Emprego do sistema SPOM na utilização de moduladores de AMPc durante maturação oocitária in vitro na produção de embriões bovinos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Leal, Gabriela Ramos
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
Texto Completo: http://app.uff.br/riuff/handle/1/26245
Resumo: Adenosina monofosfato cíclica (AMPc) é uma molécula importante na transdução de sinal dentro da célula, que funciona como um segundo mensageiro celular da estimulação de gonadotrofinas.Um dos principais obstáculos para o sucesso total da produção in vitro de embriões (PIVE) é reproduzir adequadamente in vitro os eventos que ocorrem na maturação oocitária.Quando o oócito é liberado mecanicamente do folículo para a PIVE, os níveis intra-oocitários de AMPc diminuem, dando início a chamada maturação nuclear espontânea, levando a uma perda de sincronia com a maturação citoplasmática. Muitos estudos demonstraram que níveis mais elevados de AMPc antes da MIV melhoram a competência do oócito, levando a benefícios subsequentes no desenvolvimento embrionário. Dentre as diversas abordagens já descritas e propostas com a modulação dos níveis de AMPc, a aplicação do sistema bifásico " Simulated Phisiological Oocyte Maturation" (SPOM) ganhou bastante notoriedade, - apresentando reflexos positivos na produção de embriões - e atraiu considerável atenção ao longo dos anos. No entanto, por não sustentar os resultados positivos sempre que aplicado, teve sua credibilidade questionada e foi considerada ineficaz sob condições variadas. Considerando seus efeitos positivos e a possibilidade de otimização da etapa de MIV com seu uso, o objetivo deste estudo foi compreender as variáveis envolvidas na eficácia do sistema de maturação SPOM e buscar adaptações que permitam a sua utilização de forma bem sucedida, de maneira que isso se reflita na produção de embriões bovinos.Para isto, foram realizados três estudos apresentados em três capítulos experimentais. No primeiro capítulo, foi avaliado o efeito de uma adaptação no tempo de duração do sistema na produção de embriões bovinos, considerando parâmetros de qualidade; e os resultados observaram um efeito positivo da adaptação sobre a produção dos embriões que não afetou os parâmetros de qualidade observados.Já no segundo capítulo, testou-se a possibilidade de reprodução do sistema fora do meio base de maturação comercial em que ele foi desenvolvido quando proposto, e o possível efeito dessa mudança sobre a qualidade e o metabolismo dos embriões produzidos. Observou-se que o sistema pode ser empregado fora do meio de origem sem influência nas taxas de produção ou qualidade dos embriões, mas parece afetar negativamente a atividade metabólica dos embriões. E por fim, o terceiro capítulo compilou os estudos envolvendo o sistema para compreensão de sua evolução e pontuou os possíveis motivos para falhas através de comparações com o estudo original. Concluiu-se que embora extremamente delicado, o sistema é capaz de responder positivamente a alterações e pode ser reproduzido fora do meio de maturação de origem. No entanto, os resultados sugerem que as diferentes suplementações no meio de MIV podem constituir uma variável de importância em sua eficácia e demonstram que o sucesso envolvido em sua adequada aplicação está diretamente relacionada a protocolos laboratoriais utilizados pelo grupo de pesquisa responsável por sua idealização.
