Detecção rápida de resistência a pirazinamida em Mycobcaterium tuberculosis pelo método em microplaca utilizando resazurina (REMA - Resazurin Microtiter Assay)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Campanerut, Paula Aline Zanetti
Data de Publicação: 2010
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Estadual de Maringá (RI-UEM)
Texto Completo: http://repositorio.uem.br:8080/jspui/handle/1/1911
Resumo: Tuberculosis (TB) is a chronic disease caused by an Acid Fast bacilli belonging to the Mycobacterium tuberculosis complex. Despite having almost been eradicated in developed countries, TB remains a major public health problem, especially in developing countries. Pyrazinamide (PZA) is a pro-drug used to treat TB, which requires conversion to its active form, pirazinóico acid (POA), by the pyrazinamidase enzyme (PZase), encoded by the pncA gene. Although the mechanism of action of POA remains unknown, it has been suggested that their accumulation in acidic pH, can disrupt the membrane potential of the bacillus, affecting the transport of nutrients. Early detection of drug resistance is very important for TB control and the beginning of treatment. However, the proportion method in Lowenstein-Jensen (LJ), that is routinely used in Brazil for detecting resistance in M. tuberculosis is laborious, time consuming and have low reproducibility at acid pH that is necessary to perform the test with PZA. Thus, the purpose of this study was standardize and evaluate the use of resazurin microtiter assay plate (REMA) for detection of resistant to PZA in M. tuberculosis. The research resulted the article: "Application of the resazurin microtiter assay plate (REMA) for detection of resistance in Mycobacterium tuberculosis", that shows how the REMA proposal may contribute to the rapid detection of PZA resistance, in a fast, sensitive and specific method.
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spelling Detecção rápida de resistência a pirazinamida em Mycobcaterium tuberculosis pelo método em microplaca utilizando resazurina (REMA - Resazurin Microtiter Assay)Rapid detection of resistance to pyrazinamide in Mycobacterium tuberculosis by Resazutin Microplate Assay (REMA)Mycobcaterium tuberculosisResistênciaTuberculoseMedicamentosREMABrasil.Mycobacterium tuberculosisPyrazinamideREMABrazil.Ciências da SaúdeFarmáciaTuberculosis (TB) is a chronic disease caused by an Acid Fast bacilli belonging to the Mycobacterium tuberculosis complex. Despite having almost been eradicated in developed countries, TB remains a major public health problem, especially in developing countries. Pyrazinamide (PZA) is a pro-drug used to treat TB, which requires conversion to its active form, pirazinóico acid (POA), by the pyrazinamidase enzyme (PZase), encoded by the pncA gene. Although the mechanism of action of POA remains unknown, it has been suggested that their accumulation in acidic pH, can disrupt the membrane potential of the bacillus, affecting the transport of nutrients. Early detection of drug resistance is very important for TB control and the beginning of treatment. However, the proportion method in Lowenstein-Jensen (LJ), that is routinely used in Brazil for detecting resistance in M. tuberculosis is laborious, time consuming and have low reproducibility at acid pH that is necessary to perform the test with PZA. Thus, the purpose of this study was standardize and evaluate the use of resazurin microtiter assay plate (REMA) for detection of resistant to PZA in M. tuberculosis. The research resulted the article: "Application of the resazurin microtiter assay plate (REMA) for detection of resistance in Mycobacterium tuberculosis", that shows how the REMA proposal may contribute to the rapid detection of PZA resistance, in a fast, sensitive and specific method.A tuberculose (TB) é uma doença crônica causada por bacilos pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis. Apesar de quase ter sido erradicada em países desenvolvidos, a TB continua sendo um importante problema de saúde pública, principalmente em países em desenvolvimento. A pirazinamida (PZA) é um pró-fármaco utilizado no tratamento da TB, que requer conversão à sua forma ativa, o ácido pirazinóico (POA), pela enzima pirazinamidase (PZase), que é codificada pelo gene pncA. Embora o mecanismo de ação do POA permaneça desconhecido, tem sido sugerido que o seu acúmulo em pH ácido, pode interromper o potencial de membrana do bacilo, afetando o transporte de nutrientes. A detecção precoce da resistência aos fármacos é muito importante para o controle da tuberculose e para o início do tratamento adequado. No entanto, o método das proporções em Lowenstein-Jensen (L-J), rotineiramente utilizado no Brasil para detecção de resistência em M. tuberculosis é trabalhoso, demanda tempo para obtenção dos resultados, além de possuir baixa reprodutibilidade em pH baixo, necessário para realização do teste contendo PZA. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi padronizar e avaliar o uso da Técnica em microplaca utilizando Resazurina como agente revelador (REMA) para detecção de resistência à PZA em M. tuberculosis. O resultado deste trabalho está no artigo: "Aplicação do método em microplaca utilizando resazurina (REMA- Resazurin Microtiter Assay) para detecção de resistência em Mycobacterium tuberculosis", que mostra como o método REMA proposto pode contribuir para a detecção rápida de resistência a PZA em M. tuberculosis, por uma técnica rápida, sensível e específica.37 fUniversidade Estadual de MaringáBrasilDepartamento de Análises ClínicasPrograma de Pós-Graduação em Biociências Aplicadas à FarmáciaUEMMaringá, PRCentro de Ciências da SaúdeRosilene Fressatti CardosoJane Marta Graton Mikcha - UEMEliana Valéria Patussi - UEMTerezinha Inez estivalet Svidzinski - UEMJorge Juarez Vieira Teixeira - UEMCampanerut, Paula Aline Zanetti2018-04-06T19:45:56Z2018-04-06T19:45:56Z2010info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://repositorio.uem.br:8080/jspui/handle/1/1911porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da Universidade Estadual de Maringá (RI-UEM)instname:Universidade Estadual de Maringá (UEM)instacron:UEM2018-10-08T17:19:49Zoai:localhost:1/1911Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.uem.br:8080/oai/requestopendoar:2024-04-23T14:54:54.967864Repositório Institucional da Universidade Estadual de Maringá (RI-UEM) - Universidade Estadual de Maringá (UEM)false
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