Caracterização funcional do gene VviAGL11 durante a morfogênese da semente em videira e seu potencial uso biotecnológico.

• Main Author: MALABARBA, J.
• Publication Date: 2018
• Format: Doctoral thesis
• Language: por
• Source: Repositório Institucional da EMBRAPA (Repository Open Access to Scientific Information from EMBRAPA - Alice)
• Download full: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1103204
• topic: Semente da videira; Videira; Uvas de mesa; VviAGL11; Gene candidato VviAGL11; Indivíduos apirênicos genotipados; Videiras apirênicas; Uva; Semente; Vitis Vinifera

A ausência de semente em videira, também chamada de apirenia, é amplamente apreciada pelo mercado consumidor de uvas de mesa. No entanto, os mecanismos moleculares que controlam a morfogênese da semente não são totalmente compreendidos. Por este trabalho, buscou-se caracterizar funcionalmente o gene candidato VviAGL11, avaliando seu papel na morfogênese de sementes de Vitis vinifera. Dados prévios permitiram determinar o padrão de expressão de VviAGL11 na camada da endotesta da casca da semente, que precisa alongar e aumentar o número de célula s para que haja a lignificação e a determinação do tamanho final da semente. No presente estudo, a função de VviAGL11 foi avaliada por meio de sua expressão ectópica no mutante de seedstick (AGL11) de Arabidopsis thaliana, o que restaurou o fenótipo e confirmou o papel direto deste gene no desenvolvimento da semente, sugerindo que a depleção de sua expressão é responsável pelo desenvolvimento errôneo da camada de endotesta da semente, culminando no fenótipo de apirenia típico. Além disso, a função de VviAGL11foi avaliada em videira com o uso de plasmídeos vegetais. Os resultados permitiram demonstrarque a alta expressão de VviAGL11na cultivar apirênica Linda, após tratamento,está relacionada com a presença de pequenas sementes que não foram encontradas nas amostras-controle não tratadas. Além disso, cachos de ?Italia? e ?Ruby? tratados com o plasmídeo de silenciamento VviAGL11mostraram diminuição da expressão desse gene, número reduzido de sementes e aumento do número de traços de sementes. Em conjunto, os resultados confirmam que VviAGL11é um importante regulador da morfogênese de sementes emvideira. Em adição, populações segregantes para ausência de sementes foram testadas com cinco marcadores SSR, dos quais três marcadores microssatélites mostraram-se relacionados à ausência de sementes e poderiam ser usados com 100% de eficiência em um haplótipo para seleção assistida. Ao mesmo tempo, nove marcadores do tipo SNPs e INDELs foram desenvolvidos com base na sequência do alelo de VviAGL11associado à ausência de sementes em V.vinifera. Para os marcadores VvAGL11_KASP_2,VvAGL11_KASP_3,VvAGL11_KASP_8 e VvAGL11_KASP_9, polimorfismos foram observados segregando em indivíduos apirênicos genotipados, confirmando sua associação com a ausência de sementes e sugerindo seu uso na estratégia de seleção assistida rápida e eficaz de videiras apirênicas