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Muitos estudos demonstraram que níveis mais elevados de AMPc antes da MIV melhoram a competência do oócito, levando a benefícios subsequentes no desenvolvimento embrionário. Dentre as diversas abordagens já descritas e propostas com a modulação dos níveis de AMPc, a aplicação do sistema bifásico " Simulated Phisiological Oocyte Maturation" (SPOM) ganhou bastante notoriedade, - apresentando reflexos positivos na produção de embriões - e atraiu considerável atenção ao longo dos anos. No entanto, por não sustentar os resultados positivos sempre que aplicado, teve sua credibilidade questionada e foi considerada ineficaz sob condições variadas. Considerando seus efeitos positivos e a possibilidade de otimização da etapa de MIV com seu uso, o objetivo deste estudo foi compreender as variáveis envolvidas na eficácia do sistema de maturação SPOM e buscar adaptações que permitam a sua utilização de forma bem sucedida, de maneira que isso se reflita na produção de embriões bovinos.Para isto, foram realizados três estudos apresentados em três capítulos experimentais. No primeiro capítulo, foi avaliado o efeito de uma adaptação no tempo de duração do sistema na produção de embriões bovinos, considerando parâmetros de qualidade; e os resultados observaram um efeito positivo da adaptação sobre a produção dos embriões que não afetou os parâmetros de qualidade observados.Já no segundo capítulo, testou-se a possibilidade de reprodução do sistema fora do meio base de maturação comercial em que ele foi desenvolvido quando proposto, e o possível efeito dessa mudança sobre a qualidade e o metabolismo dos embriões produzidos. Observou-se que o sistema pode ser empregado fora do meio de origem sem influência nas taxas de produção ou qualidade dos embriões, mas parece afetar negativamente a atividade metabólica dos embriões. E por fim, o terceiro capítulo compilou os estudos envolvendo o sistema para compreensão de sua evolução e pontuou os possíveis motivos para falhas através de comparações com o estudo original. Concluiu-se que embora extremamente delicado, o sistema é capaz de responder positivamente a alterações e pode ser reproduzido fora do meio de maturação de origem. No entanto, os resultados sugerem que as diferentes suplementações no meio de MIV podem constituir uma variável de importância em sua eficácia e demonstram que o sucesso envolvido em sua adequada aplicação está diretamente relacionada a protocolos laboratoriais utilizados pelo grupo de pesquisa responsável por sua idealização.Cyclic adenosine monophosphate (cAMP) is an important molecule in signal transduction within the cell, functioning as a second cell messenger of gonadotrophin stimulation. One of the main obstacles for the full success of the in vitro embryo production is to reproduce properly in vitro the events that occur on the oocyte maturation. When the oocyte is mechanically released from the follicle to IVP, the intra oocyte levels of cAMP decrease, and a non-physiologically meiotic resumption begins leading to a loss of synchrony with cytoplasmic maturation. Many studies have shown that higher levels of cAMP prior to IVM improve oocyte competence, leading to benefits in embryonic development. Among the several approaches already described regarding the cAMP levels modulation, the biphasic system "Simulated Physiological Oocyte Maturation" (SPOM) had a lot of notoriety, - with positive repercussions on embryo production- and attracted considerable attention over the years. However, by failing to sustain positive results whenever applied, it was considered ineffective under different conditions. Considering its positive effects and its possibility of optimizing the IVM stage, the aim of this study was to understand the variables involved in the effectiveness of the SPOM and to seek adaptations that allow its use in a successful way. In the first chapter, it was evaluated the effect of an adaptation in the SPOM IVM duration on the bovine embryo production considering quality parameters; and the results showed a positive effect on embryo production that did not affect their quality. In the second chapter, the possibility of reproducing the system without the IVM commercial medium was tested through the quality and metabolism of produced embryos. It was observed that the system can be used without the commercial medium without influencing the production rates or embryo quality, however, the embryos metabolic activity appears to be negatively affected. Finally, the third chapter compiled the studies involving the system to understand its evolution and pointed out possible reasons for failures through comparisons with the original study. It was concluded that although extremely delicate, the system is able to respond positively to changes and can be reproduced without the IVM original medium use. However, the results suggest that the excess of supplements in the IVM medium can be a variable of importance in its effectiveness and demonstrate that the success involved in its application is directly related to laboratory protocols used by the research group responsible for its development .155 f.Ferreira, Ana Maria Reishttp://lattes.cnpq.br/2733698712067098Nogueira, Luiz Altamiro Garciahttp://lattes.cnpq.br/3530272019702436Vasconcelos, Carlos Otávio de Paulahttp://lattes.cnpq.br/7349770411889161Serapião, Raquel Varellahttp://lattes.cnpq.br/3940470394972991Dias, Ângelo José Burlahttp://lattes.cnpq.br/9765923327693409Ferreira, Janaína Barcelos Portohttp://lattes.cnpq.br/9627181527561619Ribas, José Antônio Silvahttp://lattes.cnpq.br/6254832314937540Mello, Marco Roberto Bourg dehttp://lattes.cnpq.br/3560332978218414http://lattes.cnpq.br/4402230802992162Leal, Gabriela Ramos2022-09-13T19:27:06Z2022-09-13T19:27:06Z2019info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfLEAL, Gabriela Ramos Emprego do sistema SPOM na utilização de moduladores de AMPc durante maturação oocitária in vitro na produção de embriões bovinos. 2019. 155 f. 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