Citogenética Convencional e FISH - Apoio no diagnóstico Hematooncológico

• Autor(a) principal: Martins, Joana Patrícia Gonçalves
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/10469
• topic: Citogenética Convencional; Citogenética Molecular

A citogenética é o estudo da estrutura, função, número e comportamento biológico e patológico dos cromossomas. Pode ser dividida em citogenética clássica (ou convencional), que se baseia na análise dos cromossomas de células em divisão e citogenética molecular, que engloba técnicas essencialmente com base em hibridação in situ, independentes da obtenção de células em divisão. O principal objetivo da citogenética clínica é o diagnóstico das anomalias cromossómicas, que têm sido uma ferramenta indispensável no entendimento da patologia da leucemia, incluindo algumas alterações genéticas envolvidas na patogénese e previsão da resposta ao tratamento. A leucemia trata-se de uma doença neoplásica que afeta a normal produção e desenvolvimento e diferenciação das células sanguíneas. Existem quatro tipos fundamentais de leucemias: leucemia linfoblástica crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielóide crónica e leucemia mielóide aguda. A abordagem laboratorial que se aplicou neste relatório de estágio está muito dependente do tipo de leucemia, de uma forma generalizada na leucemia mielóide crónica e a leucemia mielóide aguda realizou-se culturas diretas e na leucemia linfoblástica crónica e na leucemia linfoblástica aguda executou-se culturas com estimuladores. Durante este estágio curricular no Laboratório de Genética do Centro Hospitalar de Trásos-Montes e Alto Douro, realizaram-se 50 culturas em amostras anonimizadas com suspeita de leucemia, 36 culturas diretas e sincronizadas e 14 culturas com estimuladores assim como as subsequentes manipulações e bandeamento. O bandeamento G aplicou-se em todas as culturas e o bandeamento NOR e bandeamento C empregou-se quando surgiram dúvidas no bandeamento G. Também se realizou a técnica de hibridização in situ por fluorescência (FISH) provenientes das suspensões celulares. Usaram-se sondas de sequência única sequência única #5, #7, #20, #13, #17,#11, α-sat #8, #12 e dual fusion t(9;22),t(4;14), t(11;14), t(14;18) e t(15;17) em 52 amostras. Seguidamente, procedeu-se a análise e elaboração dos cinco cariótipos para cada amostra, em que se usou para captação e edição das metafases o software Cytovision e Leica-CW4000 e a descrição dos respetivos cariótipos utilizando-se a nomenclatura descrita pelo Internacional System for human Cytogenetic Nomenclature 2016 (ISCN). Nas 36 culturas diretas e sincronizadas obtiveram-se: 22 amostras com cariótipo sem alterações cromossómicas, 2 amostras que apresentavam alterações cromossómica e 10 amostras sem crescimento celular. Nas 15 culturas com estimuladores observaram-se: 2 amostra com cariótipos sem alterações cromossómicas, 1 amostra com alterações cromossómicas, 11 amostras sem crescimento celular A integração na rotina de trabalho no laboratório de citogenética, permitiu-me compreender um pouco melhor a importância desta área e as anomalias cromossómicas associadas a cada tipo de leucemia. Este estágio também possibilitou-me adquirir autonomia, responsabilidade e rigor essenciais para quem trabalha num laboratório.