabras infectadas e seis ovinos do grupo contato apresentaram resultados positivos na nPCR, apesar de soroconversão somente ter sido detectada em três dos 26 animais expostos, não havendo manifestação clínica de lentiviroses, em 720 dias de observação. Análises filogenéticas demonstraram estreita relação entre sequências virais obtidas dos animais infectados e sequência do protótipo lentiviral caprino CAEV-Cork. Dessa forma, concluiu-se que os lentivírus foram transmitidos de caprinos para ovinos, entretanto, o grau de adaptação da cepa viral à espécie hospedeira provavelmente interfere na persistência da infecção, taxa de soroconversão e manifestação da doença. Outras avaliações ainda foram conduzidas nos grupos colostro e controle, para estudo da transferência de imunidade passiva colostral contra LVPR, em cordeiros. Determinaram-se as concentrações de proteína sérica total (PST), albumina (ALB), globulinas (GLOB) e imunoglobulina G (IgG). Em ambos os grupos, as menores médias de PST, GLOB e IgG foram observadas ao nascimento e as maiores médias foram constatadas às 24 horas de vida, devido à absorção de imunoglobulinas colostrais. Para o grupo colostro, a transferência de imunidade também pôde ser constatada pelas provas de imunodiagnóstico. Ao nascimento, os animais estavam soronegativos. Com 24 horas, todos foram reagentes nos três testes sorológicos. Posteriormente, resultados negativos começaram a ser observados, a partir dos 15 dias de idade, pela prova de IDGA. Já pelo teste de ELISA, todos os animais permaneceram reagentes até os 50 dias de vida. Apenas o IB foi capaz de detectar anticorpos anti-LVPR aos 70 dias. Esses dados estão de acordo com a sensibilidade e especificidade de cada prova sorológica e demonstram que aos 90 e 120 dias de idade, anticorpos colostrais anti-LVPR não mais são detectados no soro de cordeiros, com o emprego dessas metodologias. [Interspecies transmission of lentiviruses from goats to sheep]. Caprine arthritis-encephalitis (CAE) and maedi-visna (MV) affect goats and sheep, respectively. For many years, the etiological agents of these diseases were considered specific to each animal species. However, phylogenetic analyses have demonstrated the heterogeneity of these viruses, bringing the various genotypes and subtypes in a group called small ruminant lentiviruses (SRLV). Thus, the main objective of this study was to evaluate the transmission of caprine lentivirus to sheep, using four experimental groups. The first (colostrum group) was formed by nine lambs receiving colostrum from goats positive for SRLV. The second (milk group) was established by nine lambs that received milk of these goats. The third was a control group, consisting of lambs that suckled colostrum and milk of negative mothers. The fourth group (contact group) was formed by eight adult sheep, confined with two naturally infected goats. The groups were monitored by immunoblotting (IB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), agar gel immunodiffusion (AGID) and nested polymerase chain reaction (nPCR). All lambs that suckled colostrum and milk of infected goats and six sheep of the contact group had positive results in the nPCR, although seroconversion was detected only in three of the exposed animals, with no clinical lentiviruses manifestation, in 720 days of observation. Phylogenetic analysis showed a close relationship between viral sequences obtained from infected animals and the prototype CAEV-Cork. It was concluded that SRLV have been transmitted from goats to sheep, however, the degree of adaptation of the virus strain to the host species probably interferes with the infection persistence, seroconversion rate and disease manifestation. Further analyzes were also conducted in colostrum and control groups for the study of passive immunity against SRLV in lambs. The concentrations of total serum protein (TSP), albumin (ALB), globulin (GLOB) and immunoglobulin G (IgG) were determined. In both groups, the lowest averages of TSP, GLOB and IgG were observed at birth and the highest averages were observed at 24 hours of life, due to absorption of colostral immunoglobulins. For colostrum group, transfer of immunity could also be detected by immunodiagnostic tests. At birth, the animals were negative. After 24 hours, all animals were positive in three serological tests. Negative results were first observed 15 days after birth by the AGID test. As for ELISA testing, all animals remained reagent until 50 days old. Only IB was able to detect anti-SRLV at 70 days. These data are consistent with the sensitivity and specificity of serological tests and show that at 90 and 120 days of age, colostral antibodies to SRLV are no longer detected in the serum of lambs, with the use of these methodologies.
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