Malato sintase de Paracoccidioides brasiliensis é uma proteína ligada à superfície que se comporta como uma anchorless adesina

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: SILVA NETO, Benedito Rodrigues da
Data de Publicação: 2009
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFG
Texto Completo: http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tde/1295
Resumo: The pathogenic fungus Paracoccidioides brasiliensis causative of Paracoccidioidomycosis (PCM), a pulmonary mycose acquired by inhalation of fungal airborne propagules, which may disseminate to several organs and tissues leading to a severe form of the disease. Adhesion and invasion to host cells are essential steps involved in the internalization and dissemination of pathogens. Inside host, P. brasiliensis use the glyoxylate cycle for intracellular survival. Here, we provide evidence that malate synthase of P. brasiliensis (PbMLS) is localized on the cell wall, and is secreted. PbMLS was overexpressed in Escherichia coli, and polyclonal antibody against this protein was obtained. By using Confocal Laser Scanning Microscopy and Western blot analysis, PbMLS was detected in the cytoplasm and the cell wall of the yeast phase of P. brasiliensis of mother and bud yeast cells. PbMLSr and the respective polyclonal antibody produced against this protein inhibited the interaction of P. brasiliensis to in vitro cultured epithelial cells A549. These observations indicated that cell wall-associated MLS of P. brasiliensis could be mediating the binding of fungal cells, thus contributing to the adhesion of fungus to host tissues and to the dissemination of infection.
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spelling PEREIRA, Maristelahttp://lattes.cnpq.br/1345781867765758http://lattes.cnpq.br/5082780010357040SILVA NETO, Benedito Rodrigues da2014-07-29T15:16:38Z2010-08-242009-05-11SILVA NETO, Benedito Rodrigues da. The malate synthase of Paracoccidioides brasiliensis is a linked surface protein that behaves as an anchorless adhesin. 2009. 109 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biolóicas) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2009.http://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tde/1295The pathogenic fungus Paracoccidioides brasiliensis causative of Paracoccidioidomycosis (PCM), a pulmonary mycose acquired by inhalation of fungal airborne propagules, which may disseminate to several organs and tissues leading to a severe form of the disease. Adhesion and invasion to host cells are essential steps involved in the internalization and dissemination of pathogens. Inside host, P. brasiliensis use the glyoxylate cycle for intracellular survival. Here, we provide evidence that malate synthase of P. brasiliensis (PbMLS) is localized on the cell wall, and is secreted. PbMLS was overexpressed in Escherichia coli, and polyclonal antibody against this protein was obtained. By using Confocal Laser Scanning Microscopy and Western blot analysis, PbMLS was detected in the cytoplasm and the cell wall of the yeast phase of P. brasiliensis of mother and bud yeast cells. PbMLSr and the respective polyclonal antibody produced against this protein inhibited the interaction of P. brasiliensis to in vitro cultured epithelial cells A549. These observations indicated that cell wall-associated MLS of P. brasiliensis could be mediating the binding of fungal cells, thus contributing to the adhesion of fungus to host tissues and to the dissemination of infection.O fungo de patogênico Paracoccidioides brasiliensis agente causador da Paracoccidioidomicose (PCM), uma micose pulmonar adquirida pela inalação de propágulos aéreos do fungo que pode se disseminar a vários órgãos e tecidos levando a uma forma severa da doença. Dentro do hospedeiro, P. brasiliensis usa o ciclo do glioxalato (CG) para sobrevivência intracelular. Adesão e invasão das células do hospedeiro são passos essenciais envolvidos na internalização e disseminação do patógeno. Aqui, nós evidênciamos que malato sintase de P. brasiliensis (PbMLS) é secretada, e é localizada na parede da célula. PbMLS foi superexpressa em Escherichia coli, e o anticorpo policlonal contra esta proteína foi obtido. Usando Microscopia Laser Confocal (CLSM) e análise de Western blot, PbMLS foi encontrada no citoplasma e na parede da célula na fase leveduriforme de P. brasiliensis nas células mãe e broto. PbMLSr e o respectivo anticorpo policlonal produzido contra esta proteína inibiram a interação de P. brasiliensis com células epiteliais A549 cultivads in vitro. Estas observações indicariam que MLS associada à parede da célula de P. brasiliensis pode estar mediando a ligação do fungo às células, contribuindo assim com a adesão do fungo aos tecidos hospedeiros e para a disseminação da infecção.Made available in DSpace on 2014-07-29T15:16:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissert part 1 Benedito.pdf: 5001631 bytes, checksum: 7d51091e361c98586e384be80ebe9178 (MD5) Previous issue date: 2009-05-11application/pdfhttp://repositorio.bc.ufg.br/TEDE/retrieve/4029/Dissert%20part%201%20Benedito.pdf.jpgporUniversidade Federal de GoiásMestrado em BiologiaUFGBRCiências Biolóicas1. Paracoccidioides brasiliensis2. Malato sintase3. Ciclo do glioxalato4. Adesina1. Fungo - Paracoccidioides brasiliensis; 2. Micose pulmonar1. Paracoccidioides brasiliensis2. Malate synthase3. Glyoxylate cycle5. AdhesinCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::BIOLOGIA MOLECULARMalato sintase de Paracoccidioides brasiliensis é uma proteína ligada à superfície que se comporta como uma anchorless adesinaThe malate synthase of Paracoccidioides brasiliensis is a linked surface protein that behaves as an anchorless adhesininfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFGinstname:Universidade Federal de Goiás (UFG)instacron:UFGORIGINALDissert part 1 Benedito.pdfapplication/pdf5001631http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/9294dbbd-5ba2-4a07-99a0-810708b2e143/download7d51091e361c98586e384be80ebe9178MD51TEXTDissert part 1 Benedito.pdf.txtDissert part 1 Benedito.pdf.txtExtracted Texttext/plain54719http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/c931e68a-ff8d-49ab-aca1-598643cf352c/download0e30afb9077011c4e9cc443cffd284c7MD52THUMBNAILDissert part 1 Benedito.pdf.jpgDissert part 1 Benedito.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg4756http://repositorio.bc.ufg.br/tede/bitstreams/43d5fa7c-5353-4de7-a03c-f5af8c72c0ba/download6883ddc3467870a3317ffc99f5bf3e10MD53tde/12952014-07-30 03:10:31.945open.accessoai:repositorio.bc.ufg.br:tde/1295http://repositorio.bc.ufg.br/tedeRepositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.bc.ufg.br/oai/requesttasesdissertacoes.bc@ufg.bropendoar:2014-07-30T06:10:31Repositório Institucional da UFG - Universidade Federal de Goiás (UFG)false
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