Estudo da divisão nuclear em Rhinosporidium seeberi utilizando marcadores específicos de fluorescência avaliados por microscopia confocal

• Autor(a) principal: Darly Gomes Soares
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-ARLFJK
• topic: Mesomycetozoa; Rinosporidiose; Rhinosporidium seeberi; Ichthyosporea; Citocinese; Fungos patogênicos; Rinosporidiose; Micoses; Microscopia confocal

Rhinosporidium seeberi é um Ichthyosporea incultivável, que causa a rinosporidiose em animais, incluindo humanos. Por ser resistente ao cultivo, seu ciclo de vida pode ser estudado somente em tecidos frescos ou fixados em formalina. Por esta razão, sua posição taxonômica tem sido discutida por mais de 100 anos. Estudos moleculares filogenéticos recentes demostraram que o R. seeberi está localizado em um novo grupo de patógenos de peixes, anfíbios e outros animais, denominado Mesomycetozoa. Muito pouco se sabe acerca do ciclo de vida do R. seeberi e muito menos sobre o seu ciclo nuclear nos hospedeiros com rinosporidiose. Estudos recentes mostraram que esse patógeno apresenta divisão nuclear sincronizada sem citocinese. Portanto, para estudar o ciclo nuclear do R. seeberi e validar estudos anteriores, utilizamos microscopia confocal e investigar o seu comportamento nuclear em tecidos fixados em formalina marcados por DAPI e faloidina. Observamos que os esporângios juvenis do R. seeberi apresentam núcleo marcado por DAPI (5-7 µm) e, à medida que o ciclo celular progride, os núcleos se dividem sincrônicamente sem citocinese. Os esporângios intermediários apresentaram numerosos núcleos marcados por DAPI em diferentes estágios mitóticos, com diâmetro entre 3-4 µm, e uma fina camada interna da parede celular que retém fortemente o conjugado de faloidina. Os esporângios maduros apresentaram múltiplos endosporos com diâmetro entre 5-12 µm, cada um contendo núcleo com diâmetro entre 2-4 µm. O conjugado de faloidina não se ligou à camada interna da parede dos esporângios maduros nem dos endosporos. O desenvolvimento de uma zona germinativa na camada interna do esporângio maduro contendo centenas de núcleos marcados por DAPI também foi confirmada. O presente estudo establece que durante o ciclo de vida do R. seeberi ocorrem divisões nucleares sincronizadas resultando na formação de múltiplos núcleos. A citocinese é um evento único e ocorre após a formação de milhares de núcleos, logo antes da formação do esporângio maduro.