Estudo de alterações moleculares induzidas por oxidantes e antioxidantes em modelo eurocarionte

• Main Author: Graça, Andreia Duarte Allen
• Publication Date: 2019
• Format: Master thesis
• Language: por
• Source: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Download full: http://hdl.handle.net/10400.22/13948
• topic: Doenças neurodegenerativas; Danos do DNA; Agregação proteica; Vitamina E; Stress oxidativo; Efeito antioxidante

A disfunção mitocondrial e a agregação proteica são dois fenómenos que têm vindo a ser relacionados com as doenças neurodegenerativas e ambas estão interligadas com o stress oxidativo celular. A disfunção mitocondrial relaciona-se com o dano nos ácidos nucleicos e a agregação proteica com erros no folding proteico. No entanto, ainda não se definiu a agregação como uma causa ou consequência das doenças neurodegenerativas. Assim sendo, estadissertaçãodemestradotevecomoprincipaisobjetivosanalisarainfluênciadediferentes concentrações de peróxido de hidrogénio, um agente oxidante produzido pelas nossas células, na agregação proteica e no material genético, bem como o papel da vitamina E na reversão do efeito do H2O2. Para isso, amostras celulares de Saccharomyces cerevisiae foram recolhidas a meio da fase exponencial de crescimento. A análise dos agregados insolúveis foi realizada através da técnica eletroforética SDS-PAGE seguida de lise proteica e a quebra do DNA foi analisada através de eletroforese de agarose 1,5% seguida de RAPD-PCR. A exposição ao agente oxidante ao longo do tempo potenciou a agregação proteica, nomeadamente da ovalbumina. No entanto, o agente antioxidante não demonstrou qualquer tipo de reversão do efeito oxidante, parecendo apresentar um efeito pró-oxidante. Apesar de se observarem diferenças na agregação proteica ao longo do tempo, não se observaram quebras no material genético.