Herpesvirus felino 1: detecção e quantificação de DNA viral em gatos de abrigo

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Baumworcel, Natasha
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/26729
Resumo: A conjuntivite felina é a enfermidade mais frequente nos locais de grandes concentrações populacionais como abrigos e gatis. Herpesvirus felino 1 (FHV-1) é o microrganismo mais associado aos casos de conjuntivite em felinos. O diagnóstico laboratorial é essencial para o estabelecimento de um controle adequado e recentemente vem sendo realizado por meio de técnicas moleculares. O objetivo desse estudo foi realizar a determinação da carga viral de FHV-1 por meio de PCR em tempo real ou PCR quantitativa (qPCR) em amostras conjuntivais e de cavidade oral de felinos com e sem sintomatologia ocular oriundos de diferentes modelos de abrigo e correlacionar a carga viral com a gravidade dos sinais clínicos e com a estrutura física dos abrigos. Esse estudo se deu com amostras de 70 gatos entre dois e dez meses de idade (41 sintomáticos e 29 assintomáticos). Quatro abrigos foram visitados. Cada animal foi cadastrado em uma ficha clínica própria. Todos os animais foram examinados pela mesma médica veterinária. Os sinais oftalmológicos e de orofaringe foram categorizados de acordo com a gravidade dos sinais clínicos. As amostras de secreção conjuntival e orofaríngea foram coletadas separadamente, com o uso de escova citobrush®. O genoma viral foi extraído e foram realizados ensaios de qPCR utilizando sistema de sondas de hidrólise TaqMan® e curva padrão sintética. O uso da curva padrão sintética para FHV-1 foi implementada nesse estudo. FHV-1 foi detectado em igual proporção em animais sintomáticos e assintomáticos (90%) mas houve diferença estatística (P<0,05) entre as cargas virais dos animais sintomáticos e dos assintomáticos. Cargas virais mais altas de FHV-1 foram relacionadas a animais sintomáticos e nesses, os escores associados aos sinais clínicos mais graves apresentaram maiores cargas virais. A comparação da carga viral com relação a características dos abrigos mostrou ser estatisticamente significante (P<0,05). Maior carga viral foi observada no abrigo com alta densidade populacional, alta rotatividade de animais e circulação de ar inadequada no ambiente. A correlação entre as cargas virais obtidas de amostras de região ocular com amostras da região orofaríngea foi alta (r²=0,889), sugerindo que essa região é um importante sítio de excreção e transmissão de FHV-1.
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O objetivo desse estudo foi realizar a determinação da carga viral de FHV-1 por meio de PCR em tempo real ou PCR quantitativa (qPCR) em amostras conjuntivais e de cavidade oral de felinos com e sem sintomatologia ocular oriundos de diferentes modelos de abrigo e correlacionar a carga viral com a gravidade dos sinais clínicos e com a estrutura física dos abrigos. Esse estudo se deu com amostras de 70 gatos entre dois e dez meses de idade (41 sintomáticos e 29 assintomáticos). Quatro abrigos foram visitados. Cada animal foi cadastrado em uma ficha clínica própria. Todos os animais foram examinados pela mesma médica veterinária. Os sinais oftalmológicos e de orofaringe foram categorizados de acordo com a gravidade dos sinais clínicos. As amostras de secreção conjuntival e orofaríngea foram coletadas separadamente, com o uso de escova citobrush®. O genoma viral foi extraído e foram realizados ensaios de qPCR utilizando sistema de sondas de hidrólise TaqMan® e curva padrão sintética. O uso da curva padrão sintética para FHV-1 foi implementada nesse estudo. FHV-1 foi detectado em igual proporção em animais sintomáticos e assintomáticos (90%) mas houve diferença estatística (P<0,05) entre as cargas virais dos animais sintomáticos e dos assintomáticos. Cargas virais mais altas de FHV-1 foram relacionadas a animais sintomáticos e nesses, os escores associados aos sinais clínicos mais graves apresentaram maiores cargas virais. A comparação da carga viral com relação a características dos abrigos mostrou ser estatisticamente significante (P<0,05). Maior carga viral foi observada no abrigo com alta densidade populacional, alta rotatividade de animais e circulação de ar inadequada no ambiente. A correlação entre as cargas virais obtidas de amostras de região ocular com amostras da região orofaríngea foi alta (r²=0,889), sugerindo que essa região é um importante sítio de excreção e transmissão de FHV-1.Feline conjunctivis is a common disease in places of great population concentrations such as shelters. Feline herpesvirus 1 (FHV-1) is the most frequently microorganism associated with cases of conjunctivitis in felines. Laboratory diagnosis is essential for the establishment of appropriate control of the disease, Recently, molecular diagnosis are more commonly used as diagnostic methods.The objective of this study was to determine FHV-1 viral load by real-time PCR or quantitative PCR (qPCR) in conjunctival and oral cavity samples of felines with and without conjunctivitis from different shelters models and correlate viral load with conunctivitis severity and shelters characteristics. This study was carried out with samples of 70 cats between two and ten months of age (41 symptomatics and 29 asymptomatics). Four different shelters were visited. Each animal was registered on its own clinical file. All animals underwent a clinical and ophthalmological examination by the same veterinarian. Ophthalmologic and oropharyngeal signs were categorized according to the severity of clinical signs. Conjunctiva and oropharyngeal secretion samples were collected separately using a cytobrush®. The viral genome was extracted and qPCR assays were performed using TaqMan® hydrolysis probes system and synthetic standard curve. The use of synthetic curve for FHV-1 methodology was implemented in this study. FHV-1 was detected in the same proportion in symptomatic and asymptomatic animals (90%) but there was statistical difference (P <0.05) between the viral loads of symptomatic and asymptomatic animals. Higher viral loads of FHV-1 were related to symptomatic animals and in these, scores associated with more severe clinical signs had higher viral loads. The comparison of the viral load with some shelter charactheristics were statistically significant (P <0.05). The highest viral load was observed in shelter with high population density, high turnover of animals and inadequate circulation of air in the environment. The correlation between the viral loads obtained from ocular region samples and samples from the oropharyngeal region was high (r²=0,889), suggesting that this region is an important site of excretion and transmission of FHV-1. Vaccinated and unvaccinated animals have statistically different viral loads (P <0.05). Lower viral loads are found in vaccinated animals.117 f.Almosny, Nádia Regina Pereirahttp://lattes.cnpq.br/9728618349304707Castro, Tatiana Xavier dehttp://lattes.cnpq.br/1640183835782217Soares, Ana Maria Barroshttp://lattes.cnpq.br/0817156129783989Almeida, Flavya Mendes dehttp://lattes.cnpq.br/3443309825570104Fumian, Tulio Machadohttp://lattes.cnpq.br/0636798749013144Kimura, Leda Maria Silvahttp://lattes.cnpq.br/6077770877726030Pereira, João Telhadohttp://lattes.cnpq.br/1757520979771094http://lattes.cnpq.br/3542570569917993Baumworcel, Natasha2022-10-31T16:52:04Z2022-10-31T16:52:04Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfBAUMWORCEL, Natasha. Herpesvirus felino 1: detecção e quantificação de DNA viral em gatos de abrigo. 2019. 117 f. 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