Aplicação de FISH e RQ-PCR no estudo da leucemia mielóide crónica

• Autor(a) principal: Branco, Susana Bernardete Coelho
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/8852
• topic: Leucemia; Terapêutica; Hibridização fluorescente in situ

O equilíbrio entre proliferação, diferenciação e renovação das células estaminais encontra-se alterado em pacientes com leucemia mielóide crónica (LMC). Este efeito resulta da actividade contínua da tirosina cinase expressa como consequência da translocação cromossómica recíproca t(9; 22) (q34; q11 ) da qual resulta o cromossoma Filadelfia (Ph). Os recentes avanços de técnicas citogenéticas e moleculares, tais como Fluorescent In Situ Hybridisation (FISH) e a Reverse Transcription Quantitative Polymerase Chain Reaction (RQ-PCR) têm substituído o Western Blotting e o Southern blotting em complemento do estudo do cariótipo. Constituem também boas alternativas em termos de rapidez e eficácia na confirmação do diagnóstico e monitorização da terapêutica. A comparação das duas técnicas é essencial para determinar o valor destas na monitorização e diagnóstico da LMC. Na escolha de um teste laboratorial é ponderada também a necessidade de métodos rápidos e sensíveis para avaliar a resposta à terapêutica de pacientes com LMC. Este estudo tem como como objectivo avaliar a sensibilidade e utilidade clínica das técnicas de RQ-PCR e de FISH no diagnóstico e na monitorização da LMC. O estudo incidiu sobre um grupo de 38 pacientes seguidos nas consultas de Hematologia dos Hospitais da Universidade de Coimbra, aos quais foi diagnosticada LMC e que foram alvo de análises por FISH e RQ-PCR. Através da correlação de Spearman foram avaliadas as concordâncias entre os resultados de FISH e de RQ-PCR. Obteve-se uma correlação significativa (0,79) entre resultados dos dois métodos no que diz respeito à concordância entre resultados positivos e negativos. Foram encontrados resultados concordantes entre FISH e RQ-PCR em 92,1% (35 pacientes) dos casos analisados e uma discordância em 7,9% (3 pacientes). O estudo realizado apoia a possibilidade de diagnosticar e controlar a LMC por meio de FISH e por RQ-PCR, embora seja necessário o alargamento do estudo combinado por FISH e RQ-PCR a um maior número de amostras a fim de proporcionar uma avaliação mais eficaz do diagnóstico e acompanhamento da LMC.