Bibliographic Details
| Main Author: |
ALMEIDA, BEATRIZ E. de |
| Publication Date: |
2013 |
| Format: |
Doctoral thesis
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| Source: |
Repositório Institucional do IPEN |
| Download full: |
http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/10592
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Summary: |
Com a inten????o de estabelecer m??todos f??sico-qu??micos como uma alternativa ao bioensaio in vivo para determina????o de atividade biol??gica, o conte??do de hFSH, hTSH e hLH de diferentes prepara????es, nativas e recombinantes, foi determinado por cromatografia l??quida de alta efici??ncia em fase reversa (RP-HPLC) e comparado ao dado obtido pelo cl??ssico bioensaio in vivo em camundongos ou ratos (BA). Para estes horm??nios foi encontrada uma rela????o linear entre os dois m??todos: hFSH BAUI = 0,9925 RP-HPLCUI - 1,3165, r = 0,9371, p < 0,001, n = 24; hTSH BAμg = 0,9790 RP-HPLCμg - 0,052, r = 0,8725 , p < 0,001, n = 14; hLH BAUI = 0,8771 RP-HPLCUI + 12,41; r = 0,9786, p < 0,01, n = 5. Para outras nove prepara????es de hFSH e onze prepara????es de hTSH foi determinada a diferen??a m??dia (d) entre a bioatividade predita pela RP-HPLC atrav??s destas equa????es e da m??dia das bioatividades obtidas com os dois m??todos. Para o hLH n??o foi poss??vel determinar esta diferen??a em virtude das poucas amostras dispon??veis. No caso do hFSH, d ?? DP = -2,11 ?? 3,49 % sendo a precis??o de 1,16% e no caso do hTSH, d ?? DP = -2,01 ?? 5,56 % com precis??o de 1,68%. Amostras parcialmente alteradas apresentaram diferentes graus de atividade de hFSH, hTSH e hLH que puderam ser preditas por RP-HPLC com uma aceit??vel concord??ncia com os bioensaios in vivo. Estes resultados demonstraram que o emprego de um ensaio f??sico-qu??mico sem o uso de animais, tal como a RP-HPLC, ?? uma alternativa vi??vel ao uso do bioensaio in vivo para a determina????o da pot??ncia de hFSH e hTSH, reduzindo assim o n??mero de animais em geral utilizados para assegurar a qualidade e efic??cia de um produto farmac??utico. |