Optimization and internal validation of a method for extraction and detection of ochratoxin A in cheese

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Zribi, Sirine
Data de Publicação: 2020
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10198/22747
Resumo: Mestrado de dupla diplomação com a Université Libre de Tunis
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spelling Optimization and internal validation of a method for extraction and detection of ochratoxin A in cheeseOchratoxin ACheeseDomínio/Área Científica::Ciências Agrárias::Biotecnologia Agrária e AlimentarMestrado de dupla diplomação com a Université Libre de TunisMycotoxins are toxic secondary metabolites produced by fungi when they grow in food and feedstuff. Milk and dairy products especially cheese continue to raise concerns with regard to contamination with mycotoxins. However, for some items, such as cheese, there is a lack of precise information available about mycotoxin contents. The objective of this study was to develop an extraction, cleanup and detection method for the determination of ochratoxin A (OTA) occurrence in “Serra da Estrela” cheese. To achieve this goal, extraction conditions were selected by testing different OTA extraction methods. The influence of two variables on OTA recovery was evaluated: extraction efficiency of digestive enzymes (lipase and protease) and type of purification (liquid-liquid and immunoaffinity columns purification). Under optimized conditions, recoveries of OTA from spiked samples ranged from 62.7 to 70.6%. The HPLC determination by fluorescence detection allowed limits of detection and quantification of 0.45 and 1.51 μg/kg, respectively. A survey was conducted on twenty five “Serra da Estrela” cheeses obtained from 6 different certified producers using the proposed method. None of the samples was found to be contaminated with detectable levels of OTA.As micotoxinas são metabolitos secundários tóxicos produzidos por fungos quando crescem em alimentos e rações. O leite e os produtos lácteos, especialmente o queijo, continuam a suscitar preocupações no que diz respeito à contaminação por micotoxinas. No entanto, para alguns itens, como queijo, há uma falta de informação precisa disponível sobre o conteúdo de micotoxinas. O objetivo do presente estudo foi otimizar um método de extração, limpeza e detecção para a determinação da ocorrência de ocratoxina A (OTA) no queijo “Serra da Estrela”. Para atingir esse objetivo, as condições de extração foram selecionadas testando diferentes métodos de extração de OTA. A influência de duas variáveis na recuperação da OTA foi avaliada: eficiência de extração de enzimas digestivas (lipase e protease) e tipo de purificação (purificação líquido-líquido e colunas de imunoafinidade). As taxas de recuperação obtidas pelo método selecionado variaram entre 62,7 e 70,6%. A determinação por HPLC por detecção de fluorescência permitiu limites de detecção e quantificação de 0,45 e 1,51 μg/kg, respectivamente. Foi realizada uma pesquisa de OTA em 25 amostras de queijo Serra da Estrela. Nenhuma das amostras apresentou níveis detectáveis de OTA.Rodrigues, PaulaPeres, António M.Oueslati, SouheibBiblioteca Digital do IPBZribi, Sirine2020-09-30T09:32:50Z20202020-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10198/22747TID:202522032enginfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-11-21T10:50:54Zoai:bibliotecadigital.ipb.pt:10198/22747Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T23:13:53.506750Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